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中间锦鸡儿干旱胁迫下的叶片全长cDNA文库构建

摘要第1-4页
Abstract第4-9页
1 引言第9-20页
   ·植物抵抗干旱胁迫的机制第9-10页
     ·植物抵抗干旱胁迫生理生化机制第9-10页
     ·植物抵抗干旱胁迫的分子机制第10页
   ·中间锦鸡儿研究现状第10-11页
     ·中间锦鸡儿简介第10-11页
     ·中间锦鸡儿抗旱性研究第11页
   ·全长cDNA文库研究进展第11-19页
     ·cDNA文库的类型第11-13页
     ·cDNA文库构建的流程第13-15页
     ·全长cDNA文库构建方法第15-19页
     ·全长cDNA文库的应用第19页
   ·中间锦鸡儿cDNA文库构建的研究现状第19-20页
   ·本研究的内容、目的及意义第20页
2 材料和方法第20-30页
   ·实验材料第20-22页
     ·植物材料第20页
     ·菌株、载体及主要试剂第20-21页
     ·主要培养基配制第21-22页
     ·主要仪器设备第22页
     ·实时荧光定量PCR及菌落PCR的相关引物第22页
   ·植物的培养第22页
   ·干旱处理及取样第22页
   ·确定最佳干旱时间第22-24页
     ·总RNA提取第22-23页
     ·总RNA中DNA的去除第23-24页
     ·cDNA的合成第24页
     ·实时荧光定量PCR检测已知抗旱基因的表达量第24页
   ·总RNA的提取(大体积)第24-25页
   ·poly A~+mRNA的分离纯化第25页
   ·全长cDNA的合成第25-26页
     ·cDNA第一链的合成第25-26页
     ·cDNA第二链的合成第26页
   ·cDNA的分段回收第26-27页
   ·cDNA的DH5α克隆第27-29页
     ·全长cDNA与T载体的连接第27-28页
     ·感受态细胞制备第28-29页
     ·区段cDNA与载体的连接产物转化大肠杆菌DH5α第29页
     ·阳性克隆的培养第29页
   ·单克隆的PCR检测第29-30页
   ·文库质量的检测第30页
   ·部分克隆的测序与分析第30页
3 结果与分析第30-38页
   ·最佳土壤干旱时间的确定第30-31页
   ·总RNA的提取第31-32页
   ·poly A~+mRNA的分离纯化第32页
   ·双链cDNA的合成第32-33页
   ·cDNA的分段回收第33页
   ·蓝白斑挑选第33-34页
   ·阳性克隆的PCR检测第34页
   ·文库质量的检测第34-35页
   ·部分全长cDNA克隆的测序及比对结果第35-38页
4 讨论与结论第38-39页
致谢第39-40页
参考文献第40-46页
作者简介第46页

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