| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-13页 |
| 缩略词 | 第13-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-29页 |
| ·酸性土壤的分布及铝的存在形态 | 第15-16页 |
| ·铝对植物的毒害 | 第16页 |
| ·植物抗铝的生理机制 | 第16-19页 |
| ·外部排斥机制 | 第16-18页 |
| ·内部耐受机制 | 第18-19页 |
| ·植物有机酸的分泌在植物抗铝中的作用 | 第19-24页 |
| ·有机酸分泌在植物抗铝中的作用 | 第19-20页 |
| ·控制有机酸分泌的有机酸通道蛋白 | 第20-21页 |
| ·转录因子调控分泌有机酸通道蛋白的表达 | 第21页 |
| ·质膜H~+-ATPase对有机酸分泌的调控作用 | 第21-23页 |
| ·14-3-3蛋白对质膜H~+ATPase活性和柠檬酸分析的调控 | 第23-24页 |
| ·逆境胁迫对14-3-3蛋白和质膜H~+-ATPase表达及质膜H~+-ATPase磷酸化水平的影响 | 第24-25页 |
| ·逆境胁迫对质膜H~+-ATPase表达的影响 | 第24-25页 |
| ·逆境胁迫对质膜H~+-ATPase磷酸化水平的影响 | 第25页 |
| ·逆境胁迫对14-3-3蛋白表达的影响 | 第25页 |
| ·逆境信号分子对质膜H~+-ATPase活性的调控 | 第25-27页 |
| ·H_2O_2生理功能 | 第25-26页 |
| ·H_2O_2对质膜H~+-ATPase活性的调控 | 第26-27页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第27-29页 |
| 第二章 原核表达载体的构建和GST-14-3-3融合蛋白多克隆抗体的制备 | 第29-37页 |
| ·材料和方法 | 第29-34页 |
| ·菌种和质粒 | 第29页 |
| ·酶与试剂 | 第29页 |
| ·植物材料培养 | 第29页 |
| ·植物总RNA提取 | 第29-30页 |
| ·植物总RNA纯化 | 第30页 |
| ·PCR扩增SB中14-3-3基因 | 第30-31页 |
| ·DNA片段回收 | 第31页 |
| ·TA克隆 | 第31-32页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第32页 |
| ·重组蛋白表达条件的优化 | 第32-33页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第33页 |
| ·抗体的制备 | 第33-34页 |
| ·结果 | 第34-35页 |
| ·14-3-3重组蛋白的表达 | 第34-35页 |
| ·pGEX4T-14-3-3重组蛋白的纯化 | 第35页 |
| ·讨论 | 第35-37页 |
| 第三章 铝胁迫下SB根中产生的H_2O_2对SB铝耐受性的影响及作用机理分析 | 第37-47页 |
| ·材料与方法 | 第38-40页 |
| ·植物材料培养 | 第38页 |
| ·植物材料处理 | 第38页 |
| ·H_2O_2含量的测定 | 第38-39页 |
| ·柠檬酸含量的测定 | 第39页 |
| ·质膜的分离与纯化 | 第39页 |
| ·质膜纯度的检测和质膜H~+-ATPase活性的测定 | 第39-40页 |
| ·Western Blot和免疫共沉淀 | 第40页 |
| ·结果 | 第40-45页 |
| ·不同H_2O_2浓度处SB对其相对根生长率的影响 | 第40-41页 |
| ·不同处理下敏感型黑豆根部根相对伸长率变化和H_2O_2含量变化 | 第41-42页 |
| ·质膜ATP酶磷酸化水平及其与14-3-3蛋白互作水平的变化、质膜H~+ATPase活性变化和柠檬酸分泌量的变化 | 第42-43页 |
| ·FC、MgCl_2和铝同时处理下SB根部根相对伸长率变化和H_2O_2含量变化 | 第43-44页 |
| ·FC、MgCl_2和铝同时处理下SB根部质膜ATP酶磷酸化水平及其与14-3-3蛋白互作水平的变化、质膜H+ATPase活性变化和柠檬酸分泌量的变化 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| 第四章 铝胁迫下外源H_2O_2的预处理对SB植株生长的影响及作用机理分析 | 第47-62页 |
| ·材料和方法 | 第47-49页 |
| ·植物材料培养 | 第47-48页 |
| ·植物材料处理 | 第48页 |
| ·测定指标及方法 | 第48-49页 |
| ·结果 | 第49-59页 |
| ·不同浓度的H_2O_2预处理对SB耐铝能力的影响 | 第49-50页 |
| ·H_2O_2预处理对不同程度铝胁迫下SB的根长、鲜重、株高、叶面积以及根叶中总蛋白含量的影响 | 第50-51页 |
| ·铝胁迫下H_2O_2预处理SB根叶中H_2O_2和MDA含量的变化 | 第51-53页 |
| ·铝胁迫下H_2O_2预处理SB植株的SOD和POD活性变化 | 第53-54页 |
| ·H~+-ATPase活性变化、柠檬酸分泌量的变化和质膜ATP酶磷酸化水平及其与14-3-3蛋白互作水平的变化IP分析 | 第54-55页 |
| ·铝胁迫下H_2O_2预处理SB植株的基因表达分析 | 第55-57页 |
| ·铝胁迫下H_2O_2预处理SB根部14-3-3基因表达分析 | 第57-59页 |
| ·讨论 | 第59-62页 |
| 第五章 总结与展望 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 附录A 攻读硕士期间发表的论文 | 第72页 |
