| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-12页 |
| 一、引言 | 第12-23页 |
| 1. hrp基因及其编码的harpin蛋白 | 第12-16页 |
| ·hrp基因和harpin蛋白 | 第12-13页 |
| ·Harpin蛋白在植物上的功能 | 第13-14页 |
| ·诱导植物抗病 | 第13-14页 |
| ·促进植物生长发育和诱导植物抗虫 | 第14页 |
| ·诱导植株耐旱 | 第14页 |
| ·Harpin激发防卫反应 | 第14-16页 |
| ·过敏性反应(HR) | 第15页 |
| ·氧爆发 | 第15页 |
| ·其他防卫反应 | 第15-16页 |
| ·Harpin蛋白的表达系统 | 第16页 |
| 2. 短短芽孢杆菌及其遗传改良 | 第16-21页 |
| ·短短芽孢杆菌的生物特性 | 第16-17页 |
| ·短短芽孢杆菌的抑菌作用及其机制 | 第17-18页 |
| ·对病原菌的抑制作用 | 第17页 |
| ·短短芽孢杆菌的抑菌作用机制 | 第17-18页 |
| ·短短芽孢杆菌的抗菌物质 | 第18-19页 |
| ·短杆菌肽 | 第18页 |
| ·短杆菌酪肽 | 第18-19页 |
| ·其它抗菌物质 | 第19页 |
| ·短短芽孢杆菌在国内外的研究及其应用 | 第19-20页 |
| ·对植物的促生作用 | 第19页 |
| ·保鲜作用 | 第19页 |
| ·微生物降解 | 第19-20页 |
| ·其他方面 | 第20页 |
| ·短短芽孢杆菌的防病作用 | 第20页 |
| ·短短芽孢杆菌的遗传改良 | 第20-21页 |
| ·短短芽孢杆菌表达系统 | 第20-21页 |
| ·芽孢杆菌的转化方法 | 第21页 |
| 3. 生长素的极性运输抑制剂(TIBA) | 第21-22页 |
| 4. 本研究意义 | 第22-23页 |
| 二、材料与方法 | 第23-34页 |
| 1. 材料 | 第23-24页 |
| ·供试菌株 | 第23页 |
| ·供试菌株材料 | 第23页 |
| ·培养基 | 第23-24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| 2. 方法 | 第24-34页 |
| ·质粒提取 | 第24-25页 |
| ·hpa1_(Xoo)及hpa_(Xm)基因转入HAB-5菌株 | 第25页 |
| ·引物设计与合成 | 第25-26页 |
| ·目的基因的PCR验证 | 第26页 |
| ·切胶回收 | 第26-27页 |
| ·克隆转化及测序 | 第27页 |
| ·HAB-5及其转化子菌株菌落形态和对C7-2菌株的平板拮抗作用测定 | 第27-28页 |
| ·菌株菌落形态观察 | 第27页 |
| ·对芒果炭疽菌C7-2菌株的平板拮抗作用 | 第27-28页 |
| ·粗蛋白的提取方法 | 第28页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第28-29页 |
| ·烟草过敏性反应(HR) | 第29页 |
| ·转化子粗蛋白特性的研究 | 第29-30页 |
| ·转化子粗蛋白热稳定性测定 | 第29页 |
| ·转化子粗蛋白耐酸碱性测定 | 第29页 |
| ·转化子粗蛋白对胰蛋白酶和蛋白酶K稳定性的测定 | 第29页 |
| ·转化子粗蛋白紫外线敏感性测定 | 第29-30页 |
| ·菌悬液和发酵液的配置 | 第30页 |
| ·短短芽孢杆菌HAB-5及其转化子菌株对番茄种子的促生作用测定 | 第30页 |
| ·对番茄种子的促生作用 | 第30页 |
| ·TIBA对抑制番茄种子生长的逆转作用 | 第30页 |
| ·对芒果炭疽离体叶片的拮抗效果 | 第30-31页 |
| ·PCR Southern Blot | 第31-34页 |
| ·目的基因的PCR | 第31页 |
| ·探针制备方法 | 第31页 |
| ·试剂配制 | 第31页 |
| ·洗胶和转膜 | 第31-32页 |
| ·预杂交和杂交 | 第32页 |
| ·洗膜和显色 | 第32-34页 |
| 三、结果与分析 | 第34-57页 |
| 1. 转化子菌株的筛选及PCR验证 | 第34-36页 |
| 2. PCR Southern Blot验证 | 第36-37页 |
| ·目的基因的PCR扩增 | 第36页 |
| ·探针的制备和标记 | 第36-37页 |
| ·PCR Southern Blot | 第37页 |
| 3. 菌落形态对比 | 第37-38页 |
| 4. 转化子对炭疽病菌株C7-2拮抗作用 | 第38-40页 |
| 5. 转化子harpin蛋白的表达 | 第40页 |
| 6. 转化子粗蛋白能激发烟草产生过敏性反应并具有harpin蛋白的特性 | 第40-41页 |
| 7. HAB-5及其代表性转化子菌株菌悬液对番茄种子的促生效果 | 第41-45页 |
| 8. HAB-5及其代表性转化子菌株菌悬液对芒果炭疽离体叶片的拮抗作用 | 第45-48页 |
| 9. HAB-5及其代表性转化子菌株发酵液对番茄种子的促生作用 | 第48-51页 |
| 10. HAB-5及其代表性转化子菌株发酵液对芒果炭疽离体叶片的拮抗效果 | 第51-53页 |
| 11. TIBA对抑制番茄种子生长的逆转作用 | 第53-57页 |
| ·TIBA对HAB-5菌悬液抑制番茄种子生长的逆转作用 | 第53-54页 |
| ·TIBA对HAB-5发酵液抑制番茄种子生长的逆转作用 | 第54-57页 |
| 四、讨论 | 第57-59页 |
| 五、结论 | 第59-60页 |
| 六、创新点 | 第60-61页 |
| 七、参考文献 | 第61-67页 |
| 已发表论文 | 第67页 |
| 课题来源 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
