| 致谢 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-32页 |
| ·黄海绿潮的研究进展 | 第12-17页 |
| ·绿潮概述 | 第12-13页 |
| ·黄海绿潮研究进展 | 第13-17页 |
| ·黄海绿潮爆发的环境因素 | 第14-15页 |
| ·漂浮浒苔的遗传分析 | 第15-16页 |
| ·漂浮浒苔的生物学研究 | 第16-17页 |
| ·漂浮浒苔研究遇到的问题 | 第17页 |
| ·海藻基因工程的研究进展 | 第17-26页 |
| ·海藻遗传转化的方法 | 第18-21页 |
| ·基因枪法 | 第18页 |
| ·电击法 | 第18页 |
| ·玻璃珠法 | 第18-19页 |
| ·聚乙二醇法 | 第19页 |
| ·碳化硅晶丝法 | 第19页 |
| ·显微注射法 | 第19页 |
| ·人工转座子法 | 第19-20页 |
| ·重组真核藻类病毒作为转化载体 | 第20-21页 |
| ·海藻基因工程的载体元件 | 第21-23页 |
| ·启动子元件 | 第21-22页 |
| ·报告基因 | 第22-23页 |
| ·海藻再生方式的研究 | 第23-24页 |
| ·愈伤组织 | 第23页 |
| ·原生质体 | 第23-24页 |
| ·配子介导 | 第24页 |
| ·海藻筛选方法的研究 | 第24-26页 |
| ·海藻遗传转化体系的应用 | 第26页 |
| ·浒苔生活史与组织培养研究进展 | 第26-31页 |
| ·浒苔生活史研究 | 第26-28页 |
| ·浒苔生活史与组织培养研究进展 | 第28页 |
| ·石莼属原生质体制备与再生的研究 | 第28-31页 |
| ·本文研究内容和意义 | 第31-32页 |
| 第二章 浒苔单克隆材料的分离与高效增殖 | 第32-45页 |
| ·材料与方法 | 第32-38页 |
| ·主要仪器 | 第32页 |
| ·单藻株的分离与培养 | 第32-33页 |
| ·浒苔单株的分子鉴定 | 第33-36页 |
| ·浒苔基因组 DNA 的提取 | 第33页 |
| ·浒苔 ITS 序列的 PCR 扩增 | 第33-34页 |
| ·胶回收 PCR 产物 | 第34-35页 |
| ·浒苔 ITS 回收序列连接 T 载体 | 第35页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第35页 |
| ·重组质粒转化 E. coli 感受态细胞 | 第35-36页 |
| ·E. coli 阳性克隆的筛选与 PCR 检测 | 第36页 |
| ·序列比对与构建系统进化树 | 第36页 |
| ·利用水蚤去除浒苔幼苗的污染杂藻 | 第36-37页 |
| ·水蚤的采集与分离 | 第37页 |
| ·水蚤的电镜观察 | 第37页 |
| ·水蚤的分子鉴定 | 第37页 |
| ·水蚤清除浒苔、石莼幼苗的污染微藻 | 第37页 |
| ·浒苔单克隆藻株的营养增殖与生长曲线的测定 | 第37-38页 |
| ·结果 | 第38-42页 |
| ·浒苔 ITS 序列的克隆和比对 | 第38-39页 |
| ·水蚤对污染杂藻的去除及其分子鉴定 | 第39-42页 |
| ·水蚤的扫描电镜观察 | 第39-40页 |
| ·水蚤对污染杂藻的去除 | 第40页 |
| ·水蚤的分子鉴定 | 第40-42页 |
| ·浒苔的增殖与生长曲线的测定 | 第42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| ·本章小结 | 第44-45页 |
| 第三章 浒苔三种单细胞成株再生方式的研究 | 第45-62页 |
| ·材料与方法 | 第45-51页 |
| ·主要仪器 | 第45页 |
| ·浒苔单克隆藻株材料 | 第45-46页 |
| ·主要试剂 | 第46-47页 |
| ·酶解液 | 第46页 |
| ·原生质体活力鉴定试剂 | 第46页 |
| ·细胞壁残留检测试剂 | 第46-47页 |
| ·浒苔生殖细胞的诱导放散与萌发 | 第47页 |
| ·浒苔营养细胞的原位萌发 | 第47页 |
| ·浒苔原生质体的酶解制备 | 第47-49页 |
| ·原生质体的计数与检测 | 第49页 |
| ·酶解条件的优化 | 第49-51页 |
| ·酶解体系对酶解得率的影响 | 第49页 |
| ·酶解时间对酶解得率的影响 | 第49页 |
| ·纤维素酶浓度对酶解得率的影响 | 第49-50页 |
| ·浒苔生物量对酶解得率的影响 | 第50页 |
| ·浒苔生理状态对酶解得率的影响 | 第50-51页 |
| ·浒苔原生质体的再生 | 第51页 |
| ·结果与讨论 | 第51-61页 |
| ·浒苔生殖细胞的诱导放散与萌发 | 第51-53页 |
| ·浒苔营养细胞的原位萌发 | 第53-54页 |
| ·浒苔原生质体的酶解制备 | 第54-55页 |
| ·原生质体的检测 | 第55-56页 |
| ·酶解条件的优化 | 第56-60页 |
| ·酶解体系对酶解得率的影响 | 第56页 |
| ·酶解时间对酶解得率的影响 | 第56-57页 |
| ·纤维素酶浓度对酶解得率的影响 | 第57页 |
| ·浒苔起始生物量对酶解得率的影响 | 第57-58页 |
| ·浒苔生理状态对酶解得率的影响 | 第58-60页 |
| ·原生质体的再生 | 第60-61页 |
| ·结论 | 第61页 |
| ·本章小结 | 第61-62页 |
| 第四章 外源基因导入方法的研究 | 第62-74页 |
| ·材料与方法 | 第62-68页 |
| ·主要仪器与耗材 | 第62页 |
| ·浒苔与 E. coli 菌株 | 第62-63页 |
| ·培养基与试剂 | 第63页 |
| ·质粒 | 第63-66页 |
| ·三种转化质粒 | 第63-64页 |
| ·转化质粒的制备 | 第64-65页 |
| ·质粒浓度与纯度的定量测定 | 第65-66页 |
| ·基因枪转化 | 第66-67页 |
| ·浒苔受体材料的制备 | 第66页 |
| ·微粒子弹的制备 | 第66页 |
| ·基因枪操作 | 第66-67页 |
| ·转化后材料恢复与培养 | 第67页 |
| ·玻璃珠法转化 | 第67页 |
| ·玻璃珠的预处理 | 第67页 |
| ·玻璃珠转化 | 第67页 |
| ·lacZ 组织化学染色 | 第67页 |
| ·GUS 组织化学染色 | 第67-68页 |
| ·结果 | 第68-71页 |
| ·基因枪法介导报告基因 GUS 在浒苔管状藻体营养细胞中的瞬间表达 | 第68-69页 |
| ·基因枪法介导报告基因 lacZ 在浒苔管状藻体营养细胞中的瞬间表达 | 第69页 |
| ·基因枪法介导 GUS 和 lacZ 基因在浒苔原位萌发再生藻株中的表达 | 第69-71页 |
| ·玻璃珠法介导转化浒苔原生质体 | 第71页 |
| ·讨论 | 第71-73页 |
| ·本章小结 | 第73-74页 |
| 第五章 浒苔再生苗对不同选择试剂的敏感性研究 | 第74-84页 |
| ·材料与方法 | 第74-77页 |
| ·主要仪器与耗材 | 第74页 |
| ·漂浮浒苔与 E. coli 菌株 | 第74-75页 |
| ·试剂与培养基 | 第75页 |
| ·原生质体的制备与再生 | 第75页 |
| ·选择试剂的初筛 | 第75页 |
| ·草丁膦的半致死剂量（LD50）及 95%可信限的计算 | 第75-76页 |
| ·LD50差异的显著性检验 | 第76页 |
| ·质粒 | 第76-77页 |
| ·pSVB 质粒 | 第76-77页 |
| ·转化质粒的制备 | 第77页 |
| ·质粒导入与再生 | 第77页 |
| ·结果 | 第77-82页 |
| ·初筛结果 | 第77-79页 |
| ·浒苔对草丁膦的敏感性 | 第79页 |
| ·光周期对草丁膦敏感性的影响 | 第79-81页 |
| ·pSVB 质粒导入材料的再生 | 第81-82页 |
| ·讨论 | 第82-83页 |
| ·本章小结 | 第83-84页 |
| 结论 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-97页 |
| 附录 | 第97-98页 |
| 学术论文与研究成果 | 第98页 |
