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新型肺炎多糖结合蛋白载体疫苗的制备及表征

摘要第1-11页
Abstract第11-13页
英文缩写表第13-14页
1 文献综述第14-24页
 引言第14页
   ·肺炎链球菌第14-16页
     ·肺炎链球菌的起源及生物学特征第14-15页
     ·肺炎链球菌的危害第15-16页
   ·肺炎疫苗的发展第16-17页
     ·肺炎荚膜多糖疫苗第16页
     ·肺炎荚膜多糖结合疫苗第16页
     ·肺炎疫苗存在的问题第16-17页
   ·点击化学概述第17-18页
   ·异性双功能交联剂第18-19页
   ·肺炎荚膜结合蛋白载体疫苗纯化技术第19-20页
     ·凝胶排阻色谱层析第19-20页
     ·超滤与透析第20页
   ·肺炎荚膜多糖结合蛋白载体疫苗的表征方法第20-22页
     ·高效液相色谱技术第20-21页
     ·动态光散射技术第21页
     ·圆二色光谱技术第21-22页
     ·内源荧光光谱技术第22页
     ·谱核磁共振技术第22页
   ·肺炎荚膜多糖结合蛋白疫苗的免疫学性质检测方法第22页
   ·立题依据与实验思路第22-24页
2 新型肺炎多糖结合蛋白载体疫苗的合成第24-34页
 引言第24页
   ·实验材料第24-25页
     ·肺炎荚膜多糖第24页
     ·破伤风类毒素( TT )第24页
     ·试剂第24-25页
     ·实验耗材第25页
     ·Superdex -200 凝胶柱第25页
     ·BCA 蛋白浓度检测试剂盒第25页
     ·主要仪器第25页
   ·试验方法第25-29页
     ·破伤风类毒素的纯化第25-26页
     ·肺炎荚膜多糖预处理第26页
     ·肺炎荚膜多糖与破伤风类毒素( TT )的偶联第26-27页
     ·肺炎荚膜多糖结合蛋白载体疫苗的纯化第27-28页
     ·疫苗冻干样本的制备第28-29页
   ·结果与分析第29-33页
     ·破伤风类毒素(Tetanustoxoid)的纯化第29页
     ·疫苗的纯化第29-30页
     ·疫苗纯度鉴定第30-31页
     ·多糖回收率第31页
     ·肺炎荚膜多糖与载体蛋白比第31-33页
   ·讨论第33页
   ·小结第33-34页
3. 肺炎荚膜多糖结合蛋白载体疫苗的结构表征第34-44页
 引言第34页
   ·实验材料第34-35页
     ·实验耗材第34页
     ·试剂第34页
     ·色谱柱第34页
     ·实验仪器第34-35页
   ·实验方法第35-37页
     ·空间排阻层析(Size Exclusion Chromatography,SEC)第35页
     ·动态光散射(Dynamic Light Scattering ,DLS)第35页
     ·内源荧光检测(Intrinsic fluore scence ,IF)第35页
     ·圆二色光谱( Circular Dichroism Spectroscopy, CD)第35-36页
     ·核磁共振( Nuclear Magnetic Resonance ,NMR)第36页
     ·抗酶解性质检测第36-37页
   ·结果与分析第37-42页
     ·凝胶排阻层析与动态光散射结果第37-38页
     ·内源荧光光谱检测结果第38-39页
     ·圆二色光谱检测结果第39页
     ·核磁共振结果分析第39-40页
     ·酶解结果分析第40-42页
   ·讨论第42-43页
     ·凝胶排阻层析与动态光散射第42页
     ·内源荧光光谱检测第42页
     ·圆二色光谱检测第42页
     ·核磁共振检测第42页
     ·酶解分析第42-43页
   ·小结第43-44页
4. 新型肺炎荚膜多糖结合蛋白载体疫苗的免疫学性质检测第44-56页
 引言第44页
   ·实验材料第44-45页
     ·实验动物第44页
     ·注射样品第44页
     ·实验耗材第44页
     ·试剂第44页
     ·实验仪器第44-45页
   ·实验方法第45-50页
     ·动物免疫第45页
     ·血清采集第45页
     ·包被样品的制备第45-46页
     ·小鼠抗肺炎荚膜多糖IgM 、IgG及其抗体亚型效价的测定第46-47页
     ·小鼠抗破伤风类毒素IgG抗体效价检测第47-48页
     ·小鼠抗肺炎荚膜多糖IgG抗体专一性检测第48-49页
     ·小鼠抗肺炎荚膜多糖IgG抗体亲和力检测第49-50页
     ·结果与分子第50-53页
     ·小鼠抗肺炎荚膜多糖IgM检测第50页
     ·小鼠抗肺炎荚膜多糖特异性 Ig G 检测第50-52页
     ·小鼠抗破伤风类毒素IgG检测结果第52页
     ·小鼠抗肺炎荚膜多糖IgG抗体专一性检测第52-53页
     ·小鼠抗肺炎荚膜多糖IgG抗体亲和力检测第53页
   ·讨论第53-55页
     ·小鼠抗肺炎荚膜多糖IgM的检测第53-54页
     ·小鼠抗肺炎荚膜多糖IgG的检测第54页
     ·小鼠抗肺炎荚膜多糖IgG亚型的检测第54页
     ·小鼠抗破伤风类毒素IgG的检测第54-55页
   ·小结第55-56页
5 结论与展望第56-58页
参考文献第58-61页
致谢第61-62页
攻读学位期间发表论文与研究成果清单第62-63页
附录第63页

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