| 符号说明 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 1 引言 | 第13-25页 |
| ·草鱼 | 第13页 |
| ·鱼类免疫系统及相关基因的研究现状 | 第13-21页 |
| ·免疫器官和组织 | 第14页 |
| ·免疫细胞 | 第14页 |
| ·体液免疫因子 | 第14-15页 |
| ·主要组织相容性复合体(MAJOR HISTOCOMPATIBILITY COMPLEX, MHC) | 第15-20页 |
| ·组织蛋白酶 D（CATHEPSIN D）基因 | 第20-21页 |
| ·试验技术应用 | 第21-24页 |
| ·快速克隆 CDNA 末端技术(RAPID AMPLIFICATION OF CDNA ENDS, RACE) | 第21-22页 |
| ·巢式 PCR（NEST-PCR）和降落 PCR（TOUCH DOWN PCR） | 第22-23页 |
| ·实时荧光定量 PCR（REAL TIME QUANTIATIVE PCR） | 第23-24页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-35页 |
| ·试验材料 | 第25-27页 |
| ·试验动物 | 第25页 |
| ·嗜水气单胞菌 | 第25页 |
| ·主要仪器设备 | 第25-26页 |
| ·主要试剂 | 第26页 |
| ·常用溶液配制 | 第26-27页 |
| ·试验方法 | 第27-35页 |
| ·引物合成 | 第27页 |
| ·总 RNA 的提取与质量检测 | 第27-28页 |
| ·草鱼基因组 DNA 的提取及检测 | 第28-29页 |
| ·反转录合成 cDNA | 第29页 |
| ·RACE 扩增目的基因全长 cDNA 序列 | 第29-31页 |
| ·草鱼 MHC II B 基因组序列扩增 | 第31页 |
| ·PCR 产物片段回收 | 第31-32页 |
| ·PCR 产物与载体的连接 | 第32页 |
| ·大肠杆菌的转化及测序 | 第32-33页 |
| ·生物信息学分析 | 第33页 |
| ·草鱼 MHC II B 基因多态性分析 | 第33页 |
| ·人工感染草鱼试验 | 第33-34页 |
| ·荧光定量 PCR | 第34-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-52页 |
| ·实时荧光定量 PCR | 第35-36页 |
| ·草鱼 MHC II B 基因实验结果 | 第36-44页 |
| ·草鱼 MHC II B 基因 cDNA 的克隆及序列分析 | 第36-37页 |
| ·草鱼 MHC II B 基因的多态性分析 | 第37-40页 |
| ·草鱼 MHC II B 进化树分析 | 第40-41页 |
| ·草鱼 MHC II B 基因蛋白质空间结构 | 第41-42页 |
| ·草鱼 MHC II B 基因 mRNA 水平分析 | 第42-44页 |
| ·草鱼 CATHEPSIN D 基因试验结果 | 第44-52页 |
| ·草鱼 Cathepsin D 基因 cDNA 的克隆及序列分析 | 第44-46页 |
| ·草鱼 Cathepsin D 基因序列比对和进化树分析 | 第46-49页 |
| ·草鱼 Cathepsin D 基因 mRNA 表达分析 | 第49-52页 |
| 4 讨论 | 第52-60页 |
| ·草鱼 MHC II B 基因 | 第53-57页 |
| ·MHC II B 分子克隆与序列分析 | 第53-54页 |
| ·草鱼 MHC II B 基因的多态性 | 第54-55页 |
| ·MHC II B 基因的定量表达 | 第55-57页 |
| ·草鱼 CATHEPSIN D 基因 | 第57-60页 |
| ·草鱼 Cathepsin D 基因的克隆及分析 | 第57-59页 |
| ·草鱼 Cathepsin D 基因荧光定量分析 | 第59-60页 |
| 5 结论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第75页 |
