| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-23页 |
| 1.1 黄酮类化合物研究进展 | 第11-14页 |
| 1.1.1 黄酮的种类、结构、分布 | 第11页 |
| 1.1.2 黄酮的生物学功能 | 第11-12页 |
| 1.1.3 黄酮生物合成途径 | 第12-14页 |
| 1.2 苦荞黄酮类化合物研究进展 | 第14-16页 |
| 1.2.1 苦荞简介 | 第14页 |
| 1.2.2 苦荞中的黄酮类化合物 | 第14-15页 |
| 1.2.3 苦荞黄酮的代谢研究 | 第15-16页 |
| 1.3 苯丙氨酸解氨酶研究进展 | 第16-19页 |
| 1.3.1 PAL基因结构特点 | 第16-17页 |
| 1.3.2 PAL蛋白结构特点 | 第17页 |
| 1.3.3 PAL酶学性质 | 第17-18页 |
| 1.3.4 PAL表达调控研究 | 第18-19页 |
| 1.4 花青素还原酶研究进展 | 第19-22页 |
| 1.4.1 ANR基因结构特点 | 第19-20页 |
| 1.4.2 ANR蛋白结构特点 | 第20页 |
| 1.4.3 ANR酶学性质 | 第20-21页 |
| 1.4.4 ANR表达调控研究 | 第21页 |
| 1.4.5 ANR功能研究 | 第21-22页 |
| 1.5 研究目的和意义 | 第22-23页 |
| 第二章 苦荞FtPAL和FtANR基因的克隆及表达分析 | 第23-36页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第23页 |
| 2.1.2 菌株与试剂 | 第23页 |
| 2.1.3 实验仪器设备 | 第23页 |
| 2.1.4 溶液配制 | 第23-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-27页 |
| 2.2.1 苦荞种子RNA的提取 | 第24页 |
| 2.2.2 RNA反转录 | 第24-25页 |
| 2.2.3 苦荞FtPAL和FtANR基因的克隆 | 第25页 |
| 2.2.4 苦荞FtPAL和FtANR原核表达载体的构建 | 第25-26页 |
| 2.2.5 生物信息学分析 | 第26页 |
| 2.2.6 FtPAL和Ft ANR基因的表达分析 | 第26-27页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第27-34页 |
| 2.3.1 RNA结果分析 | 第27页 |
| 2.3.2 苦荞PAL基因的克隆及生物信息学分析 | 第27-31页 |
| 2.3.3 苦荞ANR基因的克隆及生物信息学分析 | 第31-33页 |
| 2.3.4 FtPAL和FtANR基因的表达分析 | 第33-34页 |
| 2.4 讨论 | 第34-36页 |
| 第三章 重组蛋白的诱导表达、纯化以及多克隆抗体制备 | 第36-44页 |
| 3.1 实验试剂与材料 | 第36-37页 |
| 3.1.1 菌种 | 第36页 |
| 3.1.2 材料与试剂 | 第36页 |
| 3.1.3 实验设备仪器 | 第36页 |
| 3.1.4 溶液配制 | 第36-37页 |
| 3.2 实验方法 | 第37-40页 |
| 3.2.1 重组质粒的转化及诱导表达 | 第37页 |
| 3.2.2 重组蛋白SDS-PAGE检测 | 第37-38页 |
| 3.2.3 重组蛋白可溶性分析 | 第38页 |
| 3.2.4 重组蛋白的纯化 | 第38-39页 |
| 3.2.5 重组蛋白含量的检测 | 第39页 |
| 3.2.6 多克隆抗体的制备 | 第39-40页 |
| 3.2.7 重组蛋白的Western blotting检测 | 第40页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第40-42页 |
| 3.3.1 重组蛋白FtPAL和FtANR诱导表达 | 第40-41页 |
| 3.3.2 重组蛋白FtPAL和FtANR可溶性分析 | 第41页 |
| 3.3.3 重组蛋白FtPAL和FtANR的纯化 | 第41-42页 |
| 3.3.4 Western blotting检测制备的多克隆抗体 | 第42页 |
| 3.4 讨论 | 第42-44页 |
| 第四章 FtPAL酶学性质分析 | 第44-47页 |
| 4.1 材料与试剂 | 第44页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第44页 |
| 4.1.2 实验仪器设备 | 第44页 |
| 4.2 实验方法 | 第44-45页 |
| 4.2.1 FtPAL酶活性检测 | 第44页 |
| 4.2.2 温度对FtPAL活性的影响 | 第44页 |
| 4.2.3 pH对Ft PAL活性的影响 | 第44页 |
| 4.2.4 FtPAL动力学参数Km和Vmax测定 | 第44-45页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第45-46页 |
| 4.3.1 温度对FtPAL活性影响 | 第45页 |
| 4.3.2 pH对Ft PAL活性影响 | 第45页 |
| 4.3.3 FtPAL动力学参数Km和Vmax的测定 | 第45-46页 |
| 4.4 讨论 | 第46-47页 |
| 第五章 结论与展望 | 第47-49页 |
| 5.1 结论 | 第47页 |
| 5.2 展望 | 第47-49页 |
| 附录 | 第49-55页 |
| 参考文献 | 第55-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 作者简介 | 第64页 |
