中文摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-21页 |
·天然产物简介 | 第13-14页 |
·植物来源天然产物应用简介 | 第13-14页 |
·冬葵子简介 | 第14页 |
·肿瘤的发生发展概况 | 第14-20页 |
·肿瘤发病现状 | 第14-17页 |
·肿瘤发病的分子机理简介 | 第17-20页 |
·冬葵子的抗肿瘤活性 | 第20页 |
·本课题研究的目的和意义 | 第20-21页 |
第二章 冬葵子活性蛋白提取和分离纯化 | 第21-29页 |
·实验材料 | 第21页 |
·实验设备及试剂 | 第21页 |
·细胞株 | 第21页 |
·实验方法 | 第21-24页 |
·粗蛋白提取 | 第21-22页 |
·细胞复苏、冻存和培养 | 第22页 |
·MTT法测定细胞存活 | 第22-23页 |
·粗蛋白纯化 | 第23页 |
·SDS-PAGE凝胶电泳鉴定蛋白 | 第23-24页 |
·MTT法检测纯蛋白活性 | 第24页 |
·统计学分析 | 第24页 |
·实验结果 | 第24-28页 |
·冬葵子粗蛋白的制备和纯化 | 第24-26页 |
·MSP和MSP1的生物活性检测 | 第26-27页 |
·MSP对DLD1和T24细胞存活的影响 | 第27-28页 |
·讨论 | 第28-29页 |
第三章 MSP诱导癌细胞发生细胞周期G1期阻滞 | 第29-33页 |
·实验材料 | 第29页 |
·实验试剂及抗体 | 第29页 |
·细胞株 | 第29页 |
·实验方法 | 第29-31页 |
·FHC、DLD1和T24细胞培养 | 第29-30页 |
·流式细胞仪检测FHC、DLD1和T24细胞周期 | 第30页 |
·DLD1细胞总蛋白提取 | 第30页 |
·Western blotting法检测DLD1细胞周期相关蛋白表达水平 | 第30-31页 |
·统计学分析 | 第31页 |
·实验结果 | 第31-32页 |
·MSP能引起DLD1和T24细胞周期发生G1期阻滞 | 第31-32页 |
·MSP对DLD1细胞周期G1期相关蛋白表达的影响 | 第32页 |
·讨论 | 第32-33页 |
第四章 MSP通过激活凋亡途径诱导肿瘤细胞凋亡 | 第33-39页 |
·实验材料 | 第33-34页 |
·实验试剂及抗体 | 第33页 |
·细胞株 | 第33-34页 |
·实验方法 | 第34-35页 |
·FHC、DLD1和T24细胞培养 | 第34页 |
·流式细胞仪检测FHC、DLD1和T24细胞凋亡 | 第34页 |
·DAPI染色检测FHC、DLD1和T24细胞凋亡 | 第34页 |
·JC-1染色检测FHC、DLD1和T24细胞线粒体膜电位变化 | 第34-35页 |
·Western Blotting检测DLD1细胞内外源性凋亡相关蛋白表达 | 第35页 |
·统计学分析 | 第35页 |
·实验结果 | 第35-38页 |
·MSP能诱导DLD1和T24细胞凋亡 | 第35-36页 |
·MSP对DLD1细胞外源性凋亡相关蛋白表达的影响 | 第36-37页 |
·MSP对DLD1和T24细胞膜电位的影响 | 第37页 |
·MSP对DLD1细胞内源性凋亡相关蛋白表达的影响 | 第37-38页 |
·讨论 | 第38-39页 |
结论 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-45页 |
附录1 英文缩略语表 | 第45-46页 |
附录2 主要试剂配方 | 第46-47页 |
附录3 实验主要仪器设备 | 第47-48页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第48-49页 |
致谢 | 第49-50页 |
个人简况及联系方式 | 第50-51页 |
承诺书 | 第51-52页 |