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EGCG对人肝癌细胞的作用效果与PI3K-AKT信号通路关系的研究

英汉缩略词对照第1-8页
摘要第8-10页
ABSTRACT第10-12页
前言第12-14页
材料与方法第14-34页
 1. 实验材料第14页
 2. 实验试剂第14-16页
 3. 实验仪器第16-18页
 4. 主要试剂的配制第18-20页
 5. 细胞培养第20-22页
   ·细胞复苏第20页
   ·细胞培养、传代与计数第20-21页
   ·细胞冻存第21-22页
 6. MTT 法检测 EGCG 对 HepG2、SMMC7721、Sk-hep1 等肝癌细胞增殖的影响第22-23页
   ·实验原理第22页
   ·实验步骤第22-23页
 7. AO/EB 双染法检测 EGCG 对肝癌细胞的致凋亡作用第23-24页
   ·实验原理第23页
   ·实验步骤第23-24页
 8.流式细胞仪检测 EGCG 对肝癌细胞周期的影响第24-25页
   ·实验原理第24页
   ·实验步骤第24-25页
 9.Annexin V/PI 双染色法检测 EGCG 对肝癌细胞凋亡的影响第25-26页
   ·实验原理第25页
   ·实验步骤第25-26页
 10. 荧光定量 PCR 检测 PI3K、AKT 等 mRNA 的表达第26-29页
   ·Trizol 法提取 EGCG 作用后 SMMC7721 细胞总 RNA第26-27页
   ·逆转录 PCR 合成 cDNA第27-28页
   ·实时荧光定量 PCR 扩增 cDNA第28-29页
 11.Western Blotting 法检测 EGCG 作用后人肝癌细胞内 AKT 及 p-AKT表达的变化第29-33页
   ·实验原理第29-30页
   ·蛋白样品的制备第30-32页
   ·电泳、转膜、封闭、扫膜第32-33页
 12. 统计学分析第33-34页
结果第34-42页
 1. MTT 法检测 EGCG 对人肝癌 HepG2、SMMC7721、Sk-hep1 细胞的作用效果第34-36页
 2. 吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双染法观察肝癌细胞的形态学变化第36页
 3. 流式细胞仪检测 EGCG 对肝癌细胞周期的阻滞作用第36-37页
 4. 流式细胞仪检测 EGCG 对肝癌细胞凋亡的影响第37-38页
 5. EGCG 对肝癌细胞 EGFR、PI3K、AKT 及 NF-κB mRNA 表达的影响33第38-40页
   ·扩增曲线第38页
   ·熔解曲线第38-39页
   ·mRNA 表达的变化第39-40页
 6.EGCG 对肝癌细胞 AKT 及 p-AKT 蛋白表达的影响第40-42页
讨论第42-46页
参考文献第46-54页
综述第54-67页
 参考文献第61-67页
附录第67-68页
致谢第68-69页
攻读学位期间发表的学术论文第69页

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