中文摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-21页 |
1 蜕皮激素与保幼激素 | 第11-12页 |
2 蜕皮激素作用靶标 | 第12-14页 |
·EcR | 第13页 |
·USP | 第13-14页 |
·EcR/USP与蜕皮激素信号转导 | 第14页 |
3 蜕皮转录因子 | 第14-18页 |
·激素接受子3(HR3) | 第15-16页 |
·FTZ-F1 | 第16-17页 |
·E74 | 第17页 |
·BR-C,E75 | 第17-18页 |
4 保幼激素酯酶 | 第18页 |
5 研究目的以及意义 | 第18-21页 |
第二章 材料与方法 | 第21-31页 |
1 供试昆虫 | 第21页 |
2 主要试剂与耗材 | 第21页 |
3 主要仪器 | 第21页 |
4 基因克隆 | 第21-25页 |
·总RNA提取 | 第21-22页 |
·cDNA合成 | 第22页 |
·PCR扩增 | 第22-23页 |
·PCR产物纯化 | 第23页 |
·连接 | 第23-24页 |
·转化与涂板 | 第24页 |
·阳性克隆筛选 | 第24-25页 |
·测序 | 第25页 |
·序列分析 | 第25页 |
5 实时定量PCR | 第25-27页 |
·总RNA提取及cDNA合成 | 第25页 |
·引物设计 | 第25-26页 |
·实时荧光定量PCR | 第26页 |
·实时荧光定量PCR反应扩增效率的测定 | 第26-27页 |
6 RNA干扰 | 第27-30页 |
·引物设计 | 第27页 |
·模板DNA的获得 | 第27-28页 |
·dsRNA的体外转录合成 | 第28-29页 |
·dsRNA的注射 | 第29页 |
·RNAi效率的检测 | 第29-30页 |
7 蜕皮相关基因表达规律研究 | 第30-31页 |
第三章 结果与分析 | 第31-49页 |
1 PCR产物熔解曲线和扩增效率一致性分析 | 第31-33页 |
2 蜕皮相关基因在棉铃虫5龄和6龄幼虫的表达规律 | 第33-36页 |
·EcR与USP基因 | 第33-34页 |
·E74、JHE、HR3与FTZ-F1基因 | 第34-36页 |
3 RNAi对蜕皮相关基因表达的影响 | 第36-44页 |
·EcR的沉默对蜕皮相关基因表达的影响 | 第37-38页 |
·USP的沉默对蜕皮相关基因表达的影响 | 第38-40页 |
·EcR与USP同时沉默对蜕皮相关基因的影响 | 第40-42页 |
·FTZ-F1的沉默对蜕皮相关基因表达的影响 | 第42-44页 |
4 EcR、USP、FTZ-F1的功能研究 | 第44-49页 |
·EcR的沉默对幼虫的影响 | 第44页 |
·USP表达下调对幼虫的影响 | 第44-45页 |
·EcR与USP同时下调对幼虫的影响 | 第45-46页 |
·FTZ-F1表达下调对幼虫的影响 | 第46-49页 |
第四章 讨论 | 第49-57页 |
1 蜕皮相关基因表达规律 | 第49-52页 |
·EcR与USP的表达动态 | 第49-50页 |
·E74与JHE的表达动态 | 第50-51页 |
·HR3与FTZ-F1的表达动态 | 第51-52页 |
2 蜕皮相关基因的相互影响 | 第52-53页 |
3 EcR、USP与FTZ-F1可作为害虫防治的靶标基因 | 第53-57页 |
全文总结 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-69页 |
致谢 | 第69页 |