英汉缩略词对照 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
前言 | 第12-14页 |
材料与方法 | 第14-34页 |
1. 实验材料 | 第14页 |
2. 实验试剂 | 第14-16页 |
3. 实验仪器 | 第16-18页 |
4. 主要试剂的配制 | 第18-20页 |
5. 细胞培养 | 第20-22页 |
·细胞复苏 | 第20页 |
·细胞培养、传代与计数 | 第20-21页 |
·细胞冻存 | 第21-22页 |
6. MTT 法检测 EGCG 对 HepG2、SMMC7721、Sk-hep1 等肝癌细胞增殖的影响 | 第22-23页 |
·实验原理 | 第22页 |
·实验步骤 | 第22-23页 |
7. AO/EB 双染法检测 EGCG 对肝癌细胞的致凋亡作用 | 第23-24页 |
·实验原理 | 第23页 |
·实验步骤 | 第23-24页 |
8.流式细胞仪检测 EGCG 对肝癌细胞周期的影响 | 第24-25页 |
·实验原理 | 第24页 |
·实验步骤 | 第24-25页 |
9.Annexin V/PI 双染色法检测 EGCG 对肝癌细胞凋亡的影响 | 第25-26页 |
·实验原理 | 第25页 |
·实验步骤 | 第25-26页 |
10. 荧光定量 PCR 检测 PI3K、AKT 等 mRNA 的表达 | 第26-29页 |
·Trizol 法提取 EGCG 作用后 SMMC7721 细胞总 RNA | 第26-27页 |
·逆转录 PCR 合成 cDNA | 第27-28页 |
·实时荧光定量 PCR 扩增 cDNA | 第28-29页 |
11.Western Blotting 法检测 EGCG 作用后人肝癌细胞内 AKT 及 p-AKT表达的变化 | 第29-33页 |
·实验原理 | 第29-30页 |
·蛋白样品的制备 | 第30-32页 |
·电泳、转膜、封闭、扫膜 | 第32-33页 |
12. 统计学分析 | 第33-34页 |
结果 | 第34-42页 |
1. MTT 法检测 EGCG 对人肝癌 HepG2、SMMC7721、Sk-hep1 细胞的作用效果 | 第34-36页 |
2. 吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双染法观察肝癌细胞的形态学变化 | 第36页 |
3. 流式细胞仪检测 EGCG 对肝癌细胞周期的阻滞作用 | 第36-37页 |
4. 流式细胞仪检测 EGCG 对肝癌细胞凋亡的影响 | 第37-38页 |
5. EGCG 对肝癌细胞 EGFR、PI3K、AKT 及 NF-κB mRNA 表达的影响33 | 第38-40页 |
·扩增曲线 | 第38页 |
·熔解曲线 | 第38-39页 |
·mRNA 表达的变化 | 第39-40页 |
6.EGCG 对肝癌细胞 AKT 及 p-AKT 蛋白表达的影响 | 第40-42页 |
讨论 | 第42-46页 |
参考文献 | 第46-54页 |
综述 | 第54-67页 |
参考文献 | 第61-67页 |
附录 | 第67-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第69页 |