| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 引言 | 第15-19页 |
| 0.1 硒与硒蛋白 | 第15-16页 |
| 0.1.1 硒 | 第15页 |
| 0.1.2 硒蛋白和硒蛋白K | 第15-16页 |
| 0.2 糖尿病与胰岛素的释放 | 第16-17页 |
| 0.2.1 糖尿病 | 第16页 |
| 0.2.2 胰岛素的释放 | 第16-17页 |
| 0.3 硒蛋白与糖尿病之间的关系及研究进展 | 第17-18页 |
| 0.4 研究目的和意义 | 第18-19页 |
| 第1章 小鼠硒蛋白mSelK表达量与微量元素硒和葡萄糖浓度的的关系 | 第19-37页 |
| 1.1 实验方案 | 第19页 |
| 1.2 实验材料 | 第19-21页 |
| 1.2.1 细胞 | 第19页 |
| 1.2.2 培养基和试剂 | 第19-21页 |
| 1.2.3 实验仪器 | 第21页 |
| 1.3 实验方法 | 第21-32页 |
| 1.3.1 细胞的培养 | 第21-22页 |
| 1.3.2 MTT法检测亚硒酸钠处理后的细胞活力 | 第22页 |
| 1.3.3 亚硒酸钠处理后MIN6细胞培养液中胰岛素含量 | 第22-23页 |
| 1.3.4 实时定量PCR验证mSelK在亚硒酸钠处理后mRNA水平的变化 | 第23-25页 |
| 1.3.5 Western Blot验证亚硒酸钠处理后硒蛋白mSelK表达量的变化 | 第25-30页 |
| 1.3.6 不同浓度葡萄糖处理后硒蛋白mSelK表达量的变化 | 第30-32页 |
| 1.4 实验结果 | 第32-35页 |
| 1.4.1 亚硒酸钠的处理对MIN6细胞活力的影响 | 第32页 |
| 1.4.2 亚硒酸钠处理后MIN6细胞培养液中胰岛素含量 | 第32-33页 |
| 1.4.3 实时定量PCR验证亚硒酸钠处理后mSelK mRNA水平的变化 | 第33-34页 |
| 1.4.4 亚硒酸钠处理后细胞内硒蛋白mSelK表达量升高的验证 | 第34-35页 |
| 1.4.5 葡萄糖溶液处理后细胞内硒蛋白mSelK表达量的变化 | 第35页 |
| 1.5 分析与讨论 | 第35-36页 |
| 1.6 小结 | 第36-37页 |
| 第2章 硒蛋白mSelK敲减和过表达对胰岛细胞中胰岛素分泌量的影响 | 第37-48页 |
| 2.1 实验方法 | 第37页 |
| 2.2 实验材料 | 第37-39页 |
| 2.2.1 细胞 | 第37页 |
| 2.2.2 慢病毒载体和腺病毒载体 | 第37-38页 |
| 2.2.3 培养基和试剂 | 第38-39页 |
| 2.2.4 实验仪器 | 第39页 |
| 2.3 实验方法 | 第39-42页 |
| 2.3.1 细胞的培养 | 第39页 |
| 2.3.2 小鼠硒蛋白mSelK基因敲减慢病毒载体和过表达腺病毒载体的构建及扩增 | 第39-40页 |
| 2.3.3 MTT法检测慢病毒载体和腺病毒载体侵染后的MIN6细胞活力 | 第40-41页 |
| 2.3.4 Western Blot验证病毒液在MIN6细胞中敲减和过表达效果 | 第41页 |
| 2.3.5 检测病毒液侵染后MIN6细胞培养液中胰岛素含量 | 第41-42页 |
| 2.4 实验结果 | 第42-46页 |
| 2.4.1 慢病毒侵染对MIN6细胞活力的影响 | 第42-43页 |
| 2.4.2 Western Blot验证慢病毒载体在MIN6细胞中的敲减效果 | 第43页 |
| 2.4.3 敲减慢病毒载体侵染后MIN6细胞培养液中胰岛素含量的变化 | 第43-44页 |
| 2.4.4 过表达腺病毒载体侵染对MIN6细胞活力的影响 | 第44-45页 |
| 2.4.5 Western Blot验证过表达腺病毒载体在MIN6细胞中的表达效果 | 第45页 |
| 2.4.6 过表达腺病毒载体侵染后MIN6细胞培养液中胰岛素含量的变化 | 第45-46页 |
| 2.5 分析与讨论 | 第46-47页 |
| 2.6 小结 | 第47-48页 |
| 第3章 硒蛋白mSelK敲减及过表达对胰岛β细胞MIN6中游离钙离子水平的影响 | 第48-53页 |
| 3.1 实验方法 | 第48页 |
| 3.2 实验材料 | 第48-49页 |
| 3.2.1 细胞 | 第48页 |
| 3.2.2 慢病毒载体和腺病毒载体 | 第48-49页 |
| 3.2.3 培养基和试剂 | 第49页 |
| 3.2.4 实验仪器 | 第49页 |
| 3.3 实验方法 | 第49-50页 |
| 3.3.1 细胞的培养 | 第49-50页 |
| 3.3.2 病毒液处理MIN6细胞 | 第50页 |
| 3.3.3 病毒液的侵染对MIN6细胞胞浆中游离钙离子浓度的影响 | 第50页 |
| 3.4 实验结果 | 第50-52页 |
| 3.4.1 敲减慢病毒载体侵染对MIN6细胞浆中游离Ca~(2+)浓度的影响 | 第50-51页 |
| 3.4.2 过表达腺病毒载体侵染对MIN6细胞浆游离Ca~(2+)浓度的影响 | 第51-52页 |
| 3.5 分析与讨论 | 第52页 |
| 3.6 小结 | 第52-53页 |
| 第4章 硒蛋白mSelK对MIN6细胞中IP3受体表达水平的影响 | 第53-63页 |
| 4.1 实验材料 | 第53页 |
| 4.2 实验材料 | 第53-55页 |
| 4.2.1 细胞 | 第53页 |
| 4.2.2 慢病毒载体和腺病毒载体 | 第53-54页 |
| 4.2.3 培养基和试剂 | 第54-55页 |
| 4.2.4 实验仪器 | 第55页 |
| 4.3 实验方法 | 第55-58页 |
| 4.3.1 细胞的培养与病毒液侵染 | 第55页 |
| 4.3.2 实时定量PCR法验证细胞内IP3受体的mRNA水平的变化 | 第55-57页 |
| 4.3.3 Western Blot验证MIN6细胞内IP3受体的表达水平 | 第57-58页 |
| 4.4 实验结果 | 第58-61页 |
| 4.4.1 敲减慢病毒载体侵染对MIN6细胞内IP3受体m RNA水平的影响 | 第58-59页 |
| 4.4.2 过表达腺病毒侵染对MIN6细胞内IP3受体的mRNA水平的影响 | 第59-60页 |
| 4.4.3 Western Blot验证MIN6细胞内IP3受体的表达水平 | 第60-61页 |
| 4.5 分析与讨论 | 第61页 |
| 4.6 小结 | 第61-63页 |
| 结论与展望 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-70页 |
| 攻读学位期间发表学术论文及参加科研情况 | 第70-71页 |
