| 中文摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-23页 |
| 1.1 结肠腺瘤息肉蛋白 | 第15-17页 |
| 1.1.1 结肠腺瘤息肉蛋白的结构 | 第15-16页 |
| 1.1.2 结肠腺瘤息肉蛋白的功能 | 第16-17页 |
| 1.1.3 结肠腺瘤息肉蛋白突变与相关疾病 | 第17页 |
| 1.2 纤毛 | 第17-21页 |
| 1.2.1 纤毛的结构 | 第17-18页 |
| 1.2.2 纤毛的组装、解聚和维持 | 第18-19页 |
| 1.2.3 纤毛的功能 | 第19-20页 |
| 1.2.4 纤毛相关疾病 | 第20-21页 |
| 1.3 结肠腺瘤息肉蛋白、纤毛和纤毛相关疾病 | 第21-22页 |
| 1.4 本研究的目的意义 | 第22-23页 |
| 第二章 APC-N片段过表达对MDCK细胞纤毛生长的影响 | 第23-28页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1 细胞系和质粒 | 第23页 |
| 2.1.2 主要抗体及试剂 | 第23-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-25页 |
| 2.2.1 细胞的冻存与复苏 | 第24页 |
| 2.2.2 细胞培养 | 第24页 |
| 2.2.3 细胞转染 | 第24页 |
| 2.2.4 蛋白提取及western印迹 | 第24-25页 |
| 2.2.5 免疫荧光染色 | 第25页 |
| 2.2.6 统计学分析 | 第25页 |
| 2.3 实验结果 | 第25-27页 |
| 2.3.1 APC-N在MDCK细胞中的表达和定位 | 第25-26页 |
| 2.3.2 APC-N过表达对MDCK细胞纤毛生长的影响 | 第26-27页 |
| 2.4 讨论 | 第27-28页 |
| 第三章 APC-N片段过表达对pericentrin定位、细胞周期进展及acetylated tubulin表达的影响 | 第28-33页 |
| 3.1 实验材料 | 第28页 |
| 3.1.1 细胞系和质粒 | 第28页 |
| 3.1.2 抗体及试剂 | 第28页 |
| 3.2 实验方法 | 第28-29页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第28-29页 |
| 3.2.2 细胞转染 | 第29页 |
| 3.2.3 蛋白提取及Western印迹 | 第29页 |
| 3.2.4 免疫荧光染色 | 第29页 |
| 3.2.5 统计学分析 | 第29页 |
| 3.3 实验结果 | 第29-31页 |
| 3.3.1 APC-N对基体组成蛋白pericentrin定位的影响 | 第29-30页 |
| 3.3.2 APC-N片段过表达对细胞周期进展的影响 | 第30-31页 |
| 3.3.3 APC-N片段过表达对acetylated tubulin表达的影响 | 第31页 |
| 3.4 讨论 | 第31-33页 |
| 第四章 APC-N片段通过β-catenin/PI3K/AKT/GSK-3β正反馈环调节对纤毛生长的抑制 | 第33-41页 |
| 4.1 实验材料 | 第33页 |
| 4.1.1 细胞系和质粒 | 第33页 |
| 4.1.2 抗体及试剂 | 第33页 |
| 4.2 实验方法 | 第33-34页 |
| 4.2.1 细胞培养 | 第33-34页 |
| 4.2.2 细胞转染 | 第34页 |
| 4.2.3 蛋白提取及Western印迹 | 第34页 |
| 4.2.4 免疫荧光染色 | 第34页 |
| 4.2.5 RNA干扰 | 第34页 |
| 4.2.6 抑制剂LY294002和SB216763处理细胞 | 第34页 |
| 4.2.7 统计学分析 | 第34页 |
| 4.3 实验结果 | 第34-39页 |
| 4.3.1 APC-N片段过表达对β-catenin和P-GSK-3β(Ser9)表达的影响 | 第34-35页 |
| 4.3.2 敲减β-catenin对APC-N介导的纤毛损伤的影响 | 第35页 |
| 4.3.3 GSK3β抑制剂SB216763对APC-N介导的纤毛损伤的影响 | 第35-37页 |
| 4.3.4 β-catenin、GSK-β和PI3K/AKT之间的相互作用及对纤毛生长的影响 | 第37-39页 |
| 4.4 讨论 | 第39-41页 |
| 参考文献 | 第41-46页 |
| 附录1 英文缩略语表 | 第46-48页 |
| 附录2 主要试剂配制 | 第48-49页 |
| 附录3 实验主要仪器设备 | 第49-50页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 个人简历及联系方式 | 第52-53页 |
| 承诺书 | 第53-54页 |
