摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第13-15页 |
第二章 稳定携带生物发光荧光素酶(Luciferase)基因的细胞株的构建 | 第15-20页 |
2.1 材料 | 第15-16页 |
2.1.1 细胞株 | 第15页 |
2.1.2 主要试剂 | 第15页 |
2.1.3 主要仪器和设备 | 第15页 |
2.1.4 主要试剂的配置 | 第15-16页 |
2.2 方法 | 第16-17页 |
2.2.1 构建慢病毒RRLsin-Luc | 第16页 |
2.2.2 嘌呤霉素筛选稳定转染细胞 | 第16-17页 |
2.2.3 体外检测Luciferase报告基因 | 第17页 |
2.3 结果 | 第17-18页 |
2.3.1 稳定表达萤光素酶的细胞的检测 | 第17-18页 |
2.4 讨论 | 第18-20页 |
第三章 动物实验 | 第20-34页 |
3.1 材料 | 第20-21页 |
3.1.1 实验动物 | 第20页 |
3.1.2 主要试剂 | 第20页 |
3.1.3 主要仪器和设备 | 第20-21页 |
3.1.4 软件 | 第21页 |
3.2 方法 | 第21-23页 |
3.2.1 设定艾灸实验温度 | 第21页 |
3.2.2 艾灸干预实验 | 第21页 |
3.2.3 活体成像 | 第21-22页 |
3.2.4 组织切片 | 第22-23页 |
3.3 结果 | 第23-27页 |
3.3.1 维持(47±1)℃恒定温度的艾灸燃烧条件 | 第23-24页 |
3.3.2 艾灸抗B16-F10/luc和 4T1/luc肿瘤疗效结果 | 第24-26页 |
3.3.3 组织染色 | 第26-27页 |
3.4 讨论 | 第27-34页 |
3.4.1 设定实验艾灸温度 | 第27-28页 |
3.4.2 活体成像 | 第28-29页 |
3.4.3 抑瘤实验 | 第29-32页 |
3.4.4 组织病理学 | 第32-34页 |
第四章 基因芯片验证实验 | 第34-63页 |
4.1 材料 | 第34-37页 |
4.1.1 芯片类型及组织来源 | 第34页 |
4.1.2 主要试剂 | 第34-35页 |
4.1.3 主要仪器和设备 | 第35页 |
4.1.4 试剂的配置 | 第35-36页 |
4.1.5 软件和数据库 | 第36-37页 |
4.2 方法 | 第37-48页 |
4.2.1 MicroRNA芯片样品总RNA抽提 | 第37-38页 |
4.2.2 MicroRNA芯片Total RNA质检 | 第38页 |
4.2.3 MicroRNA芯片Flash Tag Biotin HSR连接步骤如下 | 第38-39页 |
4.2.4 MicroRNA芯片芯片杂交 | 第39-40页 |
4.2.5 MicroRNA芯片芯片洗涤和扫描 | 第40页 |
4.2.6 全转录组芯片样品总RNA抽提 | 第40-41页 |
4.2.7 全转录组芯片Total RNA质检 | 第41-42页 |
4.2.8 全转录组芯片First-cDNA第一链合成 | 第42页 |
4.2.9 全转录组芯片First-cDNA第二链合成 | 第42-43页 |
4.2.10 全转录组芯片体外转录(IVT)cRNA合成 | 第43页 |
4.2.11 全转录组芯片cRNA的纯化 | 第43-44页 |
4.2.12 全转录组芯片 2nd-cycle cDNA的合成 | 第44-45页 |
4.2.13 全转录组芯片 2nd-cycle cDNA纯化 | 第45页 |
4.2.14 全转录组芯片 2nd-cDNA片段化和标记 | 第45-46页 |
4.2.15 全转录组芯片芯片杂交 | 第46-47页 |
4.2.16 全转录组芯片芯片洗涤和扫描 | 第47-48页 |
4.3 结果 | 第48-60页 |
4.3.1 总RNA凝胶电泳图 | 第48页 |
4.3.2 基因芯片检测及聚类分析 | 第48-51页 |
4.3.3 靶基因预测 | 第51页 |
4.3.4 交集基因 | 第51-55页 |
4.3.5 差异基因显著靶向性功能分析——GO-Analysis | 第55-56页 |
4.3.6 差异基因参与的信号转导通路分析——Pathway-Analysis | 第56-57页 |
4.3.7 MicroRNA与交集靶基因的调控网络 | 第57-59页 |
4.3.8 构建lncRNA与mRNA的共表达网络——lncRNA-mRNA-network | 第59-60页 |
4.4 讨论 | 第60-63页 |
第五章 蛋白芯片验证实验 | 第63-71页 |
5.1 材料 | 第63-64页 |
5.1.1 芯片类型及组织来源 | 第63页 |
5.1.2 主要试剂 | 第63页 |
5.1.3 主要仪器和设备 | 第63-64页 |
5.1.4 软件和数据库 | 第64页 |
5.2 方法 | 第64-66页 |
5.2.1 组织裂解 | 第64页 |
5.2.2 玻片芯片的完全干燥 | 第64页 |
5.2.3 芯片操作流程 | 第64-65页 |
5.2.4 荧光检测 | 第65页 |
5.2.5 实验注意事项 | 第65-66页 |
5.3 结果 | 第66-68页 |
5.4 讨论 | 第68-71页 |
结论 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-76页 |
附录(已发表的综述) | 第76-86页 |
参考文献 | 第83-86页 |
致谢 | 第86-87页 |
攻读硕士学位期间科研成果目录 | 第87页 |