| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第一章 引言 | 第11-17页 |
| 1.牙鲆 | 第11页 |
| 2. Kisspeptin/Gpr54 系统研究进展 | 第11-16页 |
| ·Kisspeptin/Gpr54 系统的发现 | 第11-13页 |
| ·Kisspeptin/Gpr54 系统的组织分布 | 第13页 |
| ·Kisspeptin/Gpr54 系统可能的信号通路 | 第13-14页 |
| ·Kisspeptin/Gpr54 系统的功能简介 | 第14-16页 |
| 3. 本论文研究的目的与意义 | 第16-17页 |
| 第二章 牙鲆kiss2 及gpr54-2 基因的鉴定及序列分析 | 第17-40页 |
| 1. 实验材料 | 第17-18页 |
| ·实验用鱼 | 第17页 |
| ·实验试剂 | 第17页 |
| ·常用试剂 | 第17-18页 |
| ·主要实验仪器 | 第18页 |
| 2. 实验方法 | 第18-30页 |
| ·总RNA提取与鉴定 | 第18-19页 |
| ·牙鲆kiss2 及gpr54-2 cDNA片段克隆 | 第19-23页 |
| ·RACE (Rapid Amplification cDNA Ends) | 第23-30页 |
| ·kiss2 及gpr54-2 基因小片段、3'-RACE和 5'-RACE序列拼接 | 第30页 |
| ·序列分析 | 第30页 |
| 3. 结果 | 第30-38页 |
| ·RNA质量检测 | 第30页 |
| ·牙鲆kiss2 基因克隆 | 第30-33页 |
| ·牙鲆gpr54-2 基因的克隆 | 第33-38页 |
| 4. 讨论 | 第38-40页 |
| 第三章 kiss2 及gpr54-2 在牙鲆中的组织分布及早期发育中的表达分析 | 第40-54页 |
| 1. 实验材料 | 第40-41页 |
| ·实验用鱼 | 第40页 |
| ·实验试剂 | 第40-41页 |
| ·实验仪器 | 第41页 |
| 2. 实验方法 | 第41-45页 |
| ·总RNA提取与鉴定 | 第41页 |
| ·实时荧光定量PCR检测kiss2 及其受体基因的表达 | 第41-42页 |
| ·数据分析 | 第42页 |
| ·Western-blot检测Gpr54-2 蛋白表达情况 | 第42-44页 |
| ·免疫组化检测Gpr54-2 蛋白组织中定位情况 | 第44-45页 |
| 3. 结果 | 第45-50页 |
| ·牙鲆kiss2 及gpr54-2 基因在成体各组织中的表达 | 第45-47页 |
| ·牙鲆kiss2 及gpr54-2 基因在胚胎、仔鱼不同发育时期的表达情况 | 第47-49页 |
| ·牙鲆Gpr54-2 蛋白的western-blot检测 | 第49-50页 |
| ·牙鲆Gpr54-2 蛋白的免疫组化检测 | 第50页 |
| 4. 讨论 | 第50-54页 |
| ·kiss2 基因在牙鲆中的表达情况 | 第51-52页 |
| ·gpr54-2 及其蛋白在牙鲆中的表达情况 | 第52-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 附录 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
