摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第1章 引言 | 第11-27页 |
1.1 先天免疫抗病毒研究 | 第11-20页 |
1.1.1 病毒的分类 | 第11-13页 |
1.1.2 机体抗病毒免疫应答 | 第13-14页 |
1.1.3 Toll样受体家族 | 第14-16页 |
1.1.4 RIG-I样受体家族 | 第16-20页 |
1.2 接头蛋白VISA介导的抗病毒研究 | 第20-24页 |
1.2.1 VISA的结构 | 第20-22页 |
1.2.2 VISA的相互作用蛋白 | 第22-23页 |
1.2.3 VISA参与的信号通路 | 第23-24页 |
1.3 研究背景及主要内容 | 第24-25页 |
1.4 研究路线 | 第25-27页 |
第2章 实验材料与方法 | 第27-45页 |
2.1 实验材料 | 第27-33页 |
2.1.1 酵母双杂交筛选所需材料及试剂 | 第27-29页 |
2.1.2 全基因克隆所需材料及试剂 | 第29-31页 |
2.1.3 免疫印迹、免疫共沉淀所需材料及试剂 | 第31-32页 |
2.1.4 双荧光素酶报告基因实验所需材料及试剂 | 第32页 |
2.1.5 RNA干扰实验所需材料及试剂 | 第32-33页 |
2.2 实验方法 | 第33-45页 |
2.2.1 酵母双杂交筛选 | 第33-35页 |
2.2.2 基因克隆 | 第35-39页 |
2.2.3 Western blot和免疫共沉淀 | 第39-41页 |
2.2.4 双荧光素酶报告基因实验 | 第41-42页 |
2.2.5 RNA干扰实验 | 第42-45页 |
第3章 实验结果 | 第45-71页 |
3.1 酵母双杂交筛选VISA相互作用的候选基因 | 第45-48页 |
3.2 VISA相互作用的候选基因的克隆 | 第48-50页 |
3.3 免疫共沉淀实验验证候选基因与VISA的相互作用 | 第50-53页 |
3.4 过表达HAUS8正调控在病毒介导的RLR-VISA信号通路 | 第53-56页 |
3.4.1 过表达HAUS8激活Se V介导的IFN-β、ISRE与NF-κB活性 | 第53-55页 |
3.4.2 过表达HAUS8增强由SeV介导的IRF3二聚化与P65磷酸化 | 第55-56页 |
3.5 敲减HAUS8负调节在病毒介导的RLR-VISA信号通路 | 第56-60页 |
3.5.1 HAUS8 RNAi载体的克隆及检测 | 第56-58页 |
3.5.2 敲减HAUS8抑制Se V介导的IFN-β、ISRE与NF-κB活性 | 第58-59页 |
3.5.3 敲减HAUS8抑制由Se V介导的IRF3二聚化与P65磷酸化 | 第59-60页 |
3.6 HAUS8作用于VISA复合体下游参与RLR-VISA信号通路 | 第60-65页 |
3.6.1 过表达HAUS8增强RIG-I、VISA与TBK1介导的RLR-VISA信号通路 | 第61-63页 |
3.6.2 敲减HAUS8抑制RIG-I、VISA与TBK1介导的RLR-VISA信号通路 | 第63-65页 |
3.7 HAUS8增强RIG-I、VISA与TBK1的多聚泛素化 | 第65-71页 |
3.7.1 过表达HAUS8增强RIG-I、VISA与TBK1的多聚泛素化 | 第66-68页 |
3.7.2 敲减HAUS8抑制RIG-I、VISA与TBK1的多聚泛素化 | 第68-71页 |
第4章 讨论 | 第71-75页 |
参考文献 | 第75-81页 |
致谢 | 第81-83页 |
在读期间公开发表论文及科研情况 | 第83页 |