| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-31页 |
| ·果实中色素组成 | 第14-17页 |
| ·叶绿素 | 第14-15页 |
| ·类胡萝卜素 | 第15页 |
| ·花青苷 | 第15-17页 |
| ·果实花青苷的生物合成 | 第17-26页 |
| ·花青苷合成相关结构基因 | 第19-21页 |
| ·花青苷合成调节基因 | 第21-24页 |
| ·影响果实花青苷合成的因素 | 第24-26页 |
| ·类胡萝卜素的生物合成 | 第26-29页 |
| ·类胡萝卜素的生物途径 | 第26-27页 |
| ·植物类胡萝卜素生物主要合成酶及基因 | 第27-29页 |
| ·SSH 技术及其在植物上的应用 | 第29-30页 |
| ·研究的目的意义 | 第30-31页 |
| 第二章 ‘澳洲青苹’花青苷合成相关基因表达分析 | 第31-50页 |
| ·试验材料 | 第31-32页 |
| ·植物材料 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31-32页 |
| ·主要仪器 | 第32页 |
| ·试验方法 | 第32-36页 |
| ·果实套袋处理 | 第32页 |
| ·果皮颜色的测定 | 第32-33页 |
| ·叶绿素与类胡萝素含量的测定 | 第33页 |
| ·果皮花青苷组分和含量测定 | 第33-34页 |
| ·多酚类物质的测定 | 第34页 |
| ·‘澳洲青苹’花青苷合成相关基因实时定量分析 | 第34-36页 |
| ·数据统计及分析 | 第36页 |
| ·结果与分析 | 第36-47页 |
| ·‘澳洲青苹’苹果着色过程中果皮色泽参数的变化 | 第36-38页 |
| ·着色期‘澳洲青苹’果皮中叶绿素与类胡萝卜素含量的变化 | 第38-39页 |
| ·着色期‘澳洲青苹’果皮花青苷种类和含量的变化 | 第39-41页 |
| ·解袋后‘澳洲青苹’果皮中多酚类物质种类及含量变化 | 第41-43页 |
| ·‘澳洲青苹’果皮花青苷合成相关基因表达分析 | 第43-47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| ·果实中花青苷种类 | 第47页 |
| ·套袋处理对‘澳洲青苹’果皮中色素含量的影响 | 第47-48页 |
| ·‘澳洲青苹’果实着色期花青苷合成相关基因的表达 | 第48-49页 |
| ·小结 | 第49-50页 |
| 第三章 ‘澳洲青苹’套袋处理后果皮 SSH 文库构建 | 第50-62页 |
| ·试验材料 | 第50-51页 |
| ·植物材料 | 第50页 |
| ·菌株 | 第50页 |
| ·主要试剂 | 第50页 |
| ·主要仪器 | 第50-51页 |
| ·试验方法 | 第51-53页 |
| ·RNA 提取及 mRNA 分离纯化 | 第51页 |
| ·‘澳洲青苹’果皮 SSH-cDNA 文库构建 | 第51页 |
| ·PCR 产物连接 | 第51页 |
| ·连接产物转化 | 第51页 |
| ·蓝白斑筛选与鉴定 | 第51页 |
| ·序列分析和提交 | 第51-52页 |
| ·SSH-cDNA 文库筛选基因表达分析 | 第52-53页 |
| ·数据统计及分析 | 第53页 |
| ·结果与分析 | 第53-59页 |
| ·果皮总 RNA 的质量检测 | 第53页 |
| ·消减杂交结果 | 第53-54页 |
| ·PCR 产物转化 | 第54-55页 |
| ·阳性克隆 PCR 检测 | 第55页 |
| ·‘澳洲青苹’果皮 SSH-cDNA 文库 EST 序列分析 | 第55-58页 |
| ·SSH-cDNA 文库筛选基因表达分析 | 第58-59页 |
| ·讨论 | 第59-61页 |
| ·SSH 技术在苹果着色研究中的应用 | 第59-60页 |
| ·‘澳洲青苹’色素合成相关基因 | 第60-61页 |
| ·‘澳洲青苹’成熟相关基因 | 第61页 |
| ·小结 | 第61-62页 |
| 第四章 ‘澳洲青苹’PSY 基因的克隆及功能分析 | 第62-84页 |
| ·试验材料 | 第62-63页 |
| ·植物材料 | 第62页 |
| ·质粒和菌株 | 第62页 |
| ·主要试剂 | 第62页 |
| ·主要仪器 | 第62页 |
| ·引物合成与测序 | 第62-63页 |
| ·试验方法 | 第63-68页 |
| ·苹果 PSY 基因克隆 | 第63-64页 |
| ·苹果 PSY 蛋白生物信息学分析 | 第64页 |
| ·PSY 组织特异性表达 | 第64页 |
| ·pCAMBIA1302-PSY 植物表达载体构建 | 第64-66页 |
| ·农杆菌介导 MdPSY 转化番茄 | 第66-67页 |
| ·MdPSY 转基因番茄植株分子鉴定 | 第67页 |
| ·qRT-PCR 检测转基因番茄内源类胡萝卜素合成相关基因的表达 | 第67-68页 |
| ·结果与分析 | 第68-80页 |
| ·苹果 PSY 基因的克隆 | 第68-69页 |
| ·苹果 PSY 基因序列分析 | 第69-73页 |
| ·MdPSY 基因生物信息学分析 | 第73-74页 |
| ·MdPSY 基因组织特异性表达 | 第74-75页 |
| ·CAMBIA1302-PSY 植物表达载体构建 | 第75-76页 |
| ·农杆菌介导番茄遗传转化 | 第76-77页 |
| ·转基因番茄 T0代植株的分子鉴定 | 第77-78页 |
| ·转基因番茄植株中类胡萝卜素合成相关基因的表达分析 | 第78-80页 |
| ·讨论 | 第80-83页 |
| ·植物类胡萝卜素功能及生物合成 | 第80-81页 |
| ·MdPSY 蛋白结构特征 | 第81-82页 |
| ·植物类胡萝卜素转录调控 | 第82页 |
| ·外源基因对番茄类胡萝卜素代谢的影响 | 第82-83页 |
| ·小结 | 第83-84页 |
| 第五章 ‘澳洲青苹’PDS、LCYB 基因的克隆及生物信息学分析 | 第84-103页 |
| ·试验材料 | 第84-85页 |
| ·植物材料 | 第84页 |
| ·质粒和菌株 | 第84页 |
| ·主要试剂 | 第84页 |
| ·主要仪器 | 第84页 |
| ·引物合成与测序 | 第84-85页 |
| ·试验方法 | 第85-86页 |
| ·苹果 PDS 和 LCYB 基因克隆 | 第85-86页 |
| ·MdPDS 和 MdLCYB 基因生物信息学分析 | 第86页 |
| ·MdPDS 和 MdLCYB 基因表达分析 | 第86页 |
| ·结果与分析 | 第86-100页 |
| ·苹果 PDS 基因克隆 | 第86-93页 |
| ·苹果 LCYB 基因克隆 | 第93-99页 |
| ·MdPDS 和 MdLCYB 基因表达分析 | 第99-100页 |
| ·讨论 | 第100-102页 |
| ·类胡萝卜素对果实颜色的影响 | 第100页 |
| ·MdPDS 和 MdLCYB 蛋白结构特征 | 第100-101页 |
| ·MdPDS 和 MdLCYB 基因表达 | 第101-102页 |
| ·小结 | 第102-103页 |
| 第六章 结论与创新点 | 第103-104页 |
| ·结论 | 第103页 |
| ·创新点 | 第103-104页 |
| 附录 I | 第104-105页 |
| 参考文献 | 第105-121页 |
| 致谢 | 第121-122页 |
| 作者简介 | 第122页 |
