摘要 | 第2-3页 |
Abstract | 第3-4页 |
引言 | 第7-8页 |
第一章 材料与方法 | 第8-16页 |
1.1 材料 | 第8页 |
1.2 主要设备及仪器 | 第8页 |
1.3 细胞培养 | 第8-9页 |
1.3.1 细胞复苏 | 第8-9页 |
1.3.2 细胞传代 | 第9页 |
1.4 细胞转染 | 第9页 |
1.5 Trizon法提取细胞RNA | 第9-10页 |
1.6 RT-PCR检测mRNA | 第10-11页 |
1.6.1 RNA逆转录为cDNA | 第10页 |
1.6.2 以cDNA为模板进行PCR扩增 | 第10-11页 |
1.7 C33A细胞蛋白的提取 | 第11-12页 |
1.7.1 细胞蛋白的提取 | 第11页 |
1.7.2 BCA法测蛋白浓度 | 第11-12页 |
1.8 Western检测目的蛋白 | 第12-13页 |
1.8.1 SDS-PAGE电泳 | 第12页 |
1.8.2 电转移 | 第12页 |
1.8.3 免疫检测 | 第12-13页 |
1.8.4 化学发光 | 第13页 |
1.9 C33A细胞增殖检测 | 第13页 |
1.10 C33A细胞迁移实验 | 第13-14页 |
1.11 C33A细胞Transwell侵袭实验 | 第14页 |
1.12 Annexin V-PE法检测细胞凋亡 | 第14页 |
1.13 细胞核染色法检测细胞凋亡 | 第14-15页 |
1.14 统计学分析 | 第15-16页 |
第二章 结果 | 第16-24页 |
2.1 RT-PCR半定量检测C33A细胞中SIRT1 mRNA表达水平 | 第16-17页 |
2.2 Western Blot检测C33A细胞中SIRT1及其凋亡相关蛋白的表达水平 | 第17-18页 |
2.3 细胞增殖检测结果 | 第18页 |
2.4 SIRT1 siRNA对C33A细胞迁移能力的影响 | 第18-20页 |
2.5 SIRT1 siRNA对宫颈癌C33A细胞侵袭能力的影响 | 第20页 |
2.6 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第20-22页 |
2.7 Hoechst33258核染色检测细胞凋亡 | 第22-24页 |
第三章 讨论 | 第24-26页 |
小结 | 第26-27页 |
参考文献 | 第27-29页 |
综述 | 第29-39页 |
综述参考文献 | 第36-39页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第39-40页 |
致谢 | 第40-41页 |