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卵巢癌Skov3细胞和宫颈癌Hela细胞辐射敏感性差异的机制探讨

中文摘要第1-10页
ABSTRACT第10-24页
前言第24-26页
第1章 文献综述第26-44页
   ·DNA损伤应答第26-28页
   ·DNA修复第28-32页
     ·DNA-PK的基本结构第29页
     ·DNA-PK的生物学作用第29-31页
     ·DNA-PK在辐射损伤中的作用与辐射敏感性的关系第31-32页
   ·细胞周期检查点第32-36页
     ·CHK1 的基本结构第33页
     ·CHK1 的生物学作用第33-36页
     ·CHK1 与辐射敏感性的关系第36页
   ·卵巢癌和宫颈癌的放化治疗第36-41页
     ·卵巢癌治疗的现状第36-39页
     ·宫颈癌的放化治疗第39-41页
   ·DNA-PK和CHK1 在妇科恶性肿瘤中的研究进展第41-42页
   ·RNA干扰技术第42-44页
第2章 DNA-PK SHRNA和CHK1 SHRNA的构建及有效干扰载体的筛选第44-81页
   ·主要试剂第44-46页
   ·主要仪器设备第46页
   ·方法第46-57页
     ·寡核苷酸的设计、合成第46-50页
     ·寡核苷酸的退火第50-51页
     ·pGPU6/GFP/Neo-shRNA载体的构建第51-53页
     ·限制性内切酶酶切鉴定重组质粒第53页
     ·测序第53-54页
     ·序列分析第54页
     ·照射条件第54页
     ·脂质体LipofectamineT M介导转染shRNA载体第54页
     ·细胞RNA提取第54-55页
     ·RT-PCR第55-56页
     ·免疫组化第56-57页
   ·结果第57-80页
     ·限制性内切酶酶切鉴定重组质粒第57-58页
     ·测序鉴定重组质粒第58-67页
     ·序列分析第67-72页
     ·有效DNA-PK shRNA和CHK1 shRNA载体的筛选第72-80页
   ·讨论第80-81页
第3章 辐射诱导卵巢癌SKOV3 细胞和宫颈癌HELA细胞凋亡的差异第81-93页
   ·材料方法第81-83页
     ·主要试剂与器材第81-82页
     ·照射条件和细胞转染第82页
     ·流式细胞术分析细胞周期及凋亡第82-83页
     ·统计学方法第83页
   ·结果第83-91页
     ·X-射线照射诱导Skov3 细胞和Hela细胞的凋亡不同第83-85页
     ·2Gy X射线照射对转染DNA-PK shRNA-5297 的Skov3 细胞和Hela细胞凋亡的影响第85-87页
     ·2Gy X射线照射对转染CHK1 shRNA-617 的Skov3 细胞和Hela细胞凋亡的影响第87-89页
     ·2Gy X射线照射对转染DNA-PK shRNA-5297 和CHK1 shRNA-617 的Skov3 细胞和Hela细胞凋亡的影响第89-91页
   ·讨论第91-93页
第4章 卵巢癌SKOV3 和宫颈癌HELA辐射敏感性差异的细胞周期阻滞的研究第93-105页
   ·材料和方法第93-94页
     ·主要试剂和仪器第93页
     ·方法第93页
     ·统计学分析第93-94页
   ·结果第94-103页
     ·2Gy X-射线照射诱导Skov3 细胞和Hela细胞G2 期的改变第94-96页
     ·2Gy X射线照射对转染DNA-PK shRNA-5297 的Skov3 细胞和Hela细胞G2 期的影响第96-99页
     ·2Gy X射线照射对转染CHK1 shRNA-617 的Skov3 细胞和Hela细胞G2 期的影响第99-101页
     ·2Gy X射线照射对转染DNA-PK shRNA-5297 和CHK1 shRNA-617 的Skov3 细胞和Hela细胞G2 期的影响第101-103页
   ·讨论第103-105页
第5章 卵巢癌和宫颈癌辐射敏感性差异的DNA损伤应 .答机制的探讨第105-164页
   ·材料第105页
   ·方法第105-107页
     ·细胞RNA的提取第105页
     ·RNA浓度的鉴定第105页
     ·cDNA的合成第105-106页
     ·引物的设计及合成第106页
     ·PCR反应第106页
     ·PCR产物的确定分析第106-107页
   ·结果第107-160页
   ·讨论第160-164页
结论第164-166页
参考文献第166-176页
附录第176-190页
个人简历及攻读博士期间取得的科研成果第190-192页
致谢第192页

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