| 中文摘要 | 第1-11页 |
| 英文摘要 | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第13-29页 |
| ·鸡堆型艾美尔球虫研究进展 | 第13-18页 |
| ·堆型艾美尔球虫研究概况 | 第13页 |
| ·堆型艾美尔球虫生物特性 | 第13-14页 |
| ·堆型艾美尔球虫生活史及致病性 | 第14页 |
| ·堆型艾美尔球虫疫苗 | 第14-16页 |
| ·球虫体外培养 | 第16-17页 |
| ·球虫耐药性及防治 | 第17-18页 |
| ·小结 | 第18页 |
| ·鸡球虫主要抗原基因研究进展 | 第18-24页 |
| ·卵囊表面抗原 | 第18页 |
| ·子孢子表面抗原 | 第18-20页 |
| ·裂殖生殖阶段抗原 | 第20页 |
| ·配子生殖阶段抗原 | 第20-21页 |
| ·微线蛋白 | 第21-22页 |
| ·折光体蛋白 | 第22-23页 |
| ·其他抗原基因 | 第23-24页 |
| ·小结 | 第24页 |
| ·白细胞介素18 及鸡白细胞介素18 研究进展 | 第24-28页 |
| ·白细胞介素18 研究进展 | 第24-26页 |
| ·鸡IL-18 及其生物学活性 | 第26-27页 |
| ·ChIL-18 在球虫病防治中的应用 | 第27-28页 |
| ·目的和意义 | 第28-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-53页 |
| ·试验材料 | 第29-30页 |
| ·虫株、试验动物 | 第29页 |
| ·菌株、载体及质粒 | 第29页 |
| ·主要工具酶、抗体及分子生物学试剂 | 第29页 |
| ·主要生化试剂 | 第29-30页 |
| ·主要试验仪器设备 | 第30页 |
| ·试验方法 | 第30-52页 |
| ·堆型艾美尔球虫Ea1A 基因克隆及序列分析 | 第30-36页 |
| ·堆型艾美尔球虫Ea1A 基因和鸡IL-18 基因的原核蛋白表达及纯化 | 第36-39页 |
| ·鸡IL-18 原核表达蛋白复性及生物活性检测 | 第39-40页 |
| ·Ea1A 和ChIL-18 多克隆抗体制备和生物活性检测 | 第40-41页 |
| ·重组真核表达质粒的构建 | 第41-43页 |
| ·PVAX-3-1E-linker-Ea1A 真核表达质粒的构建 | 第43-46页 |
| ·重组质粒体外和体内表达的检测 | 第46-49页 |
| ·重组真核表达质粒在雏鸡体内免疫效果检测 | 第49-52页 |
| ·数据处理 | 第52-53页 |
| 3 试验结果 | 第53-81页 |
| ·鸡堆型艾美尔球虫Ea1A 基因克隆及序列分析 | 第53-56页 |
| ·孢子化卵囊总RNA 的提取 | 第53页 |
| ·堆型艾美尔球虫Ea1A 基因的扩增 | 第53-54页 |
| ·重组质粒pMD18-T-Ea1A 鉴定 | 第54页 |
| ·重组质粒pMD18-T-Ea1A 序列测定及二级结构预测分析 | 第54-56页 |
| ·鸡堆型艾美尔球虫Ea1A 基因和鸡IL-18 基因的原核蛋白表达和纯化 | 第56-61页 |
| ·重组表达质粒pET30a-Ea1A 的鉴定 | 第56页 |
| ·重组表达质粒pET30a-IL-18 的鉴定 | 第56-57页 |
| ·堆型艾美尔球虫Ea1A 原核蛋白表达及纯化 | 第57-60页 |
| ·ChIL-18 原核蛋白表达及纯化 | 第60-61页 |
| ·ChIL-18 原核表达蛋白复性及生物活性检测 | 第61-62页 |
| ·Ea1A 和ChIL-18 的多克隆抗体生物活性 | 第62-63页 |
| ·Ea1A 的多克隆抗体抗体效价 | 第62页 |
| ·ChIL-18 的多克隆抗体抗体效价 | 第62页 |
| ·Ea1A 多克隆抗体生物活性 | 第62页 |
| ·ChIL-18 的多克隆抗体生物活性 | 第62-63页 |
| ·重组真核表达质粒的构建和鉴定 | 第63-65页 |
| ·重组质粒PVAX-3-1E 质粒PCR 和酶切鉴定 | 第63-64页 |
| ·重组质粒PVAX-IL-18 质粒PCR 和酶切鉴定 | 第64页 |
| ·重组质粒PVAX-Ea1A 质粒PCR 和酶切鉴定 | 第64-65页 |
| ·PVAX-3-1E-linker-Ea1A 真核表达质粒的构建和鉴定 | 第65-68页 |
| ·重组质粒PVAX-3-1E-1 的PCR 鉴定和酶切鉴定 | 第65页 |
| ·重组质粒PVAX-3-1E-linker-Ea1A 的PCR 鉴定和酶切鉴定 | 第65-67页 |
| ·PVAX-3-1E-linker-Ea1A 融合基因真核表达质粒二级结构的预测分析 | 第67-68页 |
| ·重组质粒体外和体内表达 | 第68-74页 |
| ·重组质粒PVAX-3-1E 体外瞬时表达 | 第68页 |
| ·重组质粒PVAX-IL-18 外瞬时表达 | 第68-70页 |
| ·重组质粒体PVAX-Ea1A 外瞬时表达 | 第70页 |
| ·重组质粒体PVAX-3-1E-linker-Ea1A 外瞬时表达 | 第70-72页 |
| ·RT-PCR 检测真核质粒在鸡体内表达 | 第72页 |
| ·间接免疫荧光检测肌肉组织中抗原基因蛋白表达 | 第72页 |
| ·Western-blot 检测肌肉组织中抗原基因表达 | 第72-74页 |
| ·重组质粒免疫雏鸡后机体免疫效应 | 第74-81页 |
| ·雏鸡胸腺T 淋巴细胞增殖功能动态变化 | 第74页 |
| ·雏鸡外周血液T 淋巴细胞增殖功能动态变化 | 第74-75页 |
| ·雏鸡脾脏T 淋巴细胞增殖功能动态变化 | 第75-76页 |
| ·雏鸡血液B 淋巴细胞增殖功能动态变化 | 第76页 |
| ·雏鸡脾脏B 淋巴细胞增殖功能动态变化 | 第76-77页 |
| ·雏鸡免疫器官指数动态变化 | 第77-79页 |
| ·雏鸡体内抗体动态变化 | 第79页 |
| ·雏鸡增重动态变化 | 第79-81页 |
| 4 讨论 | 第81-91页 |
| ·Ea1A 基因的克隆鉴定和表达及其多克隆抗体制备 | 第81-82页 |
| ·Ea1A 抗原基因的选择以及基因的克隆 | 第81页 |
| ·Ea1A 蛋白表达纯化 | 第81-82页 |
| ·Ea1A 多克隆抗体制备及其生物活性检测 | 第82页 |
| ·ChIL-18 蛋白的表达和多克隆抗体制备及其生物学活性 | 第82-84页 |
| ·ChIL-18 蛋白的表达及复性 | 第82-83页 |
| ·CHIL18 多克隆抗体生物活性检测 | 第83页 |
| ·ChIL-18 的生物活性检测 | 第83-84页 |
| ·PVXA1-3-1E-linker-Ea1A 融合基因真核表达质粒构建及体内外表达 | 第84-87页 |
| ·PVXA1-3-1E-linker-Ea1A 融合基因真核表达质粒构建 | 第84-86页 |
| ·PVXA1-3-1E-linker-Ea1A 融合基因真核载体表达质粒体外瞬时 转染鉴定结果及分析 | 第86页 |
| ·真核表达质粒鸡体内注射免疫检测抗原基因表达分析 | 第86-87页 |
| ·重组质粒免疫雏鸡后机体的免疫效应 | 第87-91页 |
| ·雏鸡免疫后T 淋巴细胞增殖功能变化结果分析 | 第88页 |
| ·雏鸡免疫后B 淋巴细胞增殖功能变化结果分析 | 第88-89页 |
| ·雏鸡免疫器官指数分析 | 第89页 |
| ·雏鸡外周血液抗体含量动态变化结果分析 | 第89-91页 |
| 5 结论 | 第91-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |
| 参考文献 | 第93-101页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第101页 |
