| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 英文缩略表 | 第13-14页 |
| 文献综述 | 第14-27页 |
| 1 引言 | 第27-28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-41页 |
| ·材料 | 第28-30页 |
| ·载体、细胞、病毒株及实验动物 | 第28页 |
| ·主试剂与试剂盒 | 第28页 |
| ·主要溶液及培养基的配制 | 第28-29页 |
| ·主要仪器 | 第29-30页 |
| ·方法 | 第30-41页 |
| ·NDRV σC蛋白多克隆抗体的制备 | 第30页 |
| ·引物设计与合成 | 第30页 |
| ·σC基因的扩增与表达载体的构建 | 第30页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第30页 |
| ·重组蛋白的纯化及反应原性检测 | 第30页 |
| ·多克隆抗体的制备及其效价测定 | 第30页 |
| ·多克隆抗体IFA检测 | 第30页 |
| ·σC基因重组转移载体的构建 | 第30-34页 |
| ·引物设计及合成 | 第31页 |
| ·σC基因的克隆 | 第31-32页 |
| ·σC基因的PCR产物的回收纯化 | 第32页 |
| ·σC基因片段和pFastBac~(TM)1质粒的双酶切 | 第32页 |
| ·σC基因片段和pFastBac~(TM)1的连接 | 第32-33页 |
| ·转化DH5α感受态细胞 | 第33页 |
| ·克隆质粒的挑选与鉴定 | 第33页 |
| ·重组质粒的提取 | 第33页 |
| ·重组pF-σC质粒的PCR鉴定 | 第33-34页 |
| ·重组pF-σC质粒的序列分析鉴定 | 第34页 |
| ·重组质粒的转座(即重组Bacmid的构建) | 第34-36页 |
| ·DH10Bac感受态制作 | 第34页 |
| ·重组穿梭质粒的制备 | 第34-35页 |
| ·重组Bacmid DNA的提取及鉴定 | 第35-36页 |
| ·重组Bacmid转染sf9昆虫细胞及收获重组杆状病毒 | 第36-38页 |
| ·重组Bacmid转染sf9昆虫细胞 | 第36页 |
| ·扩增P1代病毒原液 | 第36-37页 |
| ·噬斑测定病毒滴度 | 第37-38页 |
| ·σC在sf9昆虫细胞中的表达 | 第38页 |
| ·sf9昆虫细胞表达蛋白的鉴定 | 第38-39页 |
| ·SDS-PAGE蛋白质电泳分析 | 第38页 |
| ·SDS-PAGE蛋白质样品的制备 | 第38页 |
| ·SDS-PAGE | 第38页 |
| ·IFA鉴定 | 第38页 |
| ·Western blot鉴定 | 第38-39页 |
| ·油乳剂疫苗的制备 | 第39页 |
| ·动物免疫 | 第39页 |
| ·重组杆状病毒在小鼠体内诱导的免疫原性评价 | 第39-40页 |
| ·ELISA方法检测抗体水平 | 第39-40页 |
| ·病毒中和抗体检测结果 | 第40页 |
| ·攻毒保护性试验 | 第40-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-48页 |
| ·NDRV 6C蛋白多克隆抗体的制备 | 第41-42页 |
| ·σC基因的克隆与表达载体的构建 | 第41页 |
| ·aC蛋白表达与纯化 | 第41页 |
| ·多克隆抗体制备及其效价检测 | 第41页 |
| ·多克隆抗体的特异性检测 | 第41-42页 |
| ·重组载体鉴定结果 | 第42-43页 |
| ·重组Bacmid的筛选与鉴定 | 第43页 |
| ·σC蛋白在sf9昆虫细胞中的表达 | 第43-46页 |
| ·重组杆状病毒的细胞病变观察 | 第43-44页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE检测 | 第44页 |
| ·表达产物的IFA检测 | 第44页 |
| ·Western-blot检测 | 第44-46页 |
| ·重组杆状病毒在樱桃谷肉鸭体内诱导的免疫原性评价 | 第46-47页 |
| ·ELISA检测结果 | 第46-47页 |
| ·病毒中和抗体检测结果 | 第47页 |
| ·攻毒保护性试验 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-49页 |
| 5 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-58页 |
