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高碘对FRTL细胞及MT-Ⅰ/ⅡKO小鼠脾细胞氧化损伤的影响

中文摘要第4-8页
Abstract第8-12页
缩略语第18-20页
前言第20-23页
    研究现状、成果第20-21页
    研究目的、方法第21-23页
一、高浓度碘对FRTL细胞氧化损伤的影响第23-64页
    实验一 高浓度碘与SOD调节第23-51页
        1.1 对象和方法第23-39页
            1.1.1 FRTL细胞培养第23-26页
            1.1.2 主要溶液的配制第26-29页
            1.1.3 实验分组第29页
            1.1.4 MTT法筛选SOD药物浓度第29页
            1.1.5 MTT法检测细胞活力第29-30页
            1.1.6 LDH漏出率检测第30-31页
            1.1.7 线粒体超氧化物生成检测第31-32页
            1.1.8 免疫细胞学荧光染色第32页
            1.1.9 免疫细胞学荧光定量分析第32-33页
            1.1.10 Western blot检测蛋白表达第33-36页
            1.1.11 ELISA试剂盒检测活化型半胱天冬酶-3 和活化型半胱天冬酶-9第36-38页
            1.1.12 TUNEL 试剂盒检测细胞凋亡第38-39页
            1.1.13 统计方法第39页
        1.2 结果第39-46页
            1.2.1 MTT法筛选SOD药物浓度结果第39页
            1.2.2 MTT法检测细胞活力结果第39-40页
            1.2.3 LDH漏出率检测结果第40-41页
            1.2.4 线粒体超氧化物生成检测结果第41页
            1.2.5 免疫细胞学荧光染色结果第41-42页
            1.2.6 免疫细胞学荧光定量分析结果第42-43页
            1.2.7 Western blot检测蛋白表达结果第43-44页
            1.2.8 ELISA试剂盒检测活化型半胱天冬酶-3 和活化型半胱天冬酶-9 结果第44-45页
            1.2.9 TUNEL试剂盒检测细胞凋亡结果第45-46页
        1.3 讨论第46-50页
            1.3.1 氧化损伤及抗氧化防御介绍第46-47页
            1.3.2 细胞凋亡途径第47-48页
            1.3.3 100μMKI处理 2h引起FRTL细胞氧化损伤第48-49页
            1.3.4 2m MDETC处理 2h加重 100 μM KI引起的FRTL细胞氧化损伤第49页
            1.3.5 1000 unit/mlSOD处理 2h减轻 100 μM KI引起的FRTL细胞氧化损伤第49-50页
        1.4 小结第50-51页
    实验二 呼吸链复合体Ⅰ或Ⅲ抑制剂对高浓度碘引起的FRTL细胞氧化损伤的影响第51-64页
        2.1 对象和方法第51-52页
            2.1.1 主要试剂和仪器第51页
            2.1.2 主要溶液的配制第51页
            2.1.3 实验分组第51-52页
            2.1.4 MTT法筛选Rotenone和Antimycin A药物浓度第52页
            2.1.5 MTT 法检测细胞活力同第一部分。第52页
            2.1.6 LDH 漏出率检测同第一部分第52页
            2.1.7 线粒体超氧化物生成检测同第一部分第52页
            2.1.8 免疫细胞学荧光染色同第一部分第52页
            2.1.9 免疫细胞学荧光定量分析同第一部分第52页
            2.1.10 Western blot 检测蛋白表达同第一部分第52页
            2.1.11 ELISA试剂盒检测cleaved caspase-3 和cleaved caspase-9第52页
            2.1.12 TUNEL试剂盒检测细胞凋亡第52页
            2.1.13 统计方法第52页
        2.2 结果第52-60页
            2.2.1 MTT法筛选Rotenone和Antimycin A药物浓度结果第52-53页
            2.2.2 MTT法检测细胞活力结果第53-54页
            2.2.3 LDH漏出率检测结果第54-55页
            2.2.4 线粒体超氧化物生成检测结果第55页
            2.2.5 免疫细胞学荧光染色结果第55-56页
            2.2.6 免疫细胞学荧光定量分析结果第56-57页
            2.2.7 Western blot检测蛋白表达结果第57-58页
            2.2.8 ELISA 试剂盒检测活化型半胱天冬酶-3(cleaved caspase 3)和活化型半胱天冬酶-9(cleaved caspase 9)结果第58-59页
            2.2.9 TUNEL试剂盒检测细胞凋亡结果第59-60页
        2.3 讨论第60-62页
            2.3.1 线粒体呼吸链及其作用第60-61页
            2.3.2 线粒体呼吸链复合体Ⅰ抑制剂及其对碘过量引起的FRTL细胞氧化损伤的影响第61-62页
            2.3.3 线粒体呼吸链复合体Ⅲ抑制剂及其对碘过量引起的FRTL细胞氧化损伤的影响第62页
        2.4 小结第62-64页
二、高碘对MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠脾细胞氧化损伤的影响第64-83页
    实验一 短期高碘对MT-Ⅰ/ⅡKO小鼠脾细胞氧化损伤的影响第64-75页
        1.1 对象和方法第64-67页
            1.1.1 实验动物及短期高碘模型的建立第64-65页
            1.1.2 主要试剂和仪器第65页
            1.1.3 主要溶液的配制第65页
            1.1.4 尿碘水平测定第65页
            1.1.5 脾脏脏体比及体重第65页
            1.1.6 脾细胞悬液的制备第65-66页
            1.1.7 MTT法检测细胞活力第66页
            1.1.8 LDH漏出率检测第66页
            1.1.9 线粒体超氧化物生成检测第66页
            1.1.10 Western blot检测蛋白表达第66-67页
            1.1.11统计方法第67页
        1.2 结果第67-72页
            1.2.1 尿碘水平测定结果第67页
            1.2.2 体重及脾脏脏体比结果第67-69页
            1.2.3 MTT法检测细胞活力结果第69-70页
            1.2.4 LDH漏出率检测结果第70页
            1.2.5 线粒体超氧化物生成检测结果第70-71页
            1.2.6 Western blot检测蛋白表达结果第71-72页
        1.3 讨论第72-74页
            1.3.1 碘过量的定义第72页
            1.3.2 金属硫蛋白(Metallothionein,MT)第72-73页
            1.3.3 短期碘过量可引起WT和MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠脾细胞氧化损伤第73-74页
            1.3.4 MT-Ⅰ/Ⅱ在短期碘过量引起的脾细胞氧化损伤中具有一定抗氧化作用第74页
        1.4 小结第74-75页
    实验二 不同浓度碘对MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠脾细胞氧化损伤的影响第75-83页
        2.1 对象和方法第75-77页
            2.1.1 实验动物第75页
            2.1.2 主要试剂和仪器第75页
            2.1.3 主要溶液的配制第75-76页
            2.1.4 脾细胞悬液的制备第76页
            2.1.5 实验分组第76页
            2.1.6 MTT法检测细胞活力第76页
            2.1.7 LDH漏出率检测第76页
            2.1.8 线粒体超氧化物生成检测第76页
            2.1.9 Western blot检测蛋白表达第76-77页
            2.1.10统计方法第77页
        2.2 结果第77-80页
            2.2.1 MTT法检测细胞活力结果第77-78页
            2.2.2 LDH漏出率检测结果第78-79页
            2.2.3 线粒体超氧化物生成检测结果第79-80页
            2.2.4 Western blot检测蛋白表达结果第80页
        2.3 讨论第80-82页
            2.3.1 高浓度碘引起MT-Ⅰ/ⅡKO与WT小鼠脾细胞氧化损伤第80-81页
            2.3.2 金属硫蛋白在高浓度碘引起MTⅠ/Ⅱ KO与WT小鼠脾细胞氧化损伤中起保护作用第81-82页
        2.4 小结第82-83页
结论第83-85页
参考文献第85-97页
发表论文和参加科研情况说明第97-98页
综述 碘过量引起甲状腺疾病的相关机制第98-109页
    综述参考文献第104-109页
致谢第109页

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