摘要 | 第2-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
前言 | 第13-17页 |
第一部分 ERLOTINIB通过ROS介导JNK通路诱导NSCLC细胞凋亡的机制研究 | 第17-44页 |
材料和方法 | 第17-24页 |
1 仪器与试剂 | 第17-19页 |
1.1 A549的细胞培养 | 第17页 |
1.2 药品及主要试剂 | 第17-18页 |
1.3 主要仪器 | 第18页 |
1.4 配制试剂 | 第18-19页 |
2 标本的选择与处理 | 第19-23页 |
2.1 MTT法检测ERL的有效作用浓度 | 第19页 |
2.2 Hoechst染色进行检测A549细胞凋亡形态学变化 | 第19-20页 |
2.3 DCFH-DA荧光探针检测细胞内ROS水平 | 第20页 |
2.4 线粒体膜势能的检测(MMP) | 第20页 |
2.5 Annexin V/PI双标记流式细胞术分析ERL对细胞凋亡和细胞周期阻滞的影响 | 第20-21页 |
2.6 细胞蛋白提取及定量 | 第21页 |
2.7 Western Blot | 第21-23页 |
3 统计学分析 | 第23-24页 |
结果 | 第24-37页 |
1 ERL对A549细胞的有效作用浓度 | 第24页 |
2 ERL对A549细胞的凋亡影响(HOECHST33342染色) | 第24-25页 |
3 ERL对肺癌A549细胞内ROS水平的影响 | 第25-26页 |
4 ERL对A549细胞线粒体膜电位(MMP)的影响 | 第26-27页 |
5 ERL对A549细胞凋亡和细胞周期阻滞的影响 | 第27-29页 |
6 ERL对A549细胞中P-JNK活化的影响 | 第29-31页 |
7 ERL对A549细胞中P-EGFR抑制的影响 | 第31-32页 |
8 ERL对A549细胞中凋亡相关蛋白表达的影响 | 第32-37页 |
讨论 | 第37-42页 |
小结 | 第42-44页 |
第二部分 肺腺癌患者CD4+CD25+ TREG各亚群、BREG的检测及靶向治疗的影响 | 第44-57页 |
材料和方法 | 第44-48页 |
1 仪器与试剂 | 第44-45页 |
1.1 主要试剂 | 第44页 |
1.2 主要试剂的配制 | 第44-45页 |
1.3 主要仪器 | 第45页 |
1.4 研究对象 | 第45页 |
2 标本选择与处理 | 第45-47页 |
2.1 标本采集 | 第45页 |
2.2 进行外周血单个核细胞(PBM)的分离 | 第45-46页 |
2.3 流式细胞仪检测 | 第46-47页 |
3 统计学分析 | 第47-48页 |
结果 | 第48-50页 |
1 肺癌组患者与健康对照组中TREG亚群比例比较 | 第48页 |
2 肺癌患者外周血中BREG的表达水平 | 第48-49页 |
3 靶向治疗疗效分析 | 第49-50页 |
讨论 | 第50-56页 |
小结 | 第56-57页 |
结论 | 第57-58页 |
问题与展望 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-65页 |
综述 | 第65-91页 |
综述参考文献 | 第80-91页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第91-92页 |
缩略词表(附录) | 第92-93页 |
致谢 | 第93-94页 |