| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 目录 | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-26页 |
| ·ROS简述 | 第12-15页 |
| ·ROS的概念 | 第12-13页 |
| ·ROS产生的途径 | 第13页 |
| ·ROS的功能 | 第13-14页 |
| ·ROS的消除 | 第14-15页 |
| ·Prx家族概述 | 第15-21页 |
| ·Prx家族的分类概况 | 第15-17页 |
| ·Prx蛋白家族的功能及作用机制 | 第17-21页 |
| ·自然杀伤细胞增强因子 | 第21-25页 |
| ·NKEF的发现 | 第21页 |
| ·鱼类NKEF基因的发现及克隆 | 第21-22页 |
| ·NKEF的生物学功能 | 第22-25页 |
| ·鮸鱼NKEF基因研究的意义 | 第25-26页 |
| 第二章 鮸鱼NKEF基因的克隆 | 第26-37页 |
| ·实验材料与方法 | 第26-30页 |
| ·实验材料采集 | 第26页 |
| ·DNA/RNA的提取及cDNA的合成 | 第26-27页 |
| ·引物设计 | 第27-29页 |
| ·扩增鮸鱼NKEF-A基因 | 第29页 |
| ·扩增产物的回收与纯化 | 第29-30页 |
| ·目的片段的连接转化 | 第30页 |
| ·菌落PCR检测及测序 | 第30页 |
| ·实验结果 | 第30-34页 |
| ·DNA/RNA的提取 | 第30页 |
| ·鮸鱼NKEF-A基因的克隆 | 第30-31页 |
| ·鮸鱼NKEF-A基因的序列拼装与提交 | 第31页 |
| ·鮸鱼NKEF-A基因结构分析 | 第31页 |
| ·鮸鱼NKEF-A氨基酸序列比对分析 | 第31-34页 |
| ·鮸鱼NKEF-A进化树构建 | 第34页 |
| ·讨论 | 第34-37页 |
| ·鮸鱼NKEF-A基因的克隆 | 第34-36页 |
| ·鮸鱼NKEF-A基因氨基酸序列比对及系统发育树 | 第36-37页 |
| 第三章 鮸鱼NKEF-A基因的表达分析 | 第37-42页 |
| ·实验材料与方法 | 第37-38页 |
| ·实验材料的采集 | 第37页 |
| ·实验方法 | 第37-38页 |
| ·实验结果 | 第38-40页 |
| ·NKEF-A基因在鮸鱼不同组织中的表达 | 第38-39页 |
| ·鳗弧菌侵染后NKEF-A基因在组织中的表达 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 鮸鱼NKEF-A基因蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备 | 第42-55页 |
| ·鮸鱼克隆载体pMD-NKEF-A质粒的构建 | 第42-47页 |
| ·材料和方法 | 第42-45页 |
| ·实验结果 | 第45-47页 |
| ·重组表达载体pET-NKEF质粒的构建 | 第47-49页 |
| ·实验方法 | 第47-48页 |
| ·实验结果 | 第48-49页 |
| ·重组质粒pET-NKEF的诱导表达 | 第49-52页 |
| ·实验方法 | 第49-50页 |
| ·实验结果 | 第50-52页 |
| ·多克隆抗体制备 | 第52-53页 |
| ·实验方法 | 第52页 |
| ·Westernblot分析 | 第52-53页 |
| ·实验结果 | 第53页 |
| ·讨论 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 在读期间发表的学术论文及研究成果 | 第65-66页 |
| 附表 | 第66-67页 |