摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-12页 |
1 前言 | 第13-20页 |
1.1 大豆(Glycine max (L.)Merr.)种子蛋白质组分改良育种的最新研究进展 | 第13-15页 |
1.1.1 低致敏大豆是低抗原大豆蛋白制品最经济、安全的原材料 | 第13-14页 |
1.1.2 国内外低/无致敏大豆品种的研究进展 | 第14页 |
1.1.3 大豆 7S致敏蛋白α-亚基缺失型低致敏大豆的研究 | 第14-15页 |
1.2 大豆作图群体在蛋白质组分改良中的作用 | 第15-17页 |
1.2.1 大豆染色体代换系群体的研究进展 | 第15-16页 |
1.2.2 近等基因系(NILs)在大豆蛋白质组分改良中的应用 | 第16-17页 |
1.3 大豆转录组学研究进展 | 第17-18页 |
1.3.1 转录组研究新技术:RNA-Seq的优势 | 第17-18页 |
1.3.2 RNA-Seq在大豆分子生物学中的应用 | 第18页 |
1.4 本研究的目的意义 | 第18-20页 |
2 材料与方法 | 第20-33页 |
2.1 大豆 7S致敏蛋白‘α-亚基缺失型’近等基因系的近等性评价 | 第20-26页 |
2.1.1 实验材料 | 第20页 |
2.1.2 SSR标记全基因组遗传背景选择 | 第20-23页 |
2.1.3 SDS-PAGE分析及Western杂交确认亚基组成 | 第23-26页 |
2.1.4 田间农艺性状调查及室内考种 | 第26页 |
2.1.5 品质分析 | 第26页 |
2.1.6 统计学分析 | 第26页 |
2.2 α-亚基缺失基因cgy-2 对大豆营养及加工品质的影响 | 第26-28页 |
2.2.1 材料来源及田间试验 | 第26页 |
2.2.2 蛋白含量测定 | 第26页 |
2.2.3 17 氨基酸组分和含量分析 | 第26页 |
2.2.4 大豆种子发育过程中17种游离氨基酸组分、含量分析 | 第26-27页 |
2.2.5 豆腐加工特性 | 第27-28页 |
2.2.6 统计分析方法 | 第28页 |
2.3 ‘cgy2NIL’及其轮回亲本种子不同发育时期基因表达谱的差异比较 | 第28-33页 |
2.3.1 植物材料的采集及预处理 | 第28页 |
2.3.2 籽粒发育各时期的比较转录组学分析 | 第28-30页 |
2.3.3 生物信息学分析 | 第30-31页 |
2.3.4 实时荧光定量PCR(RT-PCR)对表达谱测序结果的验证 | 第31-33页 |
3 结果与分析 | 第33-71页 |
3.1 大豆 7S致敏蛋白‘α-亚基缺失型’近等基因系的近等性评价 | 第33-43页 |
3.1.1 致敏蛋白α-亚基缺失型近等基因系(NILs)的构建 | 第33-34页 |
3.1.2 候选群体的近等性评价 | 第34-38页 |
3.1.3 近等性常规评价结果(综合农艺性状考察) | 第38-41页 |
3.1.4 ‘cgy2NIL’ α-亚基缺失特性的SDS-PAGE及Western杂交分析 | 第41-43页 |
3.2 α-亚基缺失基因cgy-2 对大豆营养及加工品质的影响 | 第43-51页 |
3.2.1 α-亚基缺失基因cgy-2 等位变异对大豆种子氨基酸组分及含量的影响 | 第43-46页 |
3.2.2 ‘cgy2NIL’种子发育过程中游离氨基酸积累模式的分析 | 第46-49页 |
3.2.3 α-亚基缺失基因cgy-2 对大豆种子豆腐加工品质的影响 | 第49-51页 |
3.3 ‘cgy2NIL’及其轮回亲本种子不同发育时期基因表达谱的差异比较 | 第51-71页 |
3.3.1 测序时期的选择 | 第52-53页 |
3.3.2 RNA-Seq基因表达谱的生物信息学结果分析 | 第53-60页 |
3.3.3 差异基因的Gene Ontology (GO)功能显著性富集分析 | 第60-62页 |
3.3.4 差异基因的Pathway功能显著性富集及通路分析 | 第62-64页 |
3.3.5 α-亚基缺失对转录因子(Transcription Factor,TF)基因表达的影响 | 第64-66页 |
3.3.6 α-亚基缺失对Cupin过敏蛋白家族基因表达的影响 | 第66-69页 |
3.3.7 实时荧光定量PCR验证RNA-Seq测序结果 | 第69-71页 |
4 讨论 | 第71-74页 |
5 结论 | 第74-75页 |
致谢 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-85页 |
附录 | 第85-94页 |
攻读博士期间发表学术论文 | 第94页 |