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辛伐他汀对小鼠脂肪细胞糖代谢的影响及其机制的研究

英文缩略词表第1-6页
中文摘要第6-8页
Abstract第8-11页
第一章 前言第11-13页
第二章 材料和方法第13-31页
   ·材料第13-18页
     ·实验细胞株第13页
     ·主要试剂及来源第13页
     ·相关试剂配制第13-17页
     ·主要仪器设备第17-18页
   ·实验方法第18-21页
     ·3T3-L1细胞株的培养、传代第18页
     ·3T3-L1细胞的诱导分化第18-19页
     ·3T3-L1细胞的冻存(冻存原则:缓慢降温)第19页
     ·3T3-L1细胞的复苏(复苏原则:快速复温)第19页
     ·分化成熟的 3T3-L1细胞的鉴定第19-20页
     ·分化成熟 3T3-L1细胞的分组处理第20-21页
   ·CCK-8 试剂盒检测辛伐他汀对 3T3-L1脂肪细胞活性的影响第21页
     ·3T3-L1脂肪细胞的铺板及处理第21页
     ·CCK-8 试剂的处理及吸光度值(OD值)的测定第21页
   ·葡萄糖氧化酶法测定各处理组的葡萄糖浓度,计算各组葡萄糖消耗量第21-22页
   ·实时荧光定量PCR方法检测辛伐他汀作用下 3T3-L1脂肪细胞GLUT-4 mRNA、PPAR-γ mRNA及IR mRNA的表达水平第22-25页
     ·TRizol法提取 3T3-L1脂肪细胞的总RNA第22-23页
     ·逆转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)第23-24页
     ·Real-Time PCR第24-25页
   ·免疫印迹法(Western blot)检测细胞总蛋白GLUT-4、膜蛋白GLUT-4、P-PI3K及P-Akt蛋白的表达水平第25-28页
     ·细胞总蛋白的提取第25页
     ·蛋白浓度的测定:BCA法测蛋白浓度第25-26页
     ·细胞蛋白样品的制备第26页
     ·Western blot检测蛋白基本步骤第26-28页
   ·流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期,检测细胞膜IR、GLUT-4 蛋白的表达第28-31页
     ·利用流式细胞仪检测细胞周期和凋亡第28-29页
     ·利用流式细胞抗体检测细胞膜表面蛋白的变化第29-31页
第三章 结果第31-38页
   ·3T3-L1前脂肪细胞诱导前、诱导第4天及诱导第9天后的形态第31页
   ·CCK-8 检测药物对细胞活性的影响第31-32页
   ·葡萄糖氧化酶法检测不同药物浓度下葡萄的消耗量第32-33页
   ·Real Time PCR检测 3T3-L1脂肪细胞GLUT-4 mRNA、PPAR-γ mRNA及IR mRNA的表达水平第33-35页
     ·GLUT-4 mRNA表达第33页
     ·PPAR-γ mRNA表达第33-34页
     ·IR mRNA表达第34-35页
   ·Western blot检测P-PI3K,P-Akt,总GLUT-4 及膜GLUT-4 蛋白表达水平第35-36页
   ·流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期及膜IR蛋白及GLUT-4 蛋白表达水平第36-38页
第四章 讨论第38-42页
第五章 结论第42-43页
参考文献第43-45页
致谢第45-46页
综述第46-55页
 综述参考文献第53-55页

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