| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 中英文缩略词 | 第10-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-22页 |
| 1.1 三萜类化合物及其生物合成途径研究现状 | 第12-15页 |
| 1.1.1 三萜类化合物的结构特征及分类 | 第12页 |
| 1.1.2 三萜类化合物的生物合成途径 | 第12-14页 |
| 1.1.3 三萜化合物生物合成途径中的关键酶 | 第14-15页 |
| 1.2 青钱柳细胞培养生产次生代谢物研究现状 | 第15-16页 |
| 1.2.1 植物细胞培养生产次生代谢产物 | 第15-16页 |
| 1.2.2 青钱柳植物细胞培养生产次生代谢物 | 第16页 |
| 1.3 真菌诱导子在植物次生代谢调控中的应用及作用机制 | 第16-18页 |
| 1.3.1 真菌诱导子促进植物次生代谢物合成的应用 | 第16-17页 |
| 1.3.2 真菌诱导子调控植物次生代谢的作用机制 | 第17-18页 |
| 1.4 转录组测序技术应用现状 | 第18-19页 |
| 1.4.1 转录组测序技术 | 第18页 |
| 1.4.2 转录组测序在植物次生代谢研究中的应用 | 第18-19页 |
| 1.5 课题来源及研究目的、意义 | 第19-20页 |
| 1.5.1 课题来源 | 第19页 |
| 1.5.2 研究目的及意义 | 第19-20页 |
| 1.6 研究内容及创新之处 | 第20-22页 |
| 1.6.1 研究技术路线 | 第20-21页 |
| 1.6.2 主要研究内容 | 第21页 |
| 1.6.3 论文创新之处 | 第21-22页 |
| 2 ANE作用下青钱柳悬浮培养细胞氧化应激相关酶活性变化规律 | 第22-30页 |
| 2.1 主要试剂和仪器设备 | 第22-23页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第22页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第22-23页 |
| 2.2 材料与方法 | 第23-24页 |
| 2.2.1 试验材料 | 第23页 |
| 2.2.2 黑曲霉诱导子的制备和添加 | 第23页 |
| 2.2.3 青钱柳悬浮培养细胞三萜类化合物的提取和测定 | 第23页 |
| 2.2.4 细胞氧化应激相关酶活性的测定及分析 | 第23-24页 |
| 2.3 结果与分析 | 第24-28页 |
| 2.3.1 ANE诱导下青钱柳悬浮培养细胞中三萜含量的变化 | 第24-25页 |
| 2.3.2 ANE诱导对胞内SOD酶活性的影响 | 第25页 |
| 2.3.3 ANE诱导对胞内POD酶活性的影响 | 第25-26页 |
| 2.3.4 ANE诱导对胞内CAT酶活性的影响 | 第26-27页 |
| 2.3.5 ANE诱导对胞内PAL酶活性的影响 | 第27页 |
| 2.3.6 ANE诱导对胞内PLC酶活性的影响 | 第27-28页 |
| 2.4 讨论 | 第28-29页 |
| 2.5 小结 | 第29-30页 |
| 3 ANE诱导作用下青钱柳悬浮培养细胞转录组测序分析 | 第30-45页 |
| 3.1 试验试剂与仪器 | 第30页 |
| 3.2 试验方法 | 第30-33页 |
| 3.2.1 样品制备 | 第30页 |
| 3.2.2 青钱柳悬浮培养细胞总RNA提取及质量检测 | 第30页 |
| 3.2.3 青钱柳悬浮培养细胞cDNA文库构建及转录组测序 | 第30-31页 |
| 3.2.4 原始测序数据质量剪切及统计 | 第31-32页 |
| 3.2.5 转录组数据从头组装 | 第32页 |
| 3.2.6 Unigenes功能注释 | 第32-33页 |
| 3.2.7 SSR分析 | 第33页 |
| 3.3 结果与分析 | 第33-43页 |
| 3.3.1 青钱柳悬浮培养细胞总RNA质量检测结果 | 第33页 |
| 3.3.2 测序数据统计 | 第33-34页 |
| 3.3.3 转录本从头组装分析 | 第34-35页 |
| 3.3.4 Unigenes功能注释 | 第35-36页 |
| 3.3.5 Unigenes的NR注释 | 第36-37页 |
| 3.3.6 Unigenes的COG注释 | 第37-38页 |
| 3.3.7 Unigenes的GO注释 | 第38-39页 |
| 3.3.8 Unigenes的KEGG注释 | 第39-41页 |
| 3.3.9 Unigenes的SSR分析 | 第41-43页 |
| 3.4 讨论 | 第43-44页 |
| 3.5 小结 | 第44-45页 |
| 4 ANE诱导作用下青钱柳悬浮培养细胞的差异表达基因分析 | 第45-61页 |
| 4.1 主要试剂与仪器设备 | 第45页 |
| 4.2 材料与方法 | 第45-47页 |
| 4.2.1 试验材料 | 第45页 |
| 4.2.2 Unigenes表达量分析 | 第45页 |
| 4.2.3 差异表达基因分析 | 第45页 |
| 4.2.4 荧光定量PCR验证差异表达基因 | 第45-47页 |
| 4.3 结果与分析 | 第47-57页 |
| 4.3.1 Unigenes的基因表达量分析 | 第47-48页 |
| 4.3.2 Unigenes的差异表达分析 | 第48-49页 |
| 4.3.3 ANE作用下细胞抗氧化系统相关基因差异表达分析 | 第49-50页 |
| 4.3.4 ANE作用下细胞JA信号转导途径相关基因差异表达分析 | 第50-51页 |
| 4.3.5 ANE作用下细胞调控次生代谢途径转录因子差异表达分析 | 第51-53页 |
| 4.3.6 ANE作用下细胞三萜代谢途径中相关酶基因差异表达分析 | 第53-56页 |
| 4.3.7 三萜代谢相关差异表达基因RT-qPCR检测 | 第56-57页 |
| 4.4 讨论 | 第57-60页 |
| 4.5 小结 | 第60-61页 |
| 5 青钱柳鲨烯合成酶（CpSS）全长基因克隆及序列分析 | 第61-74页 |
| 5.1 材料与方法 | 第61-62页 |
| 5.1.1 试验材料 | 第61页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第61页 |
| 5.1.3 仪器与设备 | 第61-62页 |
| 5.2 方法 | 第62-65页 |
| 5.2.1 青钱柳悬浮培养细胞总RNA提取及质量检测 | 第62页 |
| 5.2.2 CpSS基因cDNA第一链的合成 | 第62-63页 |
| 5.2.3 CpSS基因 5'和 3'端片段的克隆 | 第63-65页 |
| 5.2.4 CpSS全长基因的克隆 | 第65页 |
| 5.2.5 CpSS全长基因的生物信息学分析方法 | 第65页 |
| 5.3 结果与分析 | 第65-72页 |
| 5.3.1 青钱柳悬浮培养细胞总RNA质量检测结果 | 第65-66页 |
| 5.3.2 CpSS全长基因的克隆 | 第66-67页 |
| 5.3.3 CpSS基因的核苷酸序列多重比对分析 | 第67-69页 |
| 5.3.4 CpSS蛋白的基本性质分析 | 第69页 |
| 5.3.5 CpSS蛋白亲/疏水性、信号肽、亚细胞定位、跨膜结构域预测 | 第69-70页 |
| 5.3.6 CpSS蛋白的二、三级结构预测 | 第70-71页 |
| 5.3.7 系统进化树的构建 | 第71-72页 |
| 5.4 讨论 | 第72-73页 |
| 5.5 小结 | 第73-74页 |
| 6 结论与展望 | 第74-76页 |
| 6.1 结论 | 第74-75页 |
| 6.2 展望 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-84页 |
| 在校期间发表论文情况 | 第84-85页 |
| 致谢 | 第85页 |
