摘要 | 第8-11页 |
ABSTRACT | 第11-14页 |
缩略语表 | 第15-17页 |
1 文献综述 | 第17-32页 |
1.1 奶牛乳腺炎研究进展 | 第17-24页 |
1.1.1 奶牛乳腺炎的危害 | 第17-18页 |
1.1.2 奶牛乳腺炎的病因 | 第18页 |
1.1.3 奶牛乳腺炎的诊断 | 第18-19页 |
1.1.4 奶牛乳腺炎防治进展 | 第19-24页 |
1.2 金黄色葡萄球菌致病机制 | 第24-28页 |
1.2.1 金黄色葡萄球菌生物学特性 | 第24页 |
1.2.2 金黄色葡萄球菌危害及毒力因子 | 第24-25页 |
1.2.3 金黄色葡萄球菌耐药机制 | 第25-28页 |
1.3 NF-κB在炎症和调控细胞凋亡的作用 | 第28-32页 |
1.3.1 NF-κB简介 | 第28-29页 |
1.3.2 NF-κB信号通路的激活 | 第29-30页 |
1.3.3 NF-κB信号通路在炎症中的调控作用 | 第30-31页 |
1.3.4 NF-κB信号通路对细胞凋亡调控 | 第31-32页 |
2 NF-κB在S.aureus诱导MMEC凋亡中的作用 | 第32-52页 |
2.1. 实验材料 | 第32-36页 |
2.1.1 实验所用菌株及实验动物 | 第32页 |
2.1.2 小鼠乳腺上皮细胞 | 第32页 |
2.1.3 乳腺上皮细胞培养完全培养基 | 第32页 |
2.1.4 金黄葡萄球菌培养基 | 第32页 |
2.1.5 实验主要仪器 | 第32-33页 |
2.1.6 实验主要试剂 | 第33-34页 |
2.1.7 主要试剂配方 | 第34-35页 |
2.1.8 荧光定量PCR相关引物 | 第35-36页 |
2.2 试验方法 | 第36-44页 |
2.2.1 金黄色葡萄球菌准备 | 第36页 |
2.2.2 小鼠乳腺上皮细胞的分离培养与鉴定 | 第36-37页 |
2.2.3 金黄葡萄球菌感染乳腺上皮细胞 | 第37页 |
2.2.4 流式细胞术检测乳腺上皮细胞凋亡 | 第37-38页 |
2.2.5 乳腺上皮细胞凋亡细胞形态观察 | 第38页 |
2.2.6 荧光定量PCR检测NF-κB信号通路P65、P50、IκBɑ 转录水平 | 第38-41页 |
2.2.7 Western blot对NF-κB通路蛋白水平的检测 | 第41-43页 |
2.2.8 金黄色葡萄球菌感染乳腺上皮细胞后IL-6、TNF-ɑ 的检测 | 第43-44页 |
2.3 结果 | 第44-52页 |
2.3.1 乳腺上皮细胞的培养 | 第44页 |
2.3.2 乳腺上皮细胞的鉴定 | 第44-45页 |
2.3.3 流式细胞术测定小鼠乳腺上皮细胞凋亡 | 第45-47页 |
2.3.4 乳腺上皮细胞凋亡形态观察 | 第47页 |
2.3.5 Real Time PCR检测NF-κB信号通路相对表达量 | 第47-49页 |
2.3.6 Western blot检测NF-kB通路蛋白 | 第49-50页 |
2.3.7 感染后细胞因子分泌的情况 | 第50-52页 |
3.S.aureus感染小鼠乳腺炎及MMEC凋亡分析 | 第52-62页 |
3.1 实验材料 | 第52页 |
3.1.1 实验动物 | 第52页 |
3.1.2 实验菌株 | 第52页 |
3.1.3 实验试剂及仪器 | 第52页 |
3.1.4 相关溶液配制 | 第52页 |
3.2 试验方法 | 第52-57页 |
3.2.1 动物乳腺炎模型分组 | 第52-53页 |
3.2.2 实验菌株准备 | 第53页 |
3.2.3 S.aureus小鼠乳腺炎模型建立 | 第53页 |
3.2.4 乳腺炎模型的鉴定 | 第53-56页 |
3.2.5 病理组织切片制作 | 第56页 |
3.2.6 Tunel检测小鼠乳腺上皮细胞凋亡 | 第56-57页 |
3.3 结果 | 第57-62页 |
3.3.1 临床症状 | 第57页 |
3.3.2 全血细胞计数结果 | 第57-58页 |
3.3.3 病理剖检 | 第58-59页 |
3.3.4 小鼠乳腺组织S.aureus鉴定和回收 | 第59-60页 |
3.3.5 病理组织切片结果 | 第60-61页 |
3.3.6 Tunel原位检测细胞凋亡 | 第61-62页 |
4 讨论 | 第62-67页 |
4.1 乳腺上皮细胞分离 | 第62页 |
4.2 PDTC浓度选择和作用时间 | 第62页 |
4.3 S.aureus对MMEC凋亡影响 | 第62-63页 |
4.4 MMEC中NF-κB信号通路P65、P50、IκBɑ 变化 | 第63-64页 |
4.5 TNF-α 和IL-6 分泌差异 | 第64-65页 |
4.6 小鼠乳腺炎模型评价 | 第65-67页 |
结论 | 第67-68页 |
硕士期间发表文章 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-79页 |
致谢 | 第79页 |