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鲢低氧诱导下细胞周期相关基因的克隆和表达分析及细胞凋亡的检测

摘要第6-8页
Abstract第8-10页
缩略语表第11-12页
第一章 前言第12-26页
    1.1 鲢的生物学特性及育种研究第12-13页
    1.2 细胞周期蛋白第13-17页
    1.3 细胞周期检测点激酶Chk1 和细胞周期分裂素Cdc25A第17-19页
    1.4 细胞凋亡研究第19-22页
        1.4.1 细胞凋亡介绍第19-20页
        1.4.2 低氧应激对细胞凋亡的影响第20-22页
    1.5 细胞周期与细胞凋亡的相互关系第22-23页
        1.5.1 细胞周期和细胞凋亡之间相互偶联第22页
        1.5.2 细胞周期与细胞凋亡的连接点第22页
        1.5.3 DNA损伤与细胞周期和细胞凋亡的关系第22-23页
    1.6 技术路线第23-24页
    1.7 实验试剂及仪器第24-26页
        1.7.1 主要试剂第24页
        1.7.2 实验仪器第24-25页
        1.7.3 研究目的及意义第25-26页
第二章 鲢细胞周期相关基因全长的克隆及表达分析第26-54页
    2.1 材料与方法第27-31页
        2.1.1 实验材料第27页
        2.1.2 组织中总RNA的提取第27-28页
        2.1.3 总RNA反转录第28-31页
    2.2 实验方法第31-34页
        2.2.1 细胞周期相关基因中间片段扩增第31-32页
        2.2.2 鲢CyclinA、CyclinB和CyclinE基因全长及CyclinD编码区的扩增第32页
        2.2.3 PCR产物回收第32-34页
    2.3 结果与分析第34-51页
        2.3.1 鲢三个细胞周期蛋白基因的生物信息学分析第34-48页
        2.3.2 鲢细胞周期相关基因的表达分布第48-49页
        2.3.3 低氧胁迫下鲢几个细胞周期相关基因的mRNA表达变化分析第49-51页
    2.4 讨论第51-54页
第三章AnnexinV/PI流式细胞分析法和TUNEL法检测低氧诱导下鲢肝、脑细胞凋亡情况第54-64页
    3.1 材料第55-56页
        3.1.1 供试动物第55页
        3.1.2 试剂及仪器第55-56页
    3.2 方法第56-57页
        3.2.1 低氧处理第56页
        3.2.2 单细胞悬液的制备第56页
        3.2.3 流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡第56页
        3.2.4 TUNEL法检测细胞凋亡 (王发渭等 2012)第56-57页
    3.3 结果与分析第57-60页
        3.3.1 Annexin V/PI流式细胞分析法检测低氧胁迫下鲢肝、脑细胞凋亡情况第57-58页
        3.3.2 TUNEL法检测低氧胁迫下鲢肝、脑细胞凋亡情况第58-60页
    3.4 讨论第60-64页
        3.4.1 低氧胁迫下鲢肝细胞凋亡检测结果分析第61页
        3.4.2 低氧胁迫下鲢脑细胞凋亡检测结果分析第61-62页
        3.4.3 低氧诱导细胞凋亡的临界值第62页
        3.4.4 比较分析两种方法检测细胞凋亡的优缺点第62-64页
参考文献第64-73页
硕士期间发表的主要论文第73-74页
附录第74-75页
致谢第75页

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