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骨髓间充质干细胞对小鼠脓毒症后心功能障碍的疗效及机制研究

缩略语表第6-7页
中文摘要第7-11页
英文摘要第11-13页
前言第14-15页
文献回顾第15-32页
第一部分 骨髓间充质干细胞对小鼠脓毒症后心功能障碍的治疗作用第32-52页
    1 材料第32-35页
        1.1 实验动物第32-33页
        1.2 主要试剂和材料第33-34页
        1.3 主要仪器第34-35页
    2 实验方法第35-41页
        2.1 BMSCs的原代分离、培养、鉴定第35-37页
        2.2 成纤维细胞的分离、培养第37页
        2.3 脓毒症小鼠模型的建立及实验分组第37-38页
        2.4 左室收缩及舒张功能测定第38-39页
        2.5 体内BMSCsFluc+e GFP+的BLI多模态成像第39页
        2.6 酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清心肌损伤指标及炎症因子水平第39页
        2.7 苏木精-伊红(HE)染色法观察小鼠各脏器组织病理变化第39-40页
        2.8 透射电子显微镜检测心肌超微结构的变化第40页
        2.9 蛋白测量第40-41页
        2.10 统计学分析第41页
    3 结果第41-49页
        3.1 BMSCs的生物学特征第41-43页
        3.2 小鼠LPS诱导的脓毒症模型细胞治疗后的一般状况第43页
        3.3 BMSCs可减轻脓毒症导致的重要脏器炎症损伤,减轻全身炎症反应水平第43-45页
        3.4 脓毒血症导致小鼠左室功能恶化,BMSCs治疗可显著改善心功能第45-47页
        3.5 小动物活体成像技术追踪腹腔内移植BMSCsFluc+e GFP+的存活和转归第47页
        3.6 透射电镜观察研究各组心肌的超微结构变化第47-48页
        3.7 BMSCs辅助治疗提高脓毒症小鼠生存率第48页
        3.8 LPS诱导的脓毒症小鼠心肌组织内m TORC1-p70S6K被活化第48-49页
    4 讨论第49-51页
    5 小结第51-52页
第二部分 心肌m TORC1-S6K信号通路在骨髓间充质干细胞治疗LPS所致小鼠脓毒症心功能障碍中的作用第52-76页
    1 材料第52-53页
        1.1 实验动物第52页
        1.2 实验动物使用:第52-53页
        1.3 腺病毒载体构建第53页
    2 方法第53-64页
        2.1 实验分组及流程第53-54页
        2.2 腺病毒载体包装及滴度测定第54-59页
        2.3 心肌特异性RAPTOR敲除鼠的制备与鉴定第59-62页
        2.4 腺病毒点注射心肌构建RAPTOR过表达小鼠第62-63页
        2.5 制备LPS诱导的脓毒症模型并进行细胞治疗第63页
        2.6 左室收缩及舒张功能测定第63页
        2.7 小动物活体成像技术追踪腹腔内移植BMSCsFluc+e GFP+的存活和转归第63页
        2.8 酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清心肌损伤指标及炎症因子水平第63页
        2.9 观察各组小鼠生存率第63-64页
        2.10 心肌组织凋亡TUNEL染色第64页
        2.11 蛋白含量检测第64页
    3 结果第64-72页
        3.1 转基因小鼠心肌内RAPTOR蛋白表达的测定第64-65页
        3.2 心肌特异性RAPTOR敲除可减轻脓毒血症导致小鼠心脏左室功能恶化,联合BMSCs治疗可更显著改善心功能,提高存活率第65-67页
        3.3 小动物活体生物发光成像(BLI)示踪腹腔内移植BMSCs~(Fluc+eGFP+)的存活和转归第67-68页
        3.4 Elisa法测定各组心肌组织炎症因子水平第68-71页
        3.5 心肌特异性RAPTOR基因敲lisa法测定各组心肌组织炎症因子水平除联合BMSCs治疗可显著减少心肌细胞的凋亡第71-72页
    4 讨论第72-74页
    5 小结第74-76页
第三部分 骨髓间充质干细胞治疗脓毒症心功能障碍的机制研究第76-86页
    1 材料与方法第76-79页
        1.1 细胞系第76页
        1.2 si RNA合成第76-77页
        1.3 腺病毒合成第77页
        1.4 cytomix的制备第77页
        1.5 实验流程及分组第77-79页
        1.6 siRNA及病毒转染方法第79页
    2 结果第79-83页
        2.1 炎症因子刺激可活化m TOR信号通路,BMSCs治疗可影响其活化水平第79-82页
        2.2 mTOR信号通路与TLR4-NF-κB信号通路在BMSCs治疗过程中的“互调”第82-83页
    3 讨论第83-85页
    4 小结第85-86页
参考文献第86-99页
个人简历和研究成果第99-101页
致谢第101-102页

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