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粗纹食道口线虫和哥伦比亚食道口线虫遗传多样性和分子分类研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-14页
文献综述第14-22页
 第一章 食道口线虫研究概况第14-22页
   ·羊食道口线虫第14-16页
     ·种类和分布第14页
     ·形态学与生活史第14-16页
   ·羊食道口线虫病第16-17页
     ·诊断第16-17页
     ·防治第17页
   ·PCR 技术在寄生虫学研究中的应用第17-19页
   ·食道口线虫分类学和分子遗传学研究第19-21页
     ·核糖体基因在食道口线虫研究中的应用第19-20页
     ·线粒体基因在食道口线虫研究中的应用第20-21页
   ·本研究的目的和意义第21-22页
试验研究第22-61页
 第二章 哥伦比亚食道口线虫与粗纹食道口线虫的鉴定及 ITS 序列多态性研究第22-31页
   ·材料与方法第22-26页
     ·样品第22页
     ·试剂和酶第22-23页
     ·溶液及其配制第23-24页
     ·主要仪器第24页
     ·形态学鉴定—乳酸透明法第24页
     ·样品材料的处理和 DNA 提取第24-25页
     ·引物合成第25页
     ·ITS 及 5.8S 序列的 PCR 扩增第25页
     ·琼脂糖凝胶电泳分析第25-26页
     ·DNA 测序与序列分析第26页
   ·结果第26-30页
     ·形态学鉴定第26-27页
     ·食道口线虫 ITS 序列的 PCR 扩增第27-28页
     ·食道口线虫 ITS 序列分析第28-30页
   ·讨论第30页
   ·小结第30-31页
 第三章 哥伦比亚食道口线虫特异 PCR 方法的建立第31-36页
   ·材料与方法第31-33页
     ·样品第31-32页
     ·试剂和酶第32页
     ·主要仪器第32页
     ·样品处理及 DNA 的提取第32页
     ·证明样品 DNA 有效的 PCR 扩增第32页
     ·特异 PCR 的建立及其优化第32页
     ·哥伦比亚食道口线虫特异性试验第32-33页
     ·哥伦比亚食道口线虫特异性 PCR 敏感性试验第33页
     ·特异 PCR 方法对不同地理区域食道口线虫感染的应用第33页
   ·结果第33-34页
     ·哥伦比亚食道口线虫特异 PCR 的优化第33页
     ·特异性试验结果第33-34页
     ·敏感性试验结果第34页
     ·特异 PCR 方法鉴定不同地理区域食道口线虫感染的应用第34页
   ·讨论第34-35页
   ·小结第35-36页
 第四章 粗纹食道口线虫线粒体 cox3、nad5 和 atp6 基因多态性研究第36-44页
   ·材料与方法第36-39页
     ·虫体样品第36页
     ·仪器及试剂第36-37页
     ·样品材料的处理和 DNA 提取第37-38页
     ·cox3 基因片段的 PCR 扩增第38页
     ·nad5 基因片段的 PCR 扩增第38-39页
     ·atp6 基因片段的 PCR 扩增第39页
     ·测序第39页
     ·DNA 序列分析第39页
   ·结果第39-42页
     ·PCR 扩增结果第39-41页
     ·测序结果及 DNA 序列分析结果第41页
     ·DNA 序列分析结果第41页
     ·nad5、cox3 和 atp6 基因序列的系统发育树第41-42页
   ·讨论第42-43页
   ·小结第43-44页
 第五章 粗纹食道口线虫和哥伦比亚食道口线虫线粒体基因组全序列分析第44-61页
   ·材料与方法第44-49页
     ·虫体样品第44页
     ·仪器第44页
     ·试剂和酶第44页
     ·溶液的配制第44-45页
     ·培养基的配制第45页
     ·样品处理及 DNA 的提取第45页
     ·样品 OASSF 和 OCHDF 序列扩增引物第45-46页
     ·样品 OASSF 和 OCHDF 序列扩增第46-47页
     ·PCR 产物的回收与纯化第47-48页
     ·纯化 PCR 产物的连接第48页
     ·转化第48-49页
     ·转化产物的克隆及菌液 PCR 鉴定第49页
     ·线粒体基因组序列和结构分析方法第49页
     ·基于线粒体基因组的线虫遗传进化分析第49页
   ·结果和分析第49-59页
     ·线粒体基因组的组成第49-54页
     ·蛋白质编码基因第54-57页
     ·tRNA 基因和 rRNA 基因第57-58页
     ·非编码区第58页
     ·基于线粒体基因组的线虫系统发育分析第58-59页
   ·讨论第59-60页
   ·小结第60-61页
结论第61-62页
参考文献第62-69页
附录1 粗纹食道口线虫和哥伦比亚食道口线虫ITS 序列比对结果第69-76页
   ·ITS-1 序列比对结果第69-72页
   ·5.8S 序列比对结果第72-73页
   ·ITS-2 序列比对结果第73-76页
附录2 粗纹食道口线虫线粒体三段基因序列比对结果第76-86页
   ·nad5 序列比对结果第76-79页
   ·atp6 序列比对结果第79-82页
   ·cox3 序列比对结果第82-86页
附录3 粗纹食道口线虫和哥伦比亚食道口线虫线粒体基因组第86-94页
   ·粗纹食道口线虫线粒体基因组序列第86-89页
   ·哥伦比亚食道口线虫线粒体基因组序列第89-94页
致谢第94-95页
作者简介第95页

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