| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-16页 |
| 第一章 前言 | 第16-33页 |
| ·萜类化合物研究进展的综述 | 第16-20页 |
| ·植物的新陈代谢及萜类化合物的来源 | 第16页 |
| ·萜类化合物的结构、分类和分布 | 第16页 |
| ·萜类化合物生物合成途径中的基因家族 | 第16-17页 |
| ·萜类生物合成途径中的化学成分 | 第17页 |
| ·赤霉素生物合成途径的研究情况 | 第17-20页 |
| ·本研究所用实验技术的综述 | 第20-27页 |
| ·RACE技术 | 第20-22页 |
| ·生物信息学分析的研究和主要内容 | 第22-23页 |
| ·RT-PCR研究方法 | 第23-25页 |
| ·人工microRNA载体构建及转基因植物的分析 | 第25-27页 |
| ·本研究的研究对象----丹参的研究概况 | 第27-30页 |
| ·来源 | 第27页 |
| ·植物的形态特征 | 第27-28页 |
| ·丹参的主要有效成分 | 第28-29页 |
| ·丹参中的萜类化学成分 | 第29-30页 |
| ·丹参的药理作用 | 第30页 |
| ·研究中需要解决的科学问题和主要研究内容 | 第30页 |
| ·研究方案 | 第30-32页 |
| ·研究技术路线 | 第32页 |
| ·论文结构 | 第32-33页 |
| 第二章 SmKO基因家族的鉴定、克隆、序列特性分析及组织特异性表达分析 | 第33-50页 |
| ·前言 | 第33页 |
| ·实验材料与仪器设备 | 第33-35页 |
| ·植物材料-丹参野生苗的种植及采样储藏 | 第33页 |
| ·菌株和质粒 | 第33页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第33-34页 |
| ·主要仪器设备 | 第34页 |
| ·引物 | 第34-35页 |
| ·实验方法 | 第35-44页 |
| ·基因家族的数据库搜索及鉴定 | 第35页 |
| ·总RNA的提取、纯度及完整性检测 | 第35-37页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第37-38页 |
| ·RACE-Ready cDNA(5’-& 3’-RACE-Ready cDNA)的准备 | 第38-39页 |
| ·基因家族的5’,3’-RACE及ORF克隆 | 第39页 |
| ·PCR产物的胶回收 | 第39-41页 |
| ·目的片段和PMD18T载体的连接 | 第41页 |
| ·连接产物的转化 | 第41页 |
| ·蓝白斑及阳性菌落的筛选 | 第41-42页 |
| ·质粒提取 | 第42-43页 |
| ·测序 | 第43-44页 |
| ·生物信息学分析 | 第44页 |
| ·组织特异性表达 | 第44页 |
| ·结果和分析 | 第44-48页 |
| ·SmKO 5’、3’RACE扩增,全长cDNA克隆,胶回收及单克隆筛选 | 第44-45页 |
| ·测序结果 | 第45-46页 |
| ·基因家族的序列特性分析 | 第46页 |
| ·KO基因的各个物种系统进化树的分析 | 第46-47页 |
| ·组织特异性表达分析 | 第47-48页 |
| ·小结 | 第48-50页 |
| 第三章 SmKAO基因家族的鉴定、克隆、序列特性分析及组织特异性表达分析 | 第50-55页 |
| ·前言 | 第50页 |
| ·实验材料与仪器设备 | 第50-51页 |
| ·植物材料-丹参野生苗的种植及采样储藏 | 第50页 |
| ·菌株和质粒 | 第50页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第50页 |
| ·主要仪器设备 | 第50-51页 |
| ·引物 | 第51页 |
| ·实验方法 | 第51页 |
| ·结果和分析 | 第51-54页 |
| ·SmKAO_1及SmKAO_2-ORF克隆,胶回收及单克隆筛选 | 第51-52页 |
| ·测序结果 | 第52页 |
| ·基因家族的序列特性分析 | 第52页 |
| ·KAO基因各个物种系统进化树的分析 | 第52-54页 |
| ·小结 | 第54-55页 |
| 第四章 SmGA3ox基因家族的鉴定、克隆、序列特性分析及组织特异性表达分析 | 第55-61页 |
| ·前言 | 第55页 |
| ·实验材料与仪器设备 | 第55-56页 |
| ·植物材料-丹参野生苗的种植及采样储藏 | 第55页 |
| ·菌株和质粒 | 第55页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第55页 |
| ·主要仪器设备 | 第55-56页 |
| ·引物 | 第56页 |
| ·实验方法 | 第56页 |
| ·结果和分析 | 第56-59页 |
| ·SmGA3ox基因ORF克隆,胶回收 | 第56-57页 |
| ·测序结果 | 第57页 |
| ·基因家族的序列特性分析 | 第57页 |
| ·SmGA3ox基因各个物种系统进化树的分析 | 第57-59页 |
| ·小结 | 第59-61页 |
| 第五章 SmGA20ox基因家族的鉴定、克隆、序列特性分析及组织特异性表达分析 | 第61-68页 |
| ·前言 | 第61页 |
| ·实验材料及仪器设备 | 第61-62页 |
| ·实验方法 | 第62页 |
| ·结果和分析 | 第62-66页 |
| ·SmGA20ox基因ORF克隆及胶回收 | 第63页 |
| ·测序结果 | 第63-64页 |
| ·基因家族的序列特性分析 | 第64页 |
| ·5mGA20ox基因的各个物种系统进化树的分析 | 第64-66页 |
| ·组织特异性表达分析 | 第66页 |
| ·小结 | 第66-68页 |
| 第六章 SmGA20X家族的鉴定、克隆、序列特性分析及组织特异性表达分析 | 第68-75页 |
| ·前言 | 第68页 |
| ·实验材料及仪器设备 | 第68-70页 |
| ·引物 | 第68-70页 |
| ·实验方法 | 第70页 |
| ·结果和分析 | 第70-74页 |
| ·SmGA2ox基因ORF克隆,胶回收图谱 | 第70-71页 |
| ·测序结果 | 第71页 |
| ·基因家族的序列特性分析 | 第71页 |
| ·SmGA2ox基因的各个物种系统进化树的分析 | 第71-73页 |
| ·组织特异性表达分析 | 第73-74页 |
| ·小结 | 第74-75页 |
| 第七章 GA_3对赤霉素生物合成中基因家族的响应作用研究 | 第75-81页 |
| ·前言 | 第75页 |
| ·材料与方法 | 第75-76页 |
| ·植物材料-丹参无菌苗的培养 | 第75页 |
| ·实验方法-外源性赤霉素GA_3处理 | 第75-76页 |
| ·试验数据处理及统计分析 | 第76页 |
| ·结果与分析 | 第76-80页 |
| ·外源性赤霉素GA_3对SmCPS和SmKSL的反馈作用 | 第76页 |
| ·外源性赤霉素GA_3对SmKO和SmKAO的反馈作用 | 第76-77页 |
| ·SmGA20ox,SmGA3ox和SmGA2ox对于外源性赤霉素GA3的反馈作用 | 第77-79页 |
| ·SmGA2ox对于外源性赤霉素GA3的反馈作用 | 第79-80页 |
| ·讨论与小结 | 第80-81页 |
| 第八章 SmIDI基因的全长克隆 | 第81-92页 |
| ·前言 | 第81页 |
| ·实验仪器,材料及试剂 | 第81-84页 |
| ·SmIDI-RACE及全长SmIDI的克隆 | 第84-86页 |
| ·实验结果和分析 | 第86-91页 |
| ·小结 | 第91-92页 |
| 第九章 IDI人工MicroRNA载体的构建及遗传转化的研究 | 第92-102页 |
| ·实验仪器及材料 | 第92页 |
| ·实验步骤 | 第92-99页 |
| ·实验结果及分析 | 第99-102页 |
| 第十章 结论与展望 | 第102-104页 |
| ·结论 | 第102页 |
| ·展望 | 第102-104页 |
| 参考文献 | 第104-115页 |
| 个人简历、博士在读期间的学术研究成果 | 第115-116页 |
| 附图 | 第116-141页 |
| 致谢 | 第141页 |
