| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-15页 |
| 英文缩略词中英文注释表 | 第15-17页 |
| 第一章 绪论 | 第17-23页 |
| ·胃癌 | 第17-18页 |
| ·EMT与肿瘤转移 | 第17页 |
| ·肿瘤干性与肿瘤形成 | 第17-18页 |
| ·3,3′-diindolylmethane（DIM）与胃癌 | 第18-20页 |
| ·DIM生物学特性 | 第18-19页 |
| ·DIM的抗肿瘤作用及机制 | 第19页 |
| ·低剂量的DIM对肿瘤的作用及机制 | 第19-20页 |
| ·小分子药物与细胞再编程 | 第20页 |
| ·Wnt/β-catenin信号通路与胃癌 | 第20-23页 |
| ·Wnt/β-catenin信号通路 | 第20-21页 |
| ·PORCN基因：Wnts分子脂质修饰的关键 | 第21页 |
| ·Wnt/β-catenin与EMT和肿瘤干性 | 第21页 |
| ·Wnt/β-catenin与胃癌 | 第21-23页 |
| 第二章 研究目的、方法、实验设计方案和意义 | 第23-27页 |
| ·研究目的 | 第23页 |
| ·研究方法 | 第23-24页 |
| ·实验设计方案 | 第24-26页 |
| ·研究意义 | 第26-27页 |
| 第三章 低剂量的DIM对胃癌细胞增殖、迁移及干性调节的影响 | 第27-40页 |
| ·材料 | 第27-29页 |
| ·细胞株 | 第27页 |
| ·主要试剂 | 第27-28页 |
| ·主要仪器及相关耗材 | 第28-29页 |
| ·方法 | 第29-32页 |
| ·细胞培养 | 第29页 |
| ·平板克隆形成实验 | 第29页 |
| ·细胞蛋白的提取 | 第29页 |
| ·Western blot | 第29-30页 |
| ·划痕实验 | 第30页 |
| ·Transwell迁移实验 | 第30-31页 |
| ·细胞免疫荧光 | 第31页 |
| ·成脂诱导培养 | 第31页 |
| ·统计分析 | 第31-32页 |
| ·结果 | 第32-38页 |
| ·低剂量的DIM促进胃癌细胞克隆集落形成 | 第32-33页 |
| ·低剂量的DIM上调胃癌细胞增殖相关蛋白的表达 | 第33-34页 |
| ·低剂量的DIM促进胃癌细胞迁移 | 第34-35页 |
| ·低剂量的DIM促进胃癌细胞EMT的发生 | 第35-36页 |
| ·低剂量的DIM增强胃癌细胞干性和分化能力 | 第36-38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| 第四章 低剂量的DIM通过活化Wnt/β-catenin信号通路促进胃癌进展 | 第40-48页 |
| ·材料 | 第40-41页 |
| ·细胞株 | 第40页 |
| ·主要试剂 | 第40页 |
| ·主要仪器及相关耗材 | 第40-41页 |
| ·方法 | 第41-42页 |
| ·细胞蛋白的提取和Western blot | 第41页 |
| ·细胞免疫荧光 | 第41页 |
| ·平板克隆形成实验 | 第41页 |
| ·成脂诱导实验 | 第41页 |
| ·上清的收集 | 第41-42页 |
| ·荧光虫素酶双报告基因检测 | 第42页 |
| ·上清作用细胞 | 第42页 |
| ·结果 | 第42-46页 |
| ·低剂量的DIM活化 β-catenin | 第42-43页 |
| ·β-catenin通路抑制剂ICG001可以逆转低剂量的DIM对胃癌细胞的影响 | 第43-45页 |
| ·低剂量的DIM活化Wnt/β-catenin信号通路 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| 第五章 低剂量的DIM通过促进HGC-27细胞Wnt4的自分泌活化 β-catenin信号通路 | 第48-63页 |
| ·材料 | 第48-50页 |
| ·细胞株 | 第48页 |
| ·主要试剂 | 第48-50页 |
| ·主要仪器及相关耗材 | 第50页 |
| ·方法 | 第50-54页 |
| ·质粒制备 | 第50-51页 |
| ·包装病毒 | 第51-52页 |
| ·慢病毒感染HGC-27细胞 | 第52页 |
| ·细胞总RNA提取 | 第52-53页 |
| ·逆转录反应 | 第53页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第53页 |
| ·Western blot | 第53页 |
| ·平板克隆形成实验 | 第53页 |
| ·细胞免疫荧光 | 第53页 |
| ·成脂诱导实验 | 第53-54页 |
| ·结果 | 第54-61页 |
| ·HGC-27细胞PORCN的干扰效果确证 | 第54-55页 |
| ·低剂量的DIM通过诱导HGC-27细胞Wnt自分泌来活化 β-catenin促进胃癌进展 | 第55-57页 |
| ·筛检低剂量DIM诱导表达上调的Wnts分子 | 第57页 |
| ·低剂量的DIM增强HGC-27细胞Wnt4的表达 | 第57-58页 |
| ·HGC-27细胞WNT4的干扰效果确证 | 第58-59页 |
| ·WNT4干扰对HGC-27细胞蛋白表达的影响 | 第59-60页 |
| ·低剂量的DIM通过增强HGC-27细胞Wnt4自分泌活化 β-catenin促进胃癌进展 | 第60-61页 |
| ·讨论 | 第61-63页 |
| 第六章 低浓度的DIM促进胃癌细胞的体内成瘤 | 第63-71页 |
| ·材料 | 第63-65页 |
| ·细胞株 | 第63页 |
| ·主要试剂 | 第63-64页 |
| ·主要仪器及相关耗材 | 第64页 |
| ·实验动物 | 第64-65页 |
| ·方法 | 第65-66页 |
| ·细胞培养 | 第65页 |
| ·裸鼠皮下荷瘤模型 | 第65页 |
| ·组织RNA提取 | 第65页 |
| ·逆转录反应 | 第65页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第65页 |
| ·肿瘤组织病理分析 | 第65页 |
| ·免疫组织化学 | 第65-66页 |
| ·组织免疫荧光 | 第66页 |
| ·统计分析 | 第66页 |
| ·结果 | 第66-70页 |
| ·低剂量的DIM促进胃癌细胞的体内生长 | 第66-67页 |
| ·低剂量的DIM促进裸鼠瘤组织Snail和N-cadherin的表达 | 第67-68页 |
| ·低剂量的DIM在体内促进瘤组织Wnt4、β-catenin和CD44的表达 | 第68-70页 |
| ·讨论 | 第70-71页 |
| 第七章 结论与展望 | 第71-73页 |
| ·结论 | 第71-72页 |
| ·展望 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-82页 |
| 致谢 | 第82-84页 |
| 攻读硕士学位期间发表的科研成果及参加的学术会议 | 第84-85页 |
