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东方粘虫V-ATP酶A亚基突变体TSCA、小麦条锈菌效应蛋白8713的原核表达及结构初步研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-10页
第一章 绪论第10-24页
   ·V-ATP酶研究进展第10-15页
     ·V-ATPse功能和调节背景第10页
     ·V-ATPase的结构和组成第10-13页
     ·V-ATPase A亚基的结构与功能第13-14页
     ·V-ATPase与昆虫防治第14-15页
   ·小麦条锈病与效应蛋白第15-17页
     ·小麦条锈病(wheat stripe rust)和小麦条锈菌第15-16页
     ·小麦条锈菌的生活史和侵染过程第16页
     ·效应蛋白的研究进展第16-17页
   ·包涵体复性的研究第17-22页
     ·包涵体的形成第17-19页
     ·体外复性的基本原理和方法第19-22页
   ·研究的目的与意义第22-24页
第二章 实验材料与试剂第24-28页
   ·菌株和质粒第24页
   ·酶及生化试剂第24-26页
   ·实验仪器第26页
   ·主要试剂的配制第26-28页
第三章V-ATP酶A亚基突变体TSCA原核表达、复性及活性研究第28-46页
   ·实验方法第28-35页
     ·构建原核表达载体第29-33页
     ·融合蛋白的诱导表达第33页
     ·包涵体复性与纯化第33-35页
     ·质谱鉴定蛋白质分子量第35页
   ·实验结果第35-45页
     ·TSCA突变位点的选择及蛋白序列分析第35-36页
     ·点突变表达载体pET-22b(+)-TSCA的构建与鉴定第36-39页
     ·融合蛋白pET-22b(+)-TSCA的表达及鉴定第39-41页
     ·融合蛋白的复性与纯化第41页
     ·蛋白质复性效率第41-42页
     ·东方粘虫中肠V-ATPase A亚基及突变体TSCA、B亚基的质谱鉴定第42-45页
   ·本章小结第45-46页
第四章 小麦条锈病效应蛋白8713的原核表达及结构初步研究第46-58页
   ·实验方法第46-50页
     ·原核表达载体pET-22b(+)-8713的构建第46-48页
     ·融合蛋白pET-22b(+)-8713的表达第48页
     ·目的蛋白质的纯化第48-49页
     ·8713融合蛋白的理化性质及结构初步研究第49-50页
   ·实验结果第50-57页
     ·pET-22b(+)-8713重组质粒的构建第50-52页
     ·pET-22b(+)-8713表达条件的优化第52-53页
     ·目的蛋白的纯化第53-54页
     ·质谱鉴定目的蛋白第54-55页
     ·8713初步结构研究第55-57页
   ·本章小结第57-58页
第五章 总结与展望第58-59页
参考文献第59-65页
致谢第65-66页
作者简介第66页

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