中文摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-24页 |
前言 | 第24-26页 |
第1章 文献综述 | 第26-44页 |
·DNA损伤应答 | 第26-28页 |
·DNA修复 | 第28-32页 |
·DNA-PK的基本结构 | 第29页 |
·DNA-PK的生物学作用 | 第29-31页 |
·DNA-PK在辐射损伤中的作用与辐射敏感性的关系 | 第31-32页 |
·细胞周期检查点 | 第32-36页 |
·CHK1 的基本结构 | 第33页 |
·CHK1 的生物学作用 | 第33-36页 |
·CHK1 与辐射敏感性的关系 | 第36页 |
·卵巢癌和宫颈癌的放化治疗 | 第36-41页 |
·卵巢癌治疗的现状 | 第36-39页 |
·宫颈癌的放化治疗 | 第39-41页 |
·DNA-PK和CHK1 在妇科恶性肿瘤中的研究进展 | 第41-42页 |
·RNA干扰技术 | 第42-44页 |
第2章 DNA-PK SHRNA和CHK1 SHRNA的构建及有效干扰载体的筛选 | 第44-81页 |
·主要试剂 | 第44-46页 |
·主要仪器设备 | 第46页 |
·方法 | 第46-57页 |
·寡核苷酸的设计、合成 | 第46-50页 |
·寡核苷酸的退火 | 第50-51页 |
·pGPU6/GFP/Neo-shRNA载体的构建 | 第51-53页 |
·限制性内切酶酶切鉴定重组质粒 | 第53页 |
·测序 | 第53-54页 |
·序列分析 | 第54页 |
·照射条件 | 第54页 |
·脂质体LipofectamineT M介导转染shRNA载体 | 第54页 |
·细胞RNA提取 | 第54-55页 |
·RT-PCR | 第55-56页 |
·免疫组化 | 第56-57页 |
·结果 | 第57-80页 |
·限制性内切酶酶切鉴定重组质粒 | 第57-58页 |
·测序鉴定重组质粒 | 第58-67页 |
·序列分析 | 第67-72页 |
·有效DNA-PK shRNA和CHK1 shRNA载体的筛选 | 第72-80页 |
·讨论 | 第80-81页 |
第3章 辐射诱导卵巢癌SKOV3 细胞和宫颈癌HELA细胞凋亡的差异 | 第81-93页 |
·材料方法 | 第81-83页 |
·主要试剂与器材 | 第81-82页 |
·照射条件和细胞转染 | 第82页 |
·流式细胞术分析细胞周期及凋亡 | 第82-83页 |
·统计学方法 | 第83页 |
·结果 | 第83-91页 |
·X-射线照射诱导Skov3 细胞和Hela细胞的凋亡不同 | 第83-85页 |
·2Gy X射线照射对转染DNA-PK shRNA-5297 的Skov3 细胞和Hela细胞凋亡的影响 | 第85-87页 |
·2Gy X射线照射对转染CHK1 shRNA-617 的Skov3 细胞和Hela细胞凋亡的影响 | 第87-89页 |
·2Gy X射线照射对转染DNA-PK shRNA-5297 和CHK1 shRNA-617 的Skov3 细胞和Hela细胞凋亡的影响 | 第89-91页 |
·讨论 | 第91-93页 |
第4章 卵巢癌SKOV3 和宫颈癌HELA辐射敏感性差异的细胞周期阻滞的研究 | 第93-105页 |
·材料和方法 | 第93-94页 |
·主要试剂和仪器 | 第93页 |
·方法 | 第93页 |
·统计学分析 | 第93-94页 |
·结果 | 第94-103页 |
·2Gy X-射线照射诱导Skov3 细胞和Hela细胞G2 期的改变 | 第94-96页 |
·2Gy X射线照射对转染DNA-PK shRNA-5297 的Skov3 细胞和Hela细胞G2 期的影响 | 第96-99页 |
·2Gy X射线照射对转染CHK1 shRNA-617 的Skov3 细胞和Hela细胞G2 期的影响 | 第99-101页 |
·2Gy X射线照射对转染DNA-PK shRNA-5297 和CHK1 shRNA-617 的Skov3 细胞和Hela细胞G2 期的影响 | 第101-103页 |
·讨论 | 第103-105页 |
第5章 卵巢癌和宫颈癌辐射敏感性差异的DNA损伤应 .答机制的探讨 | 第105-164页 |
·材料 | 第105页 |
·方法 | 第105-107页 |
·细胞RNA的提取 | 第105页 |
·RNA浓度的鉴定 | 第105页 |
·cDNA的合成 | 第105-106页 |
·引物的设计及合成 | 第106页 |
·PCR反应 | 第106页 |
·PCR产物的确定分析 | 第106-107页 |
·结果 | 第107-160页 |
·讨论 | 第160-164页 |
结论 | 第164-166页 |
参考文献 | 第166-176页 |
附录 | 第176-190页 |
个人简历及攻读博士期间取得的科研成果 | 第190-192页 |
致谢 | 第192页 |