| 中文摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一章 绪论 | 第13-47页 |
| 1.1 聚合酶链式反应 | 第13-22页 |
| 1.1.1 常规PCR | 第13-17页 |
| 1.1.2 实时荧光定量PCR | 第17-19页 |
| 1.1.3 数字PCR | 第19-22页 |
| 1.2 多重PCR | 第22-27页 |
| 1.2.1 单体系多重PCR | 第23-25页 |
| 1.2.2 多体系多重PCR | 第25-27页 |
| 1.3 微型化PCR系统 | 第27-36页 |
| 1.3.1 基于动态连续流的微流控PCR系统 | 第28-31页 |
| 1.3.2 基于静态阵列式分布的微型化PCR系统 | 第31-36页 |
| 1.4 恒温核酸扩增技术 | 第36-46页 |
| 1.4.1 环介导恒温扩增技术 | 第37-39页 |
| 1.4.2 核酸序列依赖的扩增技术 | 第39-40页 |
| 1.4.3 滚环扩增技术 | 第40-44页 |
| 1.4.4 解旋酶依赖的恒温扩增技术 | 第44-45页 |
| 1.4.5 链置换扩增技术 | 第45-46页 |
| 1.5 本课题的主要研究内容 | 第46-47页 |
| 第二章 基于亲疏水模式的微液滴阵列芯片的制备 | 第47-57页 |
| 2.1 引言 | 第47-48页 |
| 2.2 仪器与试剂 | 第48-49页 |
| 2.2.1 实验仪器 | 第48页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第48-49页 |
| 2.3 实验方法 | 第49-51页 |
| 2.3.1 芯片基底的疏水处理 | 第49-50页 |
| 2.3.2 扩增引物的点制 | 第50页 |
| 2.3.3 待测样品上样 | 第50-51页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第51-55页 |
| 2.4.1 实验原理 | 第51页 |
| 2.4.2 芯片基底的选择 | 第51-52页 |
| 2.4.3 芯片基底的疏水处理 | 第52-53页 |
| 2.4.4 芯片上亲水样点的均一性 | 第53-54页 |
| 2.4.5 待测样品上样的均一性 | 第54-55页 |
| 2.5 小结 | 第55-57页 |
| 第三章 核酸扩增及检测一体化系统 | 第57-63页 |
| 3.1 扩增检测一体化系统整体结构 | 第57-58页 |
| 3.2 扩增检测一体化系统硬件构造 | 第58-59页 |
| 3.3 扩增检测一体化系统控制软件 | 第59-61页 |
| 3.4 芯片表面的温度校正 | 第61-62页 |
| 3.5 小结 | 第62-63页 |
| 第四章 基于微液滴阵列的多重PCR系统及性能评价 | 第63-89页 |
| 4.1 引言 | 第63-64页 |
| 4.2 试剂与仪器 | 第64-65页 |
| 4.3 核酸样品及序列 | 第65-66页 |
| 4.4 实验方法 | 第66-68页 |
| 4.4.1 常规PCR反应体系 | 第66-67页 |
| 4.4.2 基于微液滴阵列的PCR反应 | 第67页 |
| 4.4.3 基于微液滴阵列的PCR结果的分析 | 第67页 |
| 4.4.4 电泳 | 第67-68页 |
| 4.4.5 核酸模板的质量数与分子数之间的换算 | 第68页 |
| 4.5 结果与讨论 | 第68-86页 |
| 4.5.1 基于微液滴阵列的多重PCR的原理 | 第68-69页 |
| 4.5.2 引物的释放时间对PCR产生的影响 | 第69-71页 |
| 4.5.3 微液滴阵列PCR与常规PCR的比较 | 第71-73页 |
| 4.5.4 微液滴阵列PCR的均一性 | 第73-75页 |
| 4.5.5 微液滴阵列多重PCR的动态范围和灵敏度 | 第75-76页 |
| 4.5.6 微液滴阵列芯片进行数字PCR的可行性 | 第76-79页 |
| 4.5.7 微液滴阵列多重PCR样点之间的交叉污染 | 第79-81页 |
| 4.5.8 微液滴阵列芯片上三重PCR检测 | 第81-82页 |
| 4.5.9 更高通量的微液滴阵列PCR芯片的探索 | 第82-85页 |
| 4.5.10 利用微液滴阵列PCR对HPV样品进行特异性分型检测 | 第85-86页 |
| 4.6 小结 | 第86-89页 |
| 第五章 基于恒温扩增的多重核酸检测系统 | 第89-101页 |
| 5.1 试剂与材料 | 第90-91页 |
| 5.1.1 实验试剂及仪器 | 第90页 |
| 5.1.2 核酸序列 | 第90-91页 |
| 5.2 实验方法 | 第91-93页 |
| 5.2.1 环状模板的制备 | 第91-92页 |
| 5.2.2 微液滴阵列芯片上的滚环扩增 | 第92页 |
| 5.2.3 常规PCR管中的滚环扩增 | 第92页 |
| 5.2.4 数据处理 | 第92-93页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第93-99页 |
| 5.3.1 基于滚环扩增的微液滴阵列芯片的原理 | 第93-94页 |
| 5.3.2 微液滴阵列芯片上与PCR管中的滚环扩增比较 | 第94-95页 |
| 5.3.3 微液滴阵列芯片上扩增灵敏度的结果以及线性关系 | 第95-96页 |
| 5.3.4 微液滴阵列芯片上的三重滚环扩增检测 | 第96-98页 |
| 5.3.5 SNP检测的可行性验证 | 第98-99页 |
| 5.4 小结 | 第99-101页 |
| 第六章 总结与展望 | 第101-103页 |
| 参考文献 | 第103-115页 |
| 缩略词汇表 | 第115-117页 |
| 附录 | 第117-119页 |
| 致谢 | 第119页 |
