| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-24页 |
| ·病毒的发现 | 第14页 |
| ·病原学研究 | 第14-16页 |
| ·PEDV的分类地位 | 第14页 |
| ·PEDV的形态特征和理化性质 | 第14-15页 |
| ·PEDV的细胞培养特性 | 第15页 |
| ·PEDV的分子生物学特性 | 第15-16页 |
| ·病毒蛋白的研究 | 第16-18页 |
| ·S蛋白 | 第16-17页 |
| ·M蛋白 | 第17页 |
| ·N蛋白 | 第17页 |
| ·ORF3蛋白 | 第17-18页 |
| ·分子流行病学 | 第18-19页 |
| ·S基因 | 第18页 |
| ·M基因 | 第18页 |
| ·N基因 | 第18-19页 |
| ·ORF3基因 | 第19页 |
| ·实验室诊断方法 | 第19-21页 |
| ·RT-PCR方法 | 第19-20页 |
| ·免疫电镜法 | 第20页 |
| ·ELISA法 | 第20页 |
| ·免疫荧光法 | 第20页 |
| ·微量血清中和试验 | 第20-21页 |
| ·原位杂交技术 | 第21页 |
| ·疫苗研究进展 | 第21-23页 |
| ·灭活疫苗 | 第21页 |
| ·弱毒疫苗 | 第21-22页 |
| ·转基因植物疫苗 | 第22页 |
| ·乳酸杆菌疫苗 | 第22页 |
| ·亚单位疫苗 | 第22-23页 |
| ·研究目的与意义 | 第23-24页 |
| 第二章 猪流行性腹泻病毒的遗传变异分析 | 第24-41页 |
| 摘要 | 第24页 |
| ·材料与方法 | 第24-28页 |
| ·主要试剂 | 第24-25页 |
| ·病料采集及处理 | 第25页 |
| ·引物设计 | 第25-26页 |
| ·临床样品检测 | 第26-27页 |
| ·病毒基因的克隆及测序 | 第27-28页 |
| ·病毒基因组序列拼接分析 | 第28页 |
| ·结果 | 第28-39页 |
| ·临床腹泻样品RT-PCR检测 | 第28页 |
| ·序列测定结果 | 第28-30页 |
| ·ZJCZ4Blast分析结果 | 第30-31页 |
| ·ZJCZ4全长基因序列分析 | 第31-32页 |
| ·主要结构蛋白氨基酸序列比较 | 第32-37页 |
| ·ORF3基因分析 | 第37-39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| 第三章 猪流行性腹泻病毒RT-PCR鉴别诊断方法的建立 | 第41-49页 |
| 摘要 | 第41页 |
| ·材料与方法 | 第41-43页 |
| ·毒株与样品来源 | 第41-42页 |
| ·主要试剂 | 第42页 |
| ·引物设计 | 第42页 |
| ·样品中RNA提取及反转录 | 第42页 |
| ·鉴别诊断RT-PCR扩增及最佳Tm值的确定 | 第42-43页 |
| ·RT-PCR最佳引物浓度的确定 | 第43页 |
| ·特异性试验 | 第43页 |
| ·敏感性试验 | 第43页 |
| ·RT-PCR检测临床样品 | 第43页 |
| ·结果 | 第43-47页 |
| ·RT-PCR反应条件的优化 | 第43-45页 |
| ·RT-PCR特异性鉴定 | 第45页 |
| ·RT-PCR敏感性试验 | 第45页 |
| ·临床样品的检测 | 第45-47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| 第四章 猪流行性腹泻病毒N蛋白抗原性分析及单克隆抗体的制备 | 第49-67页 |
| 摘要 | 第49-50页 |
| ·材料与方法 | 第50-56页 |
| ·菌种、载体和血清 | 第50页 |
| ·主要试剂和耗材 | 第50页 |
| ·引物设计 | 第50页 |
| ·N基因的扩增及克隆 | 第50-51页 |
| ·重组表达质粒的构建及鉴定 | 第51页 |
| ·重组质粒的诱导表达鉴定及纯化 | 第51-52页 |
| ·N蛋白抗原性分析 | 第52-53页 |
| ·抗N蛋白单克隆抗体的制备 | 第53-55页 |
| ·多克隆抗体的制备及效价测定 | 第55-56页 |
| ·单克隆抗体的初步应用 | 第56页 |
| ·结果 | 第56-65页 |
| ·N基因的扩增 | 第56-57页 |
| ·N基因重组表达质粒的鉴定 | 第57页 |
| ·重组N蛋白的表达 | 第57-58页 |
| ·N蛋白的纯化及westernblot分析 | 第58-59页 |
| ·间接ELISA方法的初步建立 | 第59-62页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第62页 |
| ·单克隆抗体的初步应用 | 第62-65页 |
| ·讨论 | 第65-67页 |
| 第五章 全文总结 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 作者简介 | 第78页 |