摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩略语表 | 第11-12页 |
第一章 前言 | 第12-26页 |
1.1 鲢的生物学特性及育种研究 | 第12-13页 |
1.2 细胞周期蛋白 | 第13-17页 |
1.3 细胞周期检测点激酶Chk1 和细胞周期分裂素Cdc25A | 第17-19页 |
1.4 细胞凋亡研究 | 第19-22页 |
1.4.1 细胞凋亡介绍 | 第19-20页 |
1.4.2 低氧应激对细胞凋亡的影响 | 第20-22页 |
1.5 细胞周期与细胞凋亡的相互关系 | 第22-23页 |
1.5.1 细胞周期和细胞凋亡之间相互偶联 | 第22页 |
1.5.2 细胞周期与细胞凋亡的连接点 | 第22页 |
1.5.3 DNA损伤与细胞周期和细胞凋亡的关系 | 第22-23页 |
1.6 技术路线 | 第23-24页 |
1.7 实验试剂及仪器 | 第24-26页 |
1.7.1 主要试剂 | 第24页 |
1.7.2 实验仪器 | 第24-25页 |
1.7.3 研究目的及意义 | 第25-26页 |
第二章 鲢细胞周期相关基因全长的克隆及表达分析 | 第26-54页 |
2.1 材料与方法 | 第27-31页 |
2.1.1 实验材料 | 第27页 |
2.1.2 组织中总RNA的提取 | 第27-28页 |
2.1.3 总RNA反转录 | 第28-31页 |
2.2 实验方法 | 第31-34页 |
2.2.1 细胞周期相关基因中间片段扩增 | 第31-32页 |
2.2.2 鲢CyclinA、CyclinB和CyclinE基因全长及CyclinD编码区的扩增 | 第32页 |
2.2.3 PCR产物回收 | 第32-34页 |
2.3 结果与分析 | 第34-51页 |
2.3.1 鲢三个细胞周期蛋白基因的生物信息学分析 | 第34-48页 |
2.3.2 鲢细胞周期相关基因的表达分布 | 第48-49页 |
2.3.3 低氧胁迫下鲢几个细胞周期相关基因的mRNA表达变化分析 | 第49-51页 |
2.4 讨论 | 第51-54页 |
第三章AnnexinV/PI流式细胞分析法和TUNEL法检测低氧诱导下鲢肝、脑细胞凋亡情况 | 第54-64页 |
3.1 材料 | 第55-56页 |
3.1.1 供试动物 | 第55页 |
3.1.2 试剂及仪器 | 第55-56页 |
3.2 方法 | 第56-57页 |
3.2.1 低氧处理 | 第56页 |
3.2.2 单细胞悬液的制备 | 第56页 |
3.2.3 流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡 | 第56页 |
3.2.4 TUNEL法检测细胞凋亡 (王发渭等 2012) | 第56-57页 |
3.3 结果与分析 | 第57-60页 |
3.3.1 Annexin V/PI流式细胞分析法检测低氧胁迫下鲢肝、脑细胞凋亡情况 | 第57-58页 |
3.3.2 TUNEL法检测低氧胁迫下鲢肝、脑细胞凋亡情况 | 第58-60页 |
3.4 讨论 | 第60-64页 |
3.4.1 低氧胁迫下鲢肝细胞凋亡检测结果分析 | 第61页 |
3.4.2 低氧胁迫下鲢脑细胞凋亡检测结果分析 | 第61-62页 |
3.4.3 低氧诱导细胞凋亡的临界值 | 第62页 |
3.4.4 比较分析两种方法检测细胞凋亡的优缺点 | 第62-64页 |
参考文献 | 第64-73页 |
硕士期间发表的主要论文 | 第73-74页 |
附录 | 第74-75页 |
致谢 | 第75页 |