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棉花LPAAT基因的克隆与遗传转化

摘要第6-7页
Abstract第7-8页
英文缩略表第13-14页
第一章 引言第14-21页
    1.1 植物种子中油脂的合成与积累途径第14-16页
        1.1.1 脂肪酸的前体物质合成第14页
        1.1.2 Kennedy途径第14页
        1.1.3 脂肪酸碳链延伸和脱饱和作用第14-16页
    1.2 植物溶血磷脂酸酰基转移酶(LPAAT)的研究第16-19页
        1.2.1 LPAAT基因的发现及互补实验功能验证第16页
        1.2.2 LPAAT基因在Kennedy途径中的作用第16页
        1.2.3 植物中LPAAT基因的克隆与序列分析第16-18页
        1.2.4 过表达LPAAT基因提高含油量及改变脂肪酸组成第18-19页
    1.3 棉花作为油料作物的研究第19-20页
        1.3.1 棉花的植物学分类与地理分布第19页
        1.3.2 棉子油的研究价值第19-20页
    1.4 油料作物种子脂肪酸合成及脂肪积累模式的研究第20-21页
        1.4.1 花生、大豆等作物种子脂肪酸合成研究第20页
        1.4.2 棉子脂肪酸研究现状第20-21页
第二章 棉花种子发育过程中脂肪及脂肪酸积累模式研究第21-28页
    2.1 材料与方法第21-22页
        2.1.1 供试材料第21-22页
        2.1.2 棉子脂肪及脂肪酸组成含量的测定第22页
        2.1.3 不同材料棉子脂肪及脂肪酸成分间的数据分析第22页
    2.2 结果与分析第22-26页
        2.2.1 棉子发育过程中脂肪的积累规律第22-23页
        2.2.2 徐州142与其突变体间脂肪酸组成及差异第23-24页
        2.2.3 棉子发育过程中脂肪酸的类别分析第24-25页
        2.2.4 棉子发育过程中脂肪酸成分的相关分析第25-26页
    2.3 讨论第26-28页
第三章 二倍体棉花LPAAT基因家族的生物信息学分析第28-38页
    3.1 生物信息学分析方法第28-30页
        3.1.1 雷蒙德氏棉、亚洲棉及其他物种LPAAT基因家族数据的获取第28页
        3.1.2 LPAAT基因家族的成员鉴定第28页
        3.1.3 LPAAT基因结构及染色体定位分析第28页
        3.1.4 系统进化树的构建与蛋白质保守结构域序列比对分析第28-29页
        3.1.5 棉花胚珠不同发育时期的表达分析第29-30页
    3.2 结果第30-36页
        3.2.1 棉花LPAAT基因家族成员鉴定第30页
        3.2.2 棉花LPAAT基因家族序列特征和基序分布第30-31页
        3.2.3 LPAAT基因在二倍体棉花A和D组染色体上的分布第31-32页
        3.2.4 棉花LPAAT的保守基序分布及序列分析第32-33页
        3.2.5 LPAAT基因的系统进化分析第33-34页
        3.2.6 LPAAT基因在陆地棉材料胚珠发育不同时期的表达分析第34-35页
        3.2.7 徐州142及其突变体胚珠不同发育时期脂肪含量变化规律第35-36页
    3.3 讨论第36-38页
第四章 棉花LPAAT基因的克隆及拟南芥转化第38-53页
    4.1 材料第38页
        4.1.1 棉花材料第38页
        4.1.2 工具酶及生化试剂第38页
        4.1.3 实验所需主要仪器及设备第38页
    4.2 方法第38-46页
        4.2.1 棉花RNA的提取第38-39页
        4.2.2 第一链cDNA的合成第39页
        4.2.3 两个棉花GhLPAAT基因cDNA全长PCR扩增第39-40页
        4.2.4 PCR产物回收第40页
        4.2.5 PCR产物的克隆第40-41页
        4.2.6 大肠杆菌感受态细胞转化第41-42页
        4.2.7 重组子蓝、白斑筛选基本原理第42页
        4.2.8 转化子的鉴定第42页
        4.2.9 表达载体的构建第42-43页
        4.2.10 PCR引物的设计与合成第43页
        4.2.11表达载体重组质粒的提取第43页
        4.2.12植物表达载体转化农杆菌第43-44页
        4.2.13 GhLPAAT2.2 和GhLPAAT5基因遗传转化拟南芥第44-45页
        4.2.14转基因拟南芥种子的筛选第45页
        4.2.15转基因拟南芥的分子检测第45-46页
    4.3 结果第46-51页
        4.3.1 电泳检测棉子总RNA的提取质量第46页
        4.3.2 GhLPAAT2.2 和GhLPAAT5基因CDS序列的PCR扩增第46-47页
        4.3.3 GhLPAAT2.2 和GhLPAAT5推导的氨基酸序列分析第47-48页
        4.3.4 蛋白质保守结构域预测及进化树分析第48-50页
        4.3.5 转基因拟南芥阳性植株鉴定第50-51页
    4.4 讨论第51-53页
第五章 全文总结第53-54页
参考文献第54-63页
致谢第63-64页
作者简历第64页

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