中文摘要 | 第4-8页 |
Abstract | 第8-12页 |
缩略语 | 第18-20页 |
前言 | 第20-23页 |
研究现状、成果 | 第20-21页 |
研究目的、方法 | 第21-23页 |
一、高浓度碘对FRTL细胞氧化损伤的影响 | 第23-64页 |
实验一 高浓度碘与SOD调节 | 第23-51页 |
1.1 对象和方法 | 第23-39页 |
1.1.1 FRTL细胞培养 | 第23-26页 |
1.1.2 主要溶液的配制 | 第26-29页 |
1.1.3 实验分组 | 第29页 |
1.1.4 MTT法筛选SOD药物浓度 | 第29页 |
1.1.5 MTT法检测细胞活力 | 第29-30页 |
1.1.6 LDH漏出率检测 | 第30-31页 |
1.1.7 线粒体超氧化物生成检测 | 第31-32页 |
1.1.8 免疫细胞学荧光染色 | 第32页 |
1.1.9 免疫细胞学荧光定量分析 | 第32-33页 |
1.1.10 Western blot检测蛋白表达 | 第33-36页 |
1.1.11 ELISA试剂盒检测活化型半胱天冬酶-3 和活化型半胱天冬酶-9 | 第36-38页 |
1.1.12 TUNEL 试剂盒检测细胞凋亡 | 第38-39页 |
1.1.13 统计方法 | 第39页 |
1.2 结果 | 第39-46页 |
1.2.1 MTT法筛选SOD药物浓度结果 | 第39页 |
1.2.2 MTT法检测细胞活力结果 | 第39-40页 |
1.2.3 LDH漏出率检测结果 | 第40-41页 |
1.2.4 线粒体超氧化物生成检测结果 | 第41页 |
1.2.5 免疫细胞学荧光染色结果 | 第41-42页 |
1.2.6 免疫细胞学荧光定量分析结果 | 第42-43页 |
1.2.7 Western blot检测蛋白表达结果 | 第43-44页 |
1.2.8 ELISA试剂盒检测活化型半胱天冬酶-3 和活化型半胱天冬酶-9 结果 | 第44-45页 |
1.2.9 TUNEL试剂盒检测细胞凋亡结果 | 第45-46页 |
1.3 讨论 | 第46-50页 |
1.3.1 氧化损伤及抗氧化防御介绍 | 第46-47页 |
1.3.2 细胞凋亡途径 | 第47-48页 |
1.3.3 100μMKI处理 2h引起FRTL细胞氧化损伤 | 第48-49页 |
1.3.4 2m MDETC处理 2h加重 100 μM KI引起的FRTL细胞氧化损伤 | 第49页 |
1.3.5 1000 unit/mlSOD处理 2h减轻 100 μM KI引起的FRTL细胞氧化损伤 | 第49-50页 |
1.4 小结 | 第50-51页 |
实验二 呼吸链复合体Ⅰ或Ⅲ抑制剂对高浓度碘引起的FRTL细胞氧化损伤的影响 | 第51-64页 |
2.1 对象和方法 | 第51-52页 |
2.1.1 主要试剂和仪器 | 第51页 |
2.1.2 主要溶液的配制 | 第51页 |
2.1.3 实验分组 | 第51-52页 |
2.1.4 MTT法筛选Rotenone和Antimycin A药物浓度 | 第52页 |
2.1.5 MTT 法检测细胞活力同第一部分。 | 第52页 |
2.1.6 LDH 漏出率检测同第一部分 | 第52页 |
2.1.7 线粒体超氧化物生成检测同第一部分 | 第52页 |
2.1.8 免疫细胞学荧光染色同第一部分 | 第52页 |
2.1.9 免疫细胞学荧光定量分析同第一部分 | 第52页 |
2.1.10 Western blot 检测蛋白表达同第一部分 | 第52页 |
2.1.11 ELISA试剂盒检测cleaved caspase-3 和cleaved caspase-9 | 第52页 |
2.1.12 TUNEL试剂盒检测细胞凋亡 | 第52页 |
2.1.13 统计方法 | 第52页 |
2.2 结果 | 第52-60页 |
2.2.1 MTT法筛选Rotenone和Antimycin A药物浓度结果 | 第52-53页 |
2.2.2 MTT法检测细胞活力结果 | 第53-54页 |
2.2.3 LDH漏出率检测结果 | 第54-55页 |
2.2.4 线粒体超氧化物生成检测结果 | 第55页 |
2.2.5 免疫细胞学荧光染色结果 | 第55-56页 |
2.2.6 免疫细胞学荧光定量分析结果 | 第56-57页 |
2.2.7 Western blot检测蛋白表达结果 | 第57-58页 |
2.2.8 ELISA 试剂盒检测活化型半胱天冬酶-3(cleaved caspase 3)和活化型半胱天冬酶-9(cleaved caspase 9)结果 | 第58-59页 |
2.2.9 TUNEL试剂盒检测细胞凋亡结果 | 第59-60页 |
2.3 讨论 | 第60-62页 |
2.3.1 线粒体呼吸链及其作用 | 第60-61页 |
2.3.2 线粒体呼吸链复合体Ⅰ抑制剂及其对碘过量引起的FRTL细胞氧化损伤的影响 | 第61-62页 |
2.3.3 线粒体呼吸链复合体Ⅲ抑制剂及其对碘过量引起的FRTL细胞氧化损伤的影响 | 第62页 |
2.4 小结 | 第62-64页 |
二、高碘对MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠脾细胞氧化损伤的影响 | 第64-83页 |
实验一 短期高碘对MT-Ⅰ/ⅡKO小鼠脾细胞氧化损伤的影响 | 第64-75页 |
1.1 对象和方法 | 第64-67页 |
1.1.1 实验动物及短期高碘模型的建立 | 第64-65页 |
1.1.2 主要试剂和仪器 | 第65页 |
1.1.3 主要溶液的配制 | 第65页 |
1.1.4 尿碘水平测定 | 第65页 |
1.1.5 脾脏脏体比及体重 | 第65页 |
1.1.6 脾细胞悬液的制备 | 第65-66页 |
1.1.7 MTT法检测细胞活力 | 第66页 |
1.1.8 LDH漏出率检测 | 第66页 |
1.1.9 线粒体超氧化物生成检测 | 第66页 |
1.1.10 Western blot检测蛋白表达 | 第66-67页 |
1.1.11统计方法 | 第67页 |
1.2 结果 | 第67-72页 |
1.2.1 尿碘水平测定结果 | 第67页 |
1.2.2 体重及脾脏脏体比结果 | 第67-69页 |
1.2.3 MTT法检测细胞活力结果 | 第69-70页 |
1.2.4 LDH漏出率检测结果 | 第70页 |
1.2.5 线粒体超氧化物生成检测结果 | 第70-71页 |
1.2.6 Western blot检测蛋白表达结果 | 第71-72页 |
1.3 讨论 | 第72-74页 |
1.3.1 碘过量的定义 | 第72页 |
1.3.2 金属硫蛋白(Metallothionein,MT) | 第72-73页 |
1.3.3 短期碘过量可引起WT和MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠脾细胞氧化损伤 | 第73-74页 |
1.3.4 MT-Ⅰ/Ⅱ在短期碘过量引起的脾细胞氧化损伤中具有一定抗氧化作用 | 第74页 |
1.4 小结 | 第74-75页 |
实验二 不同浓度碘对MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠脾细胞氧化损伤的影响 | 第75-83页 |
2.1 对象和方法 | 第75-77页 |
2.1.1 实验动物 | 第75页 |
2.1.2 主要试剂和仪器 | 第75页 |
2.1.3 主要溶液的配制 | 第75-76页 |
2.1.4 脾细胞悬液的制备 | 第76页 |
2.1.5 实验分组 | 第76页 |
2.1.6 MTT法检测细胞活力 | 第76页 |
2.1.7 LDH漏出率检测 | 第76页 |
2.1.8 线粒体超氧化物生成检测 | 第76页 |
2.1.9 Western blot检测蛋白表达 | 第76-77页 |
2.1.10统计方法 | 第77页 |
2.2 结果 | 第77-80页 |
2.2.1 MTT法检测细胞活力结果 | 第77-78页 |
2.2.2 LDH漏出率检测结果 | 第78-79页 |
2.2.3 线粒体超氧化物生成检测结果 | 第79-80页 |
2.2.4 Western blot检测蛋白表达结果 | 第80页 |
2.3 讨论 | 第80-82页 |
2.3.1 高浓度碘引起MT-Ⅰ/ⅡKO与WT小鼠脾细胞氧化损伤 | 第80-81页 |
2.3.2 金属硫蛋白在高浓度碘引起MTⅠ/Ⅱ KO与WT小鼠脾细胞氧化损伤中起保护作用 | 第81-82页 |
2.4 小结 | 第82-83页 |
结论 | 第83-85页 |
参考文献 | 第85-97页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第97-98页 |
综述 碘过量引起甲状腺疾病的相关机制 | 第98-109页 |
综述参考文献 | 第104-109页 |
致谢 | 第109页 |