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小麦抗黄矮病关键基因TiRB分离和功能研究

摘要第1-8页
Abstract第8-17页
第一章 文献综述第17-28页
   ·植物抗病毒分子机制第17-23页
     ·植物病毒第17-18页
     ·R 基因介导的抗病反应第18-22页
     ·RNA 沉默植物抗病毒作用机制第22-23页
   ·小麦黄矮病研究进展第23-26页
     ·小麦黄矮病简介第23页
     ·大麦黄矮病毒结构和传播特性第23-24页
     ·抗小麦黄矮病研究进展第24-26页
   ·研究的目的意义与技术路线第26-28页
第二章 利用 Affymetrix 小麦基因组芯片分析小麦接种 BYDV 后基因转录谱第28-56页
   ·材料与方法第28-33页
     ·材料与试剂第28-29页
     ·实验方法第29-33页
   ·结果与分析第33-53页
     ·接种 BYDV 不同时间后,YW642 和中 8601 体内病毒积累浓度分析第33-34页
     ·芯片杂交信号的质量监控第34-35页
     ·qRT-PCR 验证芯片数据可靠性第35-37页
     ·本底水平 YW642 与中 8601 之间转录谱差异分析第37-39页
     ·苗期 YW642 和中 8601 转录谱差异分析第39-48页
     ·成熟期 YW642 和中 8601 转录谱差异分析第48-53页
   ·讨论第53-56页
第三章 抗黄矮病候选基因 TiRB 筛选及全长 cDNA 序列的克隆第56-69页
   ·实验材料与方法第56-63页
     ·实验材料第56-57页
     ·实验方法第57-63页
   ·结果与分析第63-67页
     ·比较基因组学方法获得 TiRB 基因保守域第63页
     ·TiRB 基因 LRR 保守域片段的分离第63页
     ·RACE 法获得 TiRB 基因的 3’端和 5’端序列第63-64页
     ·TiRB 基因全长 cDNA 序列的获得第64页
     ·TiRB 序列分析第64-66页
     ·TiRB 抗黄矮病关联分析第66-67页
   ·讨论第67-69页
第四章 抗黄矮病重要基因 TiRB 的功能验证第69-85页
   ·实验材料与方法第69-74页
     ·实验材料与试剂第69-71页
     ·实验方法第71-74页
   ·结果与分析第74-82页
     ·VIGS 载体构建第74页
     ·VIGS 载体线性化及体外转录第74-75页
     ·接种 BSMV 病毒及 BYDV 病毒第75页
     ·基因沉默效果分析第75-76页
     ·VIGS 表型鉴定第76-77页
     ·TiRB 过量表达载体构建及转化受体小麦第77页
     ·TiRB-RNAi 载体构建及转化受体小麦第77-78页
     ·TiRB 过量表达转基因植株 PCR 检测第78-79页
     ·过量表达 TiRB 转基因阳性植株表达分析第79页
     ·过量表达 TiRB 转基因阳性植株 Western 杂交分析第79页
     ·过量表达 TiRB 转基因阳性植株接种 BYDV 后表型鉴定第79-80页
     ·TiRB RNAi 转基因植株接种 PCR 鉴定第80-81页
     ·TiRB RNAi 转基因阳性植株表达分析第81页
     ·TiRB RNAi 转基因阳性植株接种 BYDV 后表型鉴定第81-82页
   ·讨论第82-85页
第五章 TiRB 分子生物学特性分析第85-98页
   ·材料与方法第85-91页
     ·材料第85-86页
     ·实验方法第86-91页
   ·结果与分析第91-96页
     ·TiRB 蛋白分布于胞质及胞核第91-93页
     ·酵母双杂交系统证明 TiRB 与 GAV-CP 互作第93-94页
     ·BiFC 证明 TiRB 与 GAV-CP 相互作用第94-95页
     ·TiRB 组织特异性表达分析结果第95页
     ·TiRB 受 BYDV 诱导表达分析结果第95-96页
     ·TiRB 响应激素表达分析结果第96页
   ·讨论第96-98页
第六章 全文结论第98-99页
   ·全文总结第98页
   ·全文创新点第98-99页
参考文献第99-117页
致谢第117-118页
作者简历第118-119页
附录第119-120页

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