| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第一章 耐热蛋白及蛋白标签的研究进展 | 第10-19页 |
| ·耐热蛋白的研究 | 第10-11页 |
| ·耐热蛋白 | 第10-11页 |
| ·Taq DNA聚合酶 | 第11-14页 |
| ·Taq DNA聚合酶的发现 | 第11-12页 |
| ·Taq DNA聚合酶的特性 | 第12-14页 |
| ·Taq DNA聚合酶基因 | 第14页 |
| ·蛋白标签 | 第14-17页 |
| ·蛋白标签的发现 | 第15-17页 |
| ·耐热蛋白标签及热纯化 | 第17-19页 |
| 第二章 Taq DNA聚合酶耐热域的克隆及分析 | 第19-50页 |
| ·引言 | 第19-20页 |
| ·实验材料 | 第20-22页 |
| ·细菌菌株及常用试剂 | 第20页 |
| ·质粒及基因 | 第20页 |
| ·载体及重组载体图谱 | 第20-22页 |
| ·方法 | 第22-38页 |
| ·耐热蛋白基因表达载体的构建 | 第22-24页 |
| ·蛋白表达的大肠杆菌宿主 | 第24-25页 |
| ·重组质粒的热激转化 | 第25页 |
| ·重组质粒的提取与保存 | 第25-26页 |
| ·目的蛋白的诱导表达 | 第26-27页 |
| ·蛋白浓度测定(BCA方法) | 第27-28页 |
| ·蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 | 第28-30页 |
| ·Taq DNA聚合酶基因的获得 | 第30页 |
| ·亚克隆Taq DNA基因 | 第30-31页 |
| ·Taq DNA聚合酶基因亚克隆8个片段的诱导表达 | 第31页 |
| ·亚克隆重组载体蛋白的抽提与纯化 | 第31页 |
| ·亚克隆蛋白片段的聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第31-32页 |
| ·H标签荷载非耐热蛋白的耐热性检测 | 第32页 |
| ·6xHis蛋白的纯化 | 第32-33页 |
| ·纯化蛋白的浓缩和透析 | 第33-34页 |
| ·蛋白的ELISA检测 | 第34-35页 |
| ·蛋白的WESTERN BLOT检测 | 第35-37页 |
| ·蛋白二级结构的圆二色谱检测 | 第37页 |
| ·小鼠免疫实验 | 第37-38页 |
| ·结果 | 第38-47页 |
| ·PCR产物琼脂糖凝胶电泳检测 | 第38页 |
| ·重组质粒琼脂糖凝胶电泳检测 | 第38-39页 |
| ·标签H嵌合蛋白及32A的SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的检测 | 第39-40页 |
| ·标签H嵌合蛋白及32A的WESTERN BLOT检测 | 第40-41页 |
| ·标签H嵌合蛋白及32A的ELISA检测 | 第41-44页 |
| ·标签H嵌合蛋白及32A的圆二色谱(CD)检测 | 第44-46页 |
| ·纯化蛋白免疫小鼠的效价测定 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 附录A 英文缩略词 | 第56-57页 |
| 附录B 主要试剂(盒)及生产厂家 | 第57-59页 |
| 附录C 主要仪器设备及生产厂家 | 第59-60页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
