| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 第1章 前言 | 第9-11页 |
| 第2章 材料与方法 | 第11-24页 |
| ·材料与仪器 | 第11-12页 |
| ·主要试剂 | 第11页 |
| ·主要仪器 | 第11-12页 |
| ·细胞来源 | 第12页 |
| ·方法 | 第12-22页 |
| ·目的基因的扩增、鉴定及连接载体 PMD19-T | 第12-14页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第14页 |
| ·质粒抽提 | 第14-15页 |
| ·DNA 酶切反应及鉴定 | 第15页 |
| ·目的基因片段 egfp 和人 hgf 连接载体 pTRE-tight | 第15-16页 |
| ·XhoI 和 HindIII 双酶切 pTet-on Advanced 并连接 pFastBac18 | 第16-18页 |
| ·目的基因 egfp 和 hgf 片段与 pFast-Tet 的连接 | 第18-20页 |
| ·重组质粒 pFast-Tet-egfp 和 pFast-Tet-hgf 转化 DH10B，构建重组质粒 Bacmid | 第20页 |
| ·骨髓间充质干细胞的取材、分离培养及鉴定 | 第20-22页 |
| ·测重组杆状病毒滴度 | 第22-24页 |
| ·将鉴定正确的 Bacmid 转染 hBMSCs | 第22页 |
| ·elisa 检测 hgf 含量 | 第22-24页 |
| 第3章 结果 | 第24-31页 |
| ·扩增 egfp、hgf 后行 0.8%琼脂糖凝胶电泳 | 第24页 |
| ·PCR 产物胶连接于 PMD19-T 并转化大肠杆菌 DH5a | 第24-25页 |
| ·酶切 T 载体后回收目的基因片段并连接 pTRE-tight | 第25页 |
| ·XhoI 单酶切重组质粒 pFast-Tet、pTRE-egfp 和 pTRE-hgf | 第25-26页 |
| ·目的片段连接 pFast-Tet，转化大肠杆菌 DH5α | 第26-27页 |
| ·结晶紫染色法测得重组杆状病毒病毒滴度 | 第27页 |
| ·以密度梯度法培养的 hMSCs 倒置显微镜下观察如图： | 第27-28页 |
| ·hMSCs 和兔 MBSCs 生长曲线： | 第28页 |
| ·流式细胞仪检测 P4 代 hBMSCs 结果 | 第28页 |
| ·鉴定正确的 Ac-egfp 成功转染 BMSCs 后以不同浓度的 DOX 诱导其表达 | 第28-30页 |
| ·elisa 检测不同浓度 DOX 调控 hgf 在 hMSCs 中的不同程度表达 | 第30-31页 |
| 第4章 讨论 | 第31-33页 |
| 第5章 小结 | 第33-34页 |
| 第6章 结论 | 第34-35页 |
| 致谢 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-39页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第39-40页 |
| 综述 | 第40-48页 |
| 参考文献 | 第46-48页 |
