| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 绪论 | 第9-13页 |
| 1.1 研究背景和意义 | 第9-11页 |
| 1.2 国内外研究进展 | 第11-13页 |
| 第2章 棉花氮高效关键基因的鉴定 | 第13-32页 |
| 2.1 引言 | 第13页 |
| 2.2 材料与方法 | 第13-17页 |
| 2.2.1 材料 | 第13页 |
| 2.2.2 蛋白质提取 | 第13-15页 |
| 2.2.3 蛋白质定量 | 第15页 |
| 2.2.4 SDS电泳 | 第15页 |
| 2.2.5 蛋白质酶解 | 第15页 |
| 2.2.6 iTRAQ标记 | 第15-16页 |
| 2.2.7 SCX分离 | 第16页 |
| 2.2.8 基于Triple TOF 5600的LC-ESI-MS MS分析 | 第16-17页 |
| 2.3 结果与分析 | 第17-28页 |
| 2.3.1 蛋白浓度测定 | 第17页 |
| 2.3.2 电泳结果 | 第17-18页 |
| 2.3.3 质谱数据分析及数据库的选择 | 第18页 |
| 2.3.4 Mascot搜索和蛋白质定量 | 第18-21页 |
| 2.3.5 鉴定质量评估 | 第21页 |
| 2.3.6 差异表达蛋白的生物信息学分析 | 第21-28页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第28-32页 |
| 第3章 棉花氮高效关键基因的实时荧光定量PCR | 第32-40页 |
| 3.1 引言 | 第32页 |
| 3.2 材料与方法 | 第32-36页 |
| 3.2.1 材料 | 第32页 |
| 3.2.2 棉花总RNA的提取和DNA酶解 | 第32-33页 |
| 3.2.3 actin基因的合成 | 第33页 |
| 3.2.4 内参的选择 | 第33-34页 |
| 3.2.5 qRT-PCR | 第34-36页 |
| 3.3 结果与分析 | 第36-39页 |
| 3.3.1 总RNA的完整性检测和纯度测定 | 第36页 |
| 3.3.2 actin的扩增结果 | 第36-37页 |
| 3.3.3 内参的选择 | 第37页 |
| 3.3.4 定量的准确性 | 第37页 |
| 3.3.5 qRT-PCR | 第37-39页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第39-40页 |
| 第4章 棉花氮高效关键基因的克隆 | 第40-45页 |
| 4.1 引言 | 第40页 |
| 4.2 材料与方法 | 第40-42页 |
| 4.2.1 材料 | 第40页 |
| 4.2.2 全长片段的扩增 | 第40-41页 |
| 4.2.3 连接反应 | 第41页 |
| 4.2.4 连接产物的转化 | 第41页 |
| 4.2.5 酶切验证 | 第41-42页 |
| 4.3 结果与分析 | 第42-43页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第43-45页 |
| 第5章 总结和展望 | 第45-47页 |
| 5.1 总结 | 第45-46页 |
| 5.2 展望 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 作者简介 | 第55页 |