摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-25页 |
·SOD 的发现与命名 | 第11-12页 |
·SOD 的分布特征与进化 | 第12-13页 |
·SOD 的结构特征与进化 | 第13-16页 |
·Mn、Fe-SOD 的结构特征与分子进化 | 第13-15页 |
·Cu Zn-SOD 的结构特征与分子进化 | 第15-16页 |
·SOD 的理化性质研究 | 第16-18页 |
·SOD 的分类和主要理化性质比较 | 第16页 |
·SOD 的稳定性 | 第16-17页 |
·金属辅基和 SOD 酶活性 | 第17页 |
·环境pH 对SOD 的影响 | 第17-18页 |
·变性剂对SOD 的影响 | 第18页 |
·溶液介电常数对SOD 的影响 | 第18页 |
·SOD 在生命科学中的意义及其应用 | 第18-23页 |
·机体内自由基的形成与清除 | 第18-19页 |
·SOD 在临床中的应用 | 第19-21页 |
·SOD 在食品中的应用 | 第21页 |
·SOD 在化妆品中的应用 | 第21-22页 |
·SOD 在应用中存在的问题及现有解决方法 | 第22-23页 |
·Mn-SOD 的地位与潜在用途 | 第23-24页 |
·本论文主要研究内容及意义 | 第24-25页 |
·研究内容 | 第24页 |
·研究意义 | 第24-25页 |
第二章 柠康酸培养体系对 A. pascens DMDC12 的胁迫作用 与其超氧化物歧化酶活性的提高 | 第25-34页 |
·实验材料 | 第25-27页 |
·菌株 | 第25页 |
·产酶菌株的发酵 | 第25-26页 |
·试剂与仪器 | 第26-27页 |
·实验方法 | 第27-31页 |
·无细胞粗酶液(cell free extract)的提取 | 第27页 |
·无细胞粗酶液的十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第27-29页 |
·半干转移 | 第29页 |
·N-末端氨基酸序列测定 | 第29页 |
·酶活力测定 | 第29-30页 |
·蛋白质含量测定 | 第30-31页 |
·不同培养体系对菌体SOD 活性的影响 | 第31页 |
·结果与讨论 | 第31-33页 |
·节杆菌(A. pascens DMDC12)的生长曲线与 SOD 的表达量 | 第31-32页 |
·分子量约 24KDa 处蛋白的 N-末端氨基酸测序及序列比对 | 第32页 |
·不同培养体系对菌体SOD 活性的影响 | 第32-33页 |
·本章小结 | 第33-34页 |
第三章 A. pascens DMDC12 超氧化物 歧化酶的分离纯化 | 第34-44页 |
·SOD 的纯化流程 | 第34页 |
·试剂与仪器 | 第34-36页 |
·实验方法 | 第36-37页 |
·最佳产酶时间的确定 | 第36页 |
·最佳破碎条件的确定 | 第36页 |
·盐析条件确定 | 第36页 |
·DEAE Sepharose Fast Flow 弱阴离子交换层析 | 第36-37页 |
·Source 15Q 强阴离子交换层析 | 第37页 |
·SDS-PAGE 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第37页 |
·酶活检测 | 第37页 |
·蛋白浓度检测 | 第37页 |
·结果与讨论 | 第37-42页 |
·最佳产酶时间的确定 | 第37-38页 |
·最佳破碎条件的确定 | 第38-39页 |
·盐析条件确定 | 第39页 |
·DEAE Sepharose Fast Flow 弱阴离子交换层析 | 第39-40页 |
·Source 15Q 强阴离子交换层析 | 第40-41页 |
·A. pascens DMDC12 SOD 纯化结果总表 | 第41页 |
·SDS-PAGE 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第41-42页 |
·亚基分子量测定 | 第42页 |
·本章小结 | 第42-44页 |
第四章 A. pascens DMDC12 超氧化物歧化酶 的一般性质研究 | 第44-53页 |
·试剂与仪器 | 第44-45页 |
·实验方法 | 第45-46页 |
·超氧化物歧化酶种类的鉴定 | 第45页 |
·SOD 的紫外吸收 | 第45页 |
·金属离子对 SOD 的影响 | 第45页 |
·SOD 的热稳定性 | 第45页 |
·SOD 对 pH 的稳定性 | 第45-46页 |
·蛋白变性剂—脲对 SOD 活性的影响 | 第46页 |
·结果与讨论 | 第46-51页 |
·超氧化物歧化酶种类的鉴定 | 第46-47页 |
·SOD 的紫外吸收 | 第47-48页 |
·金属离子对酶的影响 | 第48-49页 |
·酶对温度的稳定性 | 第49-50页 |
·酶对pH 的稳定性 | 第50-51页 |
·蛋白变性剂—脲对 SOD 活性的影响 | 第51页 |
·本章小结 | 第51-53页 |
第五章 结论与展望 | 第53-55页 |
·结论 | 第53-54页 |
·展望 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-60页 |
成果 | 第60-61页 |
致谢 | 第61页 |