| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 第1章 引言 | 第8-10页 |
| 第2章 材料与方法 | 第10-24页 |
| ·材料 | 第10页 |
| ·临床标本收集 | 第10页 |
| ·实验细胞 | 第10页 |
| ·主要试剂 | 第10-11页 |
| ·自配试剂 | 第11-13页 |
| ·主要仪器设备 | 第13页 |
| ·细胞培养 | 第13-15页 |
| ·细胞传代 | 第13-14页 |
| ·细胞冻存 | 第14页 |
| ·细胞复苏 | 第14-15页 |
| ·提取总RNA及聚合酶链反应（PCR） | 第15-18页 |
| ·肝癌组织和癌旁组织RNA提取 | 第15页 |
| ·细胞RNA提取 | 第15-16页 |
| ·RNA逆转录成cDNA | 第16页 |
| ·梯度PCR选取最适退火温度 | 第16-18页 |
| ·实时荧光定量PCR检测Rock2和CEBPD的mRNA表达水平 | 第18页 |
| ·蛋白提取及Western blot检测Rock2和CEBPD蛋白表达 | 第18-20页 |
| ·肝癌组织和癌旁组织蛋白的提取 | 第18-19页 |
| ·细胞蛋白的提取 | 第19页 |
| ·BCA法测定蛋白浓度 | 第19-20页 |
| ·SDS－PAGE凝胶电泳 | 第20页 |
| ·转膜 | 第20页 |
| ·免疫反应 | 第20页 |
| ·蛋白检测 | 第20页 |
| ·在HCCLM3细胞及SMMC7721细胞中转染shRNA后检测Rock2和CEBPD的mRNA及蛋白的表达水平 | 第20-23页 |
| ·设计合成针对Rcok2基因特异性shRNA序列 | 第20-21页 |
| ·实时荧光定量PCR分析转染shRNA后细胞Rock2和CEBPD的mRNA表达水平变化情况 | 第21-22页 |
| ·Western blot分析转染shRNA后细胞Rock2和CEBPD的蛋白表达水平变化情况 | 第22-23页 |
| ·CCK8细胞增殖实验 | 第23页 |
| ·EdU实验步骤： | 第23页 |
| ·统计学分析 | 第23-24页 |
| 第3章 结果 | 第24-28页 |
| ·Rock2在肝癌组织中高表达，CEBPD在肝癌组织中低表达且两者呈负相关性 | 第24-26页 |
| ·沉默肝癌细胞中Rock2的表达后发现CEBPD的mRNA和蛋白表达水平上调 | 第26页 |
| ·Rock2通过调节CEBPD表达从而影响肝癌细胞的增殖功能 | 第26-28页 |
| 第4章 讨论 | 第28-30页 |
| 第5章 结论 | 第30-31页 |
| 致谢 | 第31-32页 |
| 参考文献 | 第32-34页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第34-35页 |
| 综述 | 第35-41页 |
| References | 第40-41页 |
