| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第1章 前言 | 第11-17页 |
| ·调节性 T 细胞 | 第11-13页 |
| ·调节性 T 细胞来源 | 第11-12页 |
| ·调节性 T 细胞的表面标志 | 第12-13页 |
| ·调节性 T 细胞作用机制 | 第13-14页 |
| ·调节性 T 细胞与自身免疫病的关系 | 第14页 |
| ·调节性 T 细胞体外扩增方法 | 第14-15页 |
| ·细胞因子对调节性 T 细胞增殖的影响 | 第15-16页 |
| ·IL-2 与 Treg 细胞 | 第15页 |
| ·IL-7 与 Treg 细胞 | 第15-16页 |
| ·IL-10 与 Treg 细胞 | 第16页 |
| ·TGF-β与 Treg 细胞 | 第16页 |
| ·研究目的与意义 | 第16-17页 |
| 第2章 新生儿脐带血及成人外周血单个核细胞的制备 | 第17-24页 |
| ·材料 | 第17-18页 |
| ·实验所用血液标本来源 | 第17页 |
| ·主要试剂 | 第17页 |
| ·主要试剂配制 | 第17页 |
| ·主要实验仪器及耗材 | 第17-18页 |
| ·方法 | 第18-21页 |
| ·血液标本的病原微生物检测 | 第18-19页 |
| ·血液标本中单个核细胞的制备 | 第19-20页 |
| ·MNCs 的冻存与复苏 | 第20-21页 |
| ·结果 | 第21-22页 |
| ·血液样本中分离出的 MNCs 的活率和得率 | 第21-22页 |
| ·两种方法冻存后所得 MNCs 的活率和回收率 | 第22页 |
| ·讨论 | 第22-23页 |
| ·MNCs 分离效果的影响因素 | 第22-23页 |
| ·MNCs 冻存后复苏效果的影响因素 | 第23页 |
| ·小结 | 第23-24页 |
| 第3章 新生儿脐带血 CD4~+CD25~+Treg 的分离、培养及鉴定 | 第24-32页 |
| ·材料 | 第24-25页 |
| ·实验所用脐血单个核细胞来源 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·主要实验仪器及耗材 | 第24-25页 |
| ·方法 | 第25-28页 |
| ·磁性分选 CD4~+CD25~+Treg 细胞 | 第25-27页 |
| ·CD4~+CD25~+Treg 细胞的体外培养条件 | 第27页 |
| ·细胞计数仪检测 CD4~+CD25~+Treg 细胞活性 | 第27-28页 |
| ·流式细胞仪检测扩增后的 CD4~+CD25~+调节性 T 细胞表型 | 第28页 |
| ·扩增后的 nTregs 增殖抑制试验 | 第28页 |
| ·结果 | 第28-30页 |
| ·CD4~+CD25~+Treg 细胞的纯度和活性 | 第28-29页 |
| ·培养过程中的 nTregs 形态变化 | 第29-30页 |
| ·nTregs 的体外增殖抑制能力 | 第30页 |
| ·讨论 | 第30-32页 |
| 第4章 脐血 CIK 的分离、培养及鉴定 | 第32-38页 |
| ·材料 | 第32-33页 |
| ·实验所用脐血单个核细胞来源 | 第32页 |
| ·主要试剂 | 第32页 |
| ·主要实验仪器及耗材 | 第32-33页 |
| ·方法 | 第33-34页 |
| ·脐血 CIK 的体外扩增 | 第33页 |
| ·流式细胞仪检测扩增后的细胞表型 | 第33页 |
| ·细胞计数仪检测细胞增殖能力 | 第33-34页 |
| ·结果 | 第34-36页 |
| ·培养过程中的 CIK 细胞形态变化 | 第34页 |
| ·CIK 细胞增殖能力 | 第34-35页 |
| ·CIK 细胞的表型分析 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36-38页 |
| 第5章 IL-7 对脐带血 CD4~+CD25-T 细胞的体外诱导培养 | 第38-52页 |
| ·材料 | 第38-40页 |
| ·实验所用 CD4~+T 来源 | 第38页 |
| ·主要试剂 | 第38页 |
| ·主要试剂配制 | 第38-39页 |
| ·主要实验仪器及耗材 | 第39-40页 |
| ·主要应用的生物信息学软件 | 第40页 |
| ·DNAMAN | 第40页 |
| ·Primer Premier 5.0 | 第40页 |
| ·SPSS | 第40页 |
| ·方法 | 第40-44页 |
| ·体外培养扩增 CD4~+CD25-T 细胞 | 第40-41页 |
| ·流式细胞仪检测扩增后的各组细胞表型变化 | 第41页 |
| ·细胞计数仪检测细胞增殖能力 | 第41页 |
| ·诱导生成的 CD4~+CD25~+T 细胞增殖抑制试验 | 第41页 |
| ·Real-time PCR 检测体外扩增的各组细胞内因子表达 | 第41-44页 |
| ·结果 | 第44-50页 |
| ·体外扩增 iTregs 后的流式检测结果 | 第44-45页 |
| ·总 RNA 的提取结果 | 第45页 |
| ·PCR 扩增结果 | 第45-47页 |
| ·体外扩增后的 CD4~+CD25~+T 细胞对 PBMCs 增殖的抑制试验 | 第47-49页 |
| ·RT-PCR 检测 Foxp3、IL-10 和 TGF-β的 mRNA 表达 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-52页 |
| 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 攻读学位期间取得的科研成果 | 第58页 |
