| 致谢 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| 符号说明 | 第11-12页 |
| 文献综述 | 第12-25页 |
| 1 猪流感概述 | 第12-13页 |
| 2 猪流感的流行及历史回顾 | 第13页 |
| 3 猪流感病原学研究进展 | 第13-15页 |
| ·猪流感病毒分类地位及形态特征 | 第13-14页 |
| ·猪流感病毒理化特性 | 第14-15页 |
| ·热稳定性 | 第14-15页 |
| ·对紫外线的稳定性 | 第15页 |
| ·对化学试剂的稳定性 | 第15页 |
| ·猪流感病毒培养特性 | 第15页 |
| 4 猪流感病毒分子生物学研究 | 第15-25页 |
| ·猪流感病毒基因组结构特征 | 第15-16页 |
| ·猪流感病毒基因组及编码蛋白的结构和功能 | 第16-20页 |
| ·聚合酶基因 | 第17页 |
| ·HA 基因 | 第17-19页 |
| ·NA 基因 | 第19页 |
| ·NP 基因 | 第19-20页 |
| ·M 基因 | 第20页 |
| ·NS 基因 | 第20页 |
| ·猪流感种间传播机制 | 第20-22页 |
| ·猪流感病毒的感染复制机制 | 第22页 |
| ·猪流感病毒的变异 | 第22-25页 |
| ·抗原性变异 | 第23页 |
| ·抗原漂移 | 第23页 |
| ·抗原转变 | 第23页 |
| ·致病性变异 | 第23-25页 |
| 引言 | 第25-26页 |
| 试验一 猪流感病毒的分离及鉴定 | 第26-39页 |
| 1 材料和方法 | 第26-31页 |
| ·材料 | 第26页 |
| ·主要仪器设备 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26页 |
| ·试验动物 | 第26页 |
| ·试验方法 | 第26-31页 |
| ·病料样品的处理 | 第26页 |
| ·病毒的分离培养及纯化 | 第26-27页 |
| ·血凝试验（HA）及血凝抑制试验（HI） | 第27页 |
| ·中和试验 | 第27页 |
| ·RT-PCR 检测 | 第27-30页 |
| ·RNA 的提取步骤如下 | 第27页 |
| ·cDNA 的合成 | 第27页 |
| ·RT-PCR 扩增及琼脂糖凝胶电泳 | 第27-28页 |
| ·目的基因的克隆 | 第28页 |
| ·感受态细胞制备 | 第28-29页 |
| ·转化 | 第29页 |
| ·质粒提取（碱裂解法） | 第29-30页 |
| ·重组质粒 PCR 或酶切鉴定 | 第30页 |
| ·序列测定及分析 | 第30页 |
| ·鸡胚半数感染量（EID50）和半数致死量（ELD50）的测定 | 第30-31页 |
| ·理化试验 | 第31页 |
| ·乙醚敏感试验 | 第31页 |
| ·氯仿敏感性试验 | 第31页 |
| ·耐酸性试验 | 第31页 |
| 2 结果与分析 | 第31-37页 |
| ·病毒的分离结果 | 第31-32页 |
| ·两分离株 RT-PCR 结果： | 第32-34页 |
| ·病毒的鸡胚半数感染量（EID50）和半数致死量（ELD50）测定结果 | 第34-35页 |
| ·2 分离株的理化试验结果 | 第35-37页 |
| ·SW/HN/1/10 分离株理化试验结果 | 第35-36页 |
| ·病毒的耐酸性试验 | 第35页 |
| ·对乙醚的敏感性试验 | 第35页 |
| ·对氯仿的敏感性试验 | 第35页 |
| ·病毒热稳定性试验结果 | 第35-36页 |
| ·病毒感染力热稳定性试验 | 第36页 |
| ·SW/HN/405/10 分离株理化试验结果 | 第36-37页 |
| ·病毒的耐酸性试验 | 第36页 |
| ·对乙醚的敏感性试验 | 第36页 |
| ·对氯仿的敏感性试验 | 第36页 |
| ·病毒热稳定性试验结果 | 第36-37页 |
| ·病毒感染力热稳定性试验 | 第37页 |
| 3 讨论 | 第37-38页 |
| 4 结论 | 第38-39页 |
| 实验二 河南分离株全基因的克隆及遗传演化分析 | 第39-69页 |
| 1 材料与方法 | 第39-44页 |
| ·材料 | 第39-40页 |
| ·毒株 | 第39页 |
| ·主要仪器 | 第39页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第39页 |
| ·质粒与菌种 | 第39页 |
| ·试剂的配制 | 第39-40页 |
| ·琼脂糖电泳试剂的配制 | 第39-40页 |
| ·大肠杆菌转化用溶液 | 第40页 |
| ·试验方法 | 第40-44页 |
| ·病毒 RNA 的提取 | 第40页 |
| ·全基因的 RT-PCR 扩增 | 第40-42页 |
| ·cDNA 第一链合成 | 第40-41页 |
| ·PCR 扩增 | 第41-42页 |
| ·1%琼脂糖凝胶电泳 | 第42页 |
| ·2 株河南分离毒株全基因的克隆及鉴定 | 第42-44页 |
| ·RT-PCR 产物的纯化 | 第42页 |
| ·重组克隆质粒的构建 | 第42-43页 |
| ·连接产物的转化 | 第43页 |
| ·重组质粒的提取 | 第43-44页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第44页 |
| ·2 株猪流感病毒全基因序列测定及分析 | 第44页 |
| ·2 株猪流感病毒全基因系统进化树分析 | 第44页 |
| 2 结果与分析 | 第44-66页 |
| ·RT-PCR 扩增结果 | 第44-45页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定及测序鉴定 | 第45页 |
| ·全基因组的测序及序列分析 | 第45-57页 |
| ·A/SW/HN/1/10 株全基因组的测序及序列分析 | 第45-51页 |
| ·HA 基因分析 | 第45-46页 |
| ·NA 基因分析 | 第46-47页 |
| ·聚合酶蛋白 | 第47-49页 |
| ·核蛋白(Nucleoprotein，NP) | 第49-50页 |
| ·基质蛋白(Matrix protein，M) | 第50页 |
| ·非结构蛋白（nonstructural protein NS） | 第50-51页 |
| ·A/SW/HN/405/10 株全基因组的测序及序列分析 | 第51-57页 |
| ·HA 基因分析 | 第51-53页 |
| ·NA 基因分析 | 第53-54页 |
| ·聚合酶蛋白 | 第54-55页 |
| ·核蛋白(Nucleoprotein，NP) | 第55-56页 |
| ·基质蛋白(Matrix protein，M) | 第56-57页 |
| ·非结构蛋白（nonstructural protein NS） | 第57页 |
| ·系统进化树分析 | 第57-66页 |
| ·A/SW/HN/1/10 株全基因组系统进化树分析 | 第57-62页 |
| ·A/SW/HN/405/10 株全基因组系统进化树分析 | 第62-66页 |
| 3 结论与讨论 | 第66-69页 |
| 全文总结 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-75页 |
| 英文摘要 | 第75-77页 |
| 附录 | 第77-80页 |
