| 中国农业科学院博士学位论文评阅人、答辩委员会签名表 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-18页 |
| 英文缩略表 | 第18-19页 |
| 第一章 引言 | 第19-34页 |
| ·棉花黄萎病的研究进展 | 第19-25页 |
| ·轮枝菌属的概述 | 第19-20页 |
| ·大丽轮枝菌的形态 | 第20-21页 |
| ·棉花黄萎病原菌的分类和鉴定 | 第21页 |
| ·棉花黄萎病的危害 | 第21-22页 |
| ·棉黄萎病的症状 | 第22-23页 |
| ·棉花黄萎病的发病条件 | 第23-24页 |
| ·棉花黄萎病的发病机理 | 第24-25页 |
| ·棉花黄萎病防治工作的研究进展 | 第25-28页 |
| ·棉花黄萎病的防治方法 | 第25-26页 |
| ·在黄萎病原菌遗传变异研究中分子生物学技术的应用 | 第26-28页 |
| ·基因功能验证的研究进展 | 第28-32页 |
| ·RNAi 的研究进展 | 第28页 |
| ·病毒诱导的基因沉默的研究进展 | 第28-30页 |
| ·寄主诱导的基因沉默的研究进展 | 第30-31页 |
| ·HIGS 策略的优点 | 第31-32页 |
| ·本文的目的、意义和技术路线 | 第32-34页 |
| ·目的和意义 | 第32-33页 |
| ·技术路线 | 第33-34页 |
| 第二章 材料与方法 | 第34-50页 |
| ·实验材料和方法 | 第34页 |
| ·植物材料 | 第34页 |
| ·病原菌 | 第34页 |
| ·实验菌株和病毒载体 | 第34页 |
| ·实验试剂 | 第34页 |
| ·试验方法 | 第34-50页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第34-35页 |
| ·cDNA 单链的合成 | 第35-36页 |
| ·VIGS 片段的引物信息 | 第36-40页 |
| ·PCR 凝胶产物的回收纯化 | 第40页 |
| ·干扰片段克隆载体的构建 | 第40页 |
| ·大肠杆菌 DH5α感受态的制备 | 第40-41页 |
| ·大肠杆菌的热激转化 | 第41页 |
| ·质粒的提取 | 第41-42页 |
| ·阳性克隆载体的验证 | 第42页 |
| ·RNAi 载体构建 | 第42页 |
| ·根癌农杆菌电击感受态细胞的制备 | 第42-43页 |
| ·根癌农杆菌的电击转化 | 第43页 |
| ·本氏烟草农杆菌的注射 | 第43页 |
| ·PDA 培养基的配制 | 第43-44页 |
| ·CM 培养基的配制 | 第44页 |
| ·大丽轮枝菌孢子的计数方法 | 第44页 |
| ·大丽轮枝菌接菌方式的验证 | 第44页 |
| ·发病植株中病原菌的确定 | 第44-45页 |
| ·本氏烟草的病情指数统计 | 第45页 |
| ·本氏烟草叶片的台盼蓝染色 | 第45-46页 |
| ·DNA 的提取 | 第46页 |
| ·真菌生物量的测定 | 第46-47页 |
| ·靶标基因的表达量分析 | 第47页 |
| ·Gateway 干扰片段的引物信息 | 第47-48页 |
| ·BP 反应 | 第48页 |
| ·LR 反应 | 第48页 |
| ·农杆菌的活化 | 第48页 |
| ·本氏烟草的遗传转化 | 第48-50页 |
| 第三章 大丽轮枝菌蛋白序列分析 | 第50-74页 |
| ·对数据库蛋白序列进行统计分析 | 第50-73页 |
| ·病原真菌通道类蛋白相关信息 | 第51-52页 |
| ·病原真菌细胞壁合成与降解类蛋白信息 | 第52-53页 |
| ·病原真菌载体类蛋白相关信息 | 第53-54页 |
| ·病原真菌细胞周期类蛋白相关信息 | 第54-55页 |
| ·病原真菌几丁质类蛋白相关信息 | 第55-56页 |
| ·病原真菌脂肪酸类蛋白相关信息 | 第56页 |
| ·病原真菌叶酸类蛋白相关信息 | 第56-57页 |
| ·病原真菌细胞分配类蛋白相关信息 | 第57-58页 |
| ·病原真菌抗性蛋白类蛋白相关信息 | 第58-59页 |
| ·病原真菌分泌蛋白类蛋白相关信息 | 第59页 |
| ·病原真菌信号转导类蛋白相关信息 | 第59-61页 |
| ·病原真菌毒素类蛋白相关信息 | 第61页 |
| ·病原真菌表面类蛋白相关信息 | 第61-62页 |
| ·病原真菌受体类蛋白相关信息 | 第62-63页 |
| ·病原真菌蛋白酶类蛋白相关信息 | 第63-64页 |
| ·病原真菌糖代谢类类蛋白相关信息 | 第64-66页 |
| ·病原真菌囊泡类蛋白相关信息 | 第66页 |
| ·病原真菌锚蛋白类蛋白相关信息 | 第66-67页 |
| ·病原真菌辅酶 A（-COA）类蛋白相关信息 | 第67-68页 |
| ·病原真菌脱水酶类蛋白相关信息 | 第68页 |
| ·病原真菌激酶类蛋白相关信息 | 第68-69页 |
| ·病原真菌 NADPH 类蛋白相关信息 | 第69-70页 |
| ·病原真菌核糖体类蛋白相关信息 | 第70-71页 |
| ·病原真菌合酶类蛋白相关信息 | 第71页 |
| ·病原真菌转移酶类蛋白相关信息 | 第71-72页 |
| ·病原真菌移位酶类蛋白相关信息 | 第72-73页 |
| ·讨论 | 第73-74页 |
| 第四章 HIGS 体系的建立 | 第74-90页 |
| ·结果与分析 | 第74-88页 |
| ·大丽轮枝菌 RNA 的提取 | 第74页 |
| ·大丽轮枝菌靶标基因的克隆 | 第74-75页 |
| ·大丽轮枝菌干扰载体的构建 | 第75-77页 |
| ·不同浓度以及方式接菌后本氏烟草的表型 | 第77页 |
| ·发病植株中病原菌的验证 | 第77-78页 |
| ·本氏烟草农杆菌的注射 | 第78-79页 |
| ·本氏烟草的病情指数分析 | 第79-82页 |
| ·本氏烟草的抗性反应型统计 | 第82-86页 |
| ·发病植株中真菌的生物量分析 | 第86-87页 |
| ·本氏烟草叶片的台盼蓝染色 | 第87页 |
| ·靶标基因的转录水平分析 | 第87-88页 |
| ·讨论 | 第88-90页 |
| 第五章 大丽轮枝菌致病关键基因分析 | 第90-98页 |
| ·结果与分析 | 第90-96页 |
| ·病原菌能量代谢类相关基因的研究进展 | 第90-92页 |
| ·病原菌糖代谢类相关基因的研究进展 | 第92-94页 |
| ·病原菌蛋白代谢类相关基因的研究进展 | 第94-95页 |
| ·病真菌自身抗性基因的研究进展 | 第95-96页 |
| ·病原菌相关基因的研究进展 | 第96页 |
| ·讨论 | 第96-98页 |
| 第六章 病原菌致病基因干扰载体的构建和烟草的遗传转化 | 第98-102页 |
| ·结果与分析 | 第98-101页 |
| ·大丽轮枝菌靶标基因的生物学分析 | 第98-99页 |
| ·靶标片段的克隆 | 第99页 |
| ·Gateway 干扰载体的构建 | 第99-100页 |
| ·本氏烟草的遗传转化 | 第100-101页 |
| ·讨论 | 第101-102页 |
| 第七章 全文结论 | 第102-103页 |
| 参考文献 | 第103-116页 |
| 致谢 | 第116-118页 |
| 作者简历 | 第118-119页 |