摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
文献综述 | 第12-28页 |
第一章 猪繁殖与呼吸综合征病毒的研究概况 | 第12-21页 |
1.1 PRRSV的病原学及理化学特性 | 第13-15页 |
1.1.1 病毒粒子 | 第13页 |
1.1.2 PRRSV的遗传多样性 | 第13页 |
1.1.3 PRRSV的基因组 | 第13-15页 |
1.2 PRRS免疫学研究进展 | 第15-16页 |
1.3 PRRSV疫苗研究概况 | 第16-21页 |
1.3.1 PRRSV的减毒活疫苗作为候选疫苗的研究 | 第16-17页 |
1.3.2 重组载体表达PRRSV的病毒蛋白作为候选疫苗 | 第17-19页 |
1.3.3 候选的DNA疫苗 | 第19-21页 |
第二章 重组腺病毒载体疫苗 | 第21-24页 |
2.1 腺病毒的一般特征 | 第21-22页 |
2.2 动物重组腺病毒的分类 | 第22-23页 |
2.3 腺病毒载体在防治PRRSV中的一些应用 | 第23-24页 |
第三章 乳腺生物反应器 | 第24-28页 |
3.1 乳腺的特征 | 第24-25页 |
3.2 乳腺生物反应器的研究 | 第25-28页 |
实验研究 | 第28-57页 |
第四章 表达PRRSV GP5-M蛋白腺病毒的包装 | 第28-45页 |
4.1 实验材料 | 第29-32页 |
4.1.1 主要耗材、试剂 | 第29-30页 |
4.1.2 主要实验仪器 | 第30-31页 |
4.1.3 试验中所用试剂配制 | 第31页 |
4.1.4 载体和菌株 | 第31-32页 |
4.2 实验方法 | 第32-40页 |
4.2.1 腺病毒载体的选择 | 第32页 |
4.2.2 PRRSV GP5和M基因CDS区的克隆 | 第32-35页 |
4.2.3 重组腺病毒载体pBHG-SignalP-His-GP5-M的构建与鉴定 | 第35-39页 |
4.2.4 重组腺病毒的包装与滴度的测定 | 第39-40页 |
4.3 结果 | 第40-43页 |
4.3.1 猪蓝耳病毒衣壳蛋白GP5和M基因CDS区的克隆与鉴定 | 第40页 |
4.3.2 重组腺病毒载体pBHG-SignalP-His-GP5-M的构建与鉴定 | 第40-41页 |
4.3.3 重组腺病毒的包装与滴度的测定 | 第41-43页 |
4.4 讨论 | 第43-44页 |
4.5 小结 | 第44-45页 |
第五章 GP5-M蛋白在山羊乳腺中的表达研究 | 第45-57页 |
5.1 实验材料 | 第45-47页 |
5.1.1 主要耗材、试剂 | 第45-46页 |
5.1.2 主要仪器 | 第46页 |
5.1.3 试验中所用试剂配制 | 第46-47页 |
5.1.4 实验动物 | 第47页 |
5.2 试验方法 | 第47-50页 |
5.2.1 乳腺上皮细胞的分离培养 | 第47页 |
5.2.2 测定重组腺病毒 | 第47-48页 |
5.2.3 目的基因GP5-M蛋白在乳腺上皮细胞中的表达检测 | 第48页 |
5.2.4 Western blotting检测GP5-M蛋白在乳腺上皮细胞和细胞上清中的表达 . 375.2.5 腺病毒rHAd-SignalP-His-GP5-M的大量扩增、收集和纯化 | 第48-49页 |
5.2.5 腺病毒 r HAd-Signal P-His-GP5-M 的大量扩增、收集和纯化 | 第49-50页 |
5.2.6 His-GP5-M蛋白在奶山羊乳腺中的表达 | 第50页 |
5.3 结果 | 第50-55页 |
5.3.1 乳腺上皮细胞的分离纯化和鉴定 | 第50页 |
5.3.2 测定重组腺病毒 | 第50-52页 |
5.3.3 目的基因GP5-M在乳腺上皮细胞中的表达检测 | 第52页 |
5.3.4 Western blotting检测乳腺上皮细胞和细胞上清中GP5-M蛋白的表达 | 第52-53页 |
5.3.5 腺病毒的大量扩增、纯化与滴度测定 | 第53-54页 |
5.3.6 His-GP5-M蛋白在奶山羊乳腺中的表达 | 第54-55页 |
5.4 讨论 | 第55-56页 |
5.5 小结 | 第56-57页 |
全文结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
作者简介 | 第71页 |