摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
英文缩略表 | 第13-14页 |
第一章 引言 | 第14-21页 |
1.1 植物种子中油脂的合成与积累途径 | 第14-16页 |
1.1.1 脂肪酸的前体物质合成 | 第14页 |
1.1.2 Kennedy途径 | 第14页 |
1.1.3 脂肪酸碳链延伸和脱饱和作用 | 第14-16页 |
1.2 植物溶血磷脂酸酰基转移酶(LPAAT)的研究 | 第16-19页 |
1.2.1 LPAAT基因的发现及互补实验功能验证 | 第16页 |
1.2.2 LPAAT基因在Kennedy途径中的作用 | 第16页 |
1.2.3 植物中LPAAT基因的克隆与序列分析 | 第16-18页 |
1.2.4 过表达LPAAT基因提高含油量及改变脂肪酸组成 | 第18-19页 |
1.3 棉花作为油料作物的研究 | 第19-20页 |
1.3.1 棉花的植物学分类与地理分布 | 第19页 |
1.3.2 棉子油的研究价值 | 第19-20页 |
1.4 油料作物种子脂肪酸合成及脂肪积累模式的研究 | 第20-21页 |
1.4.1 花生、大豆等作物种子脂肪酸合成研究 | 第20页 |
1.4.2 棉子脂肪酸研究现状 | 第20-21页 |
第二章 棉花种子发育过程中脂肪及脂肪酸积累模式研究 | 第21-28页 |
2.1 材料与方法 | 第21-22页 |
2.1.1 供试材料 | 第21-22页 |
2.1.2 棉子脂肪及脂肪酸组成含量的测定 | 第22页 |
2.1.3 不同材料棉子脂肪及脂肪酸成分间的数据分析 | 第22页 |
2.2 结果与分析 | 第22-26页 |
2.2.1 棉子发育过程中脂肪的积累规律 | 第22-23页 |
2.2.2 徐州142与其突变体间脂肪酸组成及差异 | 第23-24页 |
2.2.3 棉子发育过程中脂肪酸的类别分析 | 第24-25页 |
2.2.4 棉子发育过程中脂肪酸成分的相关分析 | 第25-26页 |
2.3 讨论 | 第26-28页 |
第三章 二倍体棉花LPAAT基因家族的生物信息学分析 | 第28-38页 |
3.1 生物信息学分析方法 | 第28-30页 |
3.1.1 雷蒙德氏棉、亚洲棉及其他物种LPAAT基因家族数据的获取 | 第28页 |
3.1.2 LPAAT基因家族的成员鉴定 | 第28页 |
3.1.3 LPAAT基因结构及染色体定位分析 | 第28页 |
3.1.4 系统进化树的构建与蛋白质保守结构域序列比对分析 | 第28-29页 |
3.1.5 棉花胚珠不同发育时期的表达分析 | 第29-30页 |
3.2 结果 | 第30-36页 |
3.2.1 棉花LPAAT基因家族成员鉴定 | 第30页 |
3.2.2 棉花LPAAT基因家族序列特征和基序分布 | 第30-31页 |
3.2.3 LPAAT基因在二倍体棉花A和D组染色体上的分布 | 第31-32页 |
3.2.4 棉花LPAAT的保守基序分布及序列分析 | 第32-33页 |
3.2.5 LPAAT基因的系统进化分析 | 第33-34页 |
3.2.6 LPAAT基因在陆地棉材料胚珠发育不同时期的表达分析 | 第34-35页 |
3.2.7 徐州142及其突变体胚珠不同发育时期脂肪含量变化规律 | 第35-36页 |
3.3 讨论 | 第36-38页 |
第四章 棉花LPAAT基因的克隆及拟南芥转化 | 第38-53页 |
4.1 材料 | 第38页 |
4.1.1 棉花材料 | 第38页 |
4.1.2 工具酶及生化试剂 | 第38页 |
4.1.3 实验所需主要仪器及设备 | 第38页 |
4.2 方法 | 第38-46页 |
4.2.1 棉花RNA的提取 | 第38-39页 |
4.2.2 第一链cDNA的合成 | 第39页 |
4.2.3 两个棉花GhLPAAT基因cDNA全长PCR扩增 | 第39-40页 |
4.2.4 PCR产物回收 | 第40页 |
4.2.5 PCR产物的克隆 | 第40-41页 |
4.2.6 大肠杆菌感受态细胞转化 | 第41-42页 |
4.2.7 重组子蓝、白斑筛选基本原理 | 第42页 |
4.2.8 转化子的鉴定 | 第42页 |
4.2.9 表达载体的构建 | 第42-43页 |
4.2.10 PCR引物的设计与合成 | 第43页 |
4.2.11表达载体重组质粒的提取 | 第43页 |
4.2.12植物表达载体转化农杆菌 | 第43-44页 |
4.2.13 GhLPAAT2.2 和GhLPAAT5基因遗传转化拟南芥 | 第44-45页 |
4.2.14转基因拟南芥种子的筛选 | 第45页 |
4.2.15转基因拟南芥的分子检测 | 第45-46页 |
4.3 结果 | 第46-51页 |
4.3.1 电泳检测棉子总RNA的提取质量 | 第46页 |
4.3.2 GhLPAAT2.2 和GhLPAAT5基因CDS序列的PCR扩增 | 第46-47页 |
4.3.3 GhLPAAT2.2 和GhLPAAT5推导的氨基酸序列分析 | 第47-48页 |
4.3.4 蛋白质保守结构域预测及进化树分析 | 第48-50页 |
4.3.5 转基因拟南芥阳性植株鉴定 | 第50-51页 |
4.4 讨论 | 第51-53页 |
第五章 全文总结 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
作者简历 | 第64页 |