中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
引言 | 第10-12页 |
材料和方法 | 第12-25页 |
一、材料 | 第12-14页 |
1.1 标本及细胞系 | 第12页 |
1.2 主要试剂 | 第12-13页 |
1.3 主要仪器 | 第13-14页 |
二、方法 | 第14-25页 |
2.1 细胞培养 | 第14页 |
2.2 细胞总RNA提取 | 第14页 |
2.3 白血病患者样本收集 | 第14-15页 |
2.4 荧光定量PCR | 第15-16页 |
2.5 蛋白免疫印迹实验(Western blot) | 第16-17页 |
2.6 流式细胞术(Flow Cytometric Analysis) | 第17-18页 |
2.7 免疫荧光染色(Immunofluorescence Staining) | 第18页 |
2.8 免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation) | 第18-19页 |
2.9 GAS2 慢病毒表达载体的构建 | 第19-22页 |
2.10 制备慢病毒 | 第22-23页 |
2.11 细胞增殖和集落生成实验 | 第23页 |
2.12 Calpain活性的检测 | 第23页 |
2.13 裸鼠的皮下成瘤 | 第23-24页 |
2.14 以Ps为载体递送mi RNA | 第24页 |
2.15 细胞凋亡检测 | 第24页 |
2.16 统计学分析 | 第24-25页 |
结果 | 第25-36页 |
1、GAS2 在白血病细胞系株中的表达 | 第25-26页 |
2、GAS2 在多种白血病细胞株中的蛋白表达 | 第26页 |
3、GAS2 为沉默抑制THP-1 和Jurkat细胞的生长 | 第26-28页 |
4、过表达GAS2 能恢复由GAS2 沉默造成的生长抑制 | 第28-29页 |
5、沉默 GAS2 造成的 THP-1 细胞增殖抑制与细胞凋亡相关 | 第29页 |
6、沉默GAS2 显著抑制THP-1 细胞的裸鼠皮下成瘤能力 | 第29-30页 |
7、沉默GAS2 抑制CML患者CD34+细胞的集落生成 | 第30-31页 |
8、GAS2 与Calpain2 存在内源性相互结合 | 第31-32页 |
9、Calpain2 是沉默GAS2 抑制细胞生长所必需的 | 第32-34页 |
10、GAS2 在不同白血病患者及正常骨髓标本中的表达 | 第34-36页 |
讨论 | 第36-38页 |
参考文献 | 第38-41页 |
综述 Calpain与肿瘤细胞 | 第41-53页 |
参考文献 | 第46-53页 |
攻读学位期间公开发表的论文 | 第53-54页 |
主要试剂配制 | 第54-55页 |
中英文缩略词汇表 | 第55-56页 |
致谢 | 第56-58页 |