| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 1 绪论 | 第11-29页 |
| ·耐辐射异常球菌概述 | 第11-15页 |
| ·耐辐射异常球菌基本特性 | 第11-12页 |
| ·耐辐射异常球菌的极端抗性 | 第12-15页 |
| ·胚胎发育晚期丰富蛋白 (LEA)及其研究进展 | 第15-20页 |
| ·LEA 蛋白概述 | 第15-16页 |
| ·LEA 蛋白特性与分类 | 第16-17页 |
| ·LEA 蛋白功能 | 第17-20页 |
| ·耐辐射异常球菌相关研究工作基础 | 第20-25页 |
| ·耐辐射异常球菌 LEA 蛋白 | 第20-23页 |
| ·全局调控蛋白 IrrE | 第23-24页 |
| ·冷激蛋白 Csp | 第24-25页 |
| ·立题依据与研究意义 | 第25-26页 |
| ·课题来源及主要研究内容 | 第26-28页 |
| ·课题来源 | 第26页 |
| ·研究内容 | 第26-27页 |
| ·创新点 | 第27-28页 |
| ·技术路线 | 第28-29页 |
| 2 耐辐射异常球菌 ΔleaK 突变株构建 | 第29-57页 |
| 摘要 | 第29-30页 |
| ·材料和方法 | 第30-42页 |
| ·实验材料 | 第30-32页 |
| ·细菌的培养 | 第32页 |
| ·细菌基因组总 DNA 及质粒 DNA 的提取 | 第32页 |
| ·PCR 反应 | 第32-35页 |
| ·DNA 片段回收及纯化 | 第35页 |
| ·DNA 片段的酶切与连接 | 第35-36页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第36-37页 |
| ·Deinococcus radiodurans 线性 DNA 转化方法 | 第37页 |
| ·细菌总 RNA 提取及纯化 | 第37-39页 |
| ·RNA 反转录合成 cDNA | 第39页 |
| ·操纵单元验证 | 第39-40页 |
| ·实时荧光定量 PCR | 第40-42页 |
| ·结果与分析 | 第42-54页 |
| ·耐辐射异常球菌 LeaK 蛋白结构分析 | 第42-46页 |
| ·突变株 ΔleaK 的构建 | 第46-51页 |
| ·leaK 转录单元分析 | 第51-54页 |
| ·小结 | 第54-57页 |
| ·LeaK 蛋白的生物信息学分析 | 第54-55页 |
| ·突变株构建及转录单元验证 | 第55-57页 |
| 3 LeaK 蛋白增强耐辐射异常球菌非生物胁迫抗性的功能分析 | 第57-74页 |
| 摘要 | 第57-58页 |
| ·材料和方法 | 第58-62页 |
| ·实验材料 | 第58-59页 |
| ·细菌的培养 | 第59页 |
| ·正常培养条件下菌株生长曲线测定 | 第59页 |
| ·不同浓度盐对菌株的冲击实验 | 第59-60页 |
| ·不同浓度山梨糖醇对菌株的冲击实验 | 第60页 |
| ·不同浓度 H_2O_2对菌株的冲击实验 | 第60页 |
| ·干燥处理下菌株的生长 | 第60-61页 |
| ·紫外 (UV) 辐照处理下菌株的生长 | 第61页 |
| ·利用 Biolog 分析突变株 ΔleaK 的代谢变化 | 第61-62页 |
| ·实时荧光定量 PCR | 第62页 |
| ·结果与分析 | 第62-71页 |
| ·正常培养条件下菌株的生长曲线 | 第62-63页 |
| ·山梨糖醇冲击对突变株ΔleaK 的影响 | 第63页 |
| ·盐冲击对突变株 ΔleaK 的影响 | 第63-64页 |
| ·H_2O_2冲击对突变株 ΔleaK 的影响 | 第64-65页 |
| ·干燥对突变株 ΔleaK 的影响 | 第65-66页 |
| ·突变株 ΔleaK 的 Biolog 分析 | 第66-68页 |
| ·LeaK 的表达及其对氧化胁迫抗性相关基因表达的作用 | 第68-71页 |
| ·小结 | 第71-74页 |
| ·LeaK 蛋白的抗逆功能 | 第71-72页 |
| ·相关基因表达量的变化 | 第72-74页 |
| 4 leaK 在大肠杆菌中的表达 | 第74-87页 |
| 摘要 | 第74-75页 |
| ·材料方法 | 第75-80页 |
| ·实验材料 | 第75-76页 |
| ·细菌的培养 | 第76页 |
| ·细菌基因组、质粒提取 | 第76页 |
| ·PCR 反应、产物回收与纯化 | 第76页 |
| ·DNA 片段酶切与连接、感受态细胞的转化 | 第76-77页 |
| ·高浓度盐对 E.coli 重组菌株的冲击实验 | 第77页 |
| ·高浓度山梨糖醇对 E. coli 重组菌株的冲击实验 | 第77页 |
| ·干燥条件下处理 E.co li 重组菌株 | 第77页 |
| ·紫外 (UV) 辐照处理 E. coli 重组菌株 | 第77-78页 |
| ·LeaK 蛋白表达 | 第78-80页 |
| ·结果与分析 | 第80-85页 |
| ·耐辐射异常球菌 Lea K 蛋白对重组大肠杆菌的影响 | 第80-81页 |
| ·LeaK 蛋白表达载体构建 | 第81-83页 |
| ·LeaK 蛋白在大肠杆菌中的高效表达 | 第83-85页 |
| ·小结 | 第85-87页 |
| ·LeaK 不能增强大肠杆菌的抗逆特性 | 第85-86页 |
| ·LeaK 蛋白的表达 | 第86-87页 |
| 结语 | 第87-89页 |
| 致谢 | 第89-91页 |
| 参考文献 | 第91-104页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文及研究成果 | 第104-106页 |
| 附录 | 第106-107页 |
