摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-17页 |
第一章 文献综述 | 第17-28页 |
·植物抗病毒分子机制 | 第17-23页 |
·植物病毒 | 第17-18页 |
·R 基因介导的抗病反应 | 第18-22页 |
·RNA 沉默植物抗病毒作用机制 | 第22-23页 |
·小麦黄矮病研究进展 | 第23-26页 |
·小麦黄矮病简介 | 第23页 |
·大麦黄矮病毒结构和传播特性 | 第23-24页 |
·抗小麦黄矮病研究进展 | 第24-26页 |
·研究的目的意义与技术路线 | 第26-28页 |
第二章 利用 Affymetrix 小麦基因组芯片分析小麦接种 BYDV 后基因转录谱 | 第28-56页 |
·材料与方法 | 第28-33页 |
·材料与试剂 | 第28-29页 |
·实验方法 | 第29-33页 |
·结果与分析 | 第33-53页 |
·接种 BYDV 不同时间后,YW642 和中 8601 体内病毒积累浓度分析 | 第33-34页 |
·芯片杂交信号的质量监控 | 第34-35页 |
·qRT-PCR 验证芯片数据可靠性 | 第35-37页 |
·本底水平 YW642 与中 8601 之间转录谱差异分析 | 第37-39页 |
·苗期 YW642 和中 8601 转录谱差异分析 | 第39-48页 |
·成熟期 YW642 和中 8601 转录谱差异分析 | 第48-53页 |
·讨论 | 第53-56页 |
第三章 抗黄矮病候选基因 TiRB 筛选及全长 cDNA 序列的克隆 | 第56-69页 |
·实验材料与方法 | 第56-63页 |
·实验材料 | 第56-57页 |
·实验方法 | 第57-63页 |
·结果与分析 | 第63-67页 |
·比较基因组学方法获得 TiRB 基因保守域 | 第63页 |
·TiRB 基因 LRR 保守域片段的分离 | 第63页 |
·RACE 法获得 TiRB 基因的 3’端和 5’端序列 | 第63-64页 |
·TiRB 基因全长 cDNA 序列的获得 | 第64页 |
·TiRB 序列分析 | 第64-66页 |
·TiRB 抗黄矮病关联分析 | 第66-67页 |
·讨论 | 第67-69页 |
第四章 抗黄矮病重要基因 TiRB 的功能验证 | 第69-85页 |
·实验材料与方法 | 第69-74页 |
·实验材料与试剂 | 第69-71页 |
·实验方法 | 第71-74页 |
·结果与分析 | 第74-82页 |
·VIGS 载体构建 | 第74页 |
·VIGS 载体线性化及体外转录 | 第74-75页 |
·接种 BSMV 病毒及 BYDV 病毒 | 第75页 |
·基因沉默效果分析 | 第75-76页 |
·VIGS 表型鉴定 | 第76-77页 |
·TiRB 过量表达载体构建及转化受体小麦 | 第77页 |
·TiRB-RNAi 载体构建及转化受体小麦 | 第77-78页 |
·TiRB 过量表达转基因植株 PCR 检测 | 第78-79页 |
·过量表达 TiRB 转基因阳性植株表达分析 | 第79页 |
·过量表达 TiRB 转基因阳性植株 Western 杂交分析 | 第79页 |
·过量表达 TiRB 转基因阳性植株接种 BYDV 后表型鉴定 | 第79-80页 |
·TiRB RNAi 转基因植株接种 PCR 鉴定 | 第80-81页 |
·TiRB RNAi 转基因阳性植株表达分析 | 第81页 |
·TiRB RNAi 转基因阳性植株接种 BYDV 后表型鉴定 | 第81-82页 |
·讨论 | 第82-85页 |
第五章 TiRB 分子生物学特性分析 | 第85-98页 |
·材料与方法 | 第85-91页 |
·材料 | 第85-86页 |
·实验方法 | 第86-91页 |
·结果与分析 | 第91-96页 |
·TiRB 蛋白分布于胞质及胞核 | 第91-93页 |
·酵母双杂交系统证明 TiRB 与 GAV-CP 互作 | 第93-94页 |
·BiFC 证明 TiRB 与 GAV-CP 相互作用 | 第94-95页 |
·TiRB 组织特异性表达分析结果 | 第95页 |
·TiRB 受 BYDV 诱导表达分析结果 | 第95-96页 |
·TiRB 响应激素表达分析结果 | 第96页 |
·讨论 | 第96-98页 |
第六章 全文结论 | 第98-99页 |
·全文总结 | 第98页 |
·全文创新点 | 第98-99页 |
参考文献 | 第99-117页 |
致谢 | 第117-118页 |
作者简历 | 第118-119页 |
附录 | 第119-120页 |