中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
文献综述 | 第11-15页 |
1 草莓镶脉病毒研究现状 | 第11-13页 |
2 SVBV MP蛋白运动机制研究 | 第13-15页 |
引言 | 第15-16页 |
材料与方法 | 第16-26页 |
1 供试材料 | 第16-17页 |
1.1 病样来源 | 第16页 |
1.2 植物材料 | 第16页 |
1.3 菌种 | 第16页 |
1.4 载体及质粒 | 第16页 |
1.5 实验试剂 | 第16-17页 |
2 试验方法 | 第17-26页 |
2.1 感病草莓叶片总RNA提取 | 第17页 |
2.2 cDNA第一条链的合成 | 第17页 |
2.3 大肠杆菌(Escherchia coli)DH5 α感受态细胞的制备 | 第17页 |
2.4 目的片段的PCR扩增 | 第17页 |
2.5 PCR产物回收 | 第17-18页 |
2.6 PCR产物连接克隆载体 | 第18页 |
2.7 连接产物转化大肠杆菌(Escherchia coli)DH5 α | 第18页 |
2.8 阳性克隆的PCR鉴定 | 第18页 |
2.9 质粒提取 | 第18页 |
2.10 载体构建 | 第18-22页 |
2.11 PCR扩增体系 | 第22-23页 |
2.12 PCR胶回收产物加A体系 | 第23页 |
2.13 限制性内切酶酶切体系 | 第23-24页 |
2.14 农杆菌EHA105转化实验 | 第24页 |
2.15 激光共聚焦实验 | 第24页 |
2.16 农杆菌浸润实验 | 第24页 |
2.17 双分子荧光互补实验(BIFC) | 第24页 |
2.18 酵母双杂交实验(Y2H) | 第24-26页 |
结果与分析 | 第26-40页 |
1 SVBV MP基因克隆与载体构建 | 第26-28页 |
1.1 SVBV MP基因的克隆 | 第26页 |
1.2 亚细胞定位载体的构建 | 第26页 |
1.3 运动缺陷型载体的构建 | 第26-27页 |
1.4 酵母双杂实验载体的构建 | 第27页 |
1.5 双分子荧光互补实验载体的构建 | 第27-28页 |
2 SVBV MP蛋白功能域预测 | 第28-29页 |
3 SVBV MP蛋白运动与互作相关功能域鉴定 | 第29-33页 |
3.1 SVBV MP蛋白运动相关功能域鉴定 | 第29-31页 |
3.2 SVBV MP蛋白与P4互作相关功能域鉴定 | 第31-33页 |
4 SVBV MP蛋白亚细胞定位 | 第33-34页 |
5 SVBV MP蛋白与微管共定位 | 第34-36页 |
6 SVBV MP蛋白与微丝共定位 | 第36-37页 |
7 SVBV MP蛋白与内质网共定位 | 第37-38页 |
8 SVBV编码蛋白间的互作 | 第38-40页 |
8.1 SVBV P2与P3蛋白互作 | 第38页 |
8.2 SVBV P3与P4蛋白互作 | 第38-40页 |
讨论 | 第40-43页 |
总结 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
作者简介 | 第52页 |