| 摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 1 前言 | 第13-31页 |
| 1.1 研究的目的和意义 | 第13-14页 |
| 1.2 研究内容和技术路线 | 第14-15页 |
| 1.2.1 研究内容 | 第14-15页 |
| 1.2.2 研究技术路线 | 第15页 |
| 1.3 国内外研究动态与趋势 | 第15-31页 |
| 1.3.1 植物的表达系统和耐冷性 | 第16-22页 |
| 1.3.2 植物耐冷基因的研究进展 | 第22-24页 |
| 1.3.3 转录组测序 | 第24-26页 |
| 1.3.4 实时荧光定量PCR | 第26-27页 |
| 1.3.5 比较基因组学 | 第27页 |
| 1.3.6 RNA干扰技术的研究进展 | 第27-31页 |
| 2 材料与方法 | 第31-41页 |
| 2.1 黄瓜自交系的收集及耐冷性鉴定 | 第31-33页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第31页 |
| 2.1.2 试验方法 | 第31-33页 |
| 2.2 不同黄瓜自交系低温处理后转录组文库制备 | 第33-37页 |
| 2.2.1 试验材料 | 第33-34页 |
| 2.2.2 试验方法 | 第34-37页 |
| 2.3 黄瓜基因组中耐冷相关基因组织表达特异性分析 | 第37-40页 |
| 2.3.1 试验材料 | 第37页 |
| 2.3.2 处理方法 | 第37页 |
| 2.3.3 主要仪器设备 | 第37-38页 |
| 2.3.4 PCR引物设计与合成 | 第38页 |
| 2.3.5 总RNA的提取 | 第38页 |
| 2.3.6 c DNA链合成 | 第38页 |
| 2.3.7 反转录 | 第38-39页 |
| 2.3.8 荧光定量PCR | 第39-40页 |
| 2.4 利用RNAi验证候选基因在黄瓜耐冷中的功能 | 第40页 |
| 2.4.1 ds RNA干扰载体的构建 | 第40页 |
| 2.5 数据统计分析 | 第40-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-89页 |
| 3.1 黄瓜自交系耐冷性鉴定 | 第41-52页 |
| 3.1.1 利用冷害指数调查的方法对黄瓜自交系的耐冷性鉴定 | 第41页 |
| 3.1.2 不同耐冷性黄瓜自交系的生理生化指标变化规律 | 第41-52页 |
| 3.2 不同黄瓜自交系低温处理后基因表达谱差异分析 | 第52-86页 |
| 3.2.1 Solexa测序结果评估 | 第52-57页 |
| 3.2.2 获得的测序结果与分析 | 第57-86页 |
| 3.3 黄瓜基因组中耐冷基因组织表达特异性分析 | 第86-89页 |
| 3.3.1 荧光定量PCR曲线 | 第86-87页 |
| 3.3.2 特异性表达分析 | 第87-89页 |
| 4 讨论 | 第89-94页 |
| 4.1 黄瓜冷害与鉴定方法 | 第89-90页 |
| 4.2 基因克隆技术与转录组测序 | 第90-91页 |
| 4.3 黄瓜基因功能验证与生理生化指标 | 第91页 |
| 4.4 黄瓜低温处理后代谢通路和冷害调控的关系 | 第91-92页 |
| 4.5 耐冷相关基因的表达 | 第92-93页 |
| 4.6 本论文的创新之处 | 第93页 |
| 4.7 下一步工作设想 | 第93-94页 |
| 5 结论 | 第94-96页 |
| 致谢 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-116页 |
| 附录 | 第116-127页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第127页 |
